植物乳杆菌胞外多糖对断奶仔猪生长性能、血清生化与免疫指标及肠道组织学的影响

旨在探究植物乳杆菌胞外多糖(LP-EPS)对断奶仔猪的生长性能、血清生化与免疫指标、抗氧化指标、肠道形态结构和肠道细胞凋亡的影响。试验选取体重相近的26日龄“杜×长×大”三元杂交断奶仔猪100头,公母各半,随机分为对照组和试验组,每组5个重复,每个重复10头,对照组饲喂基础日粮,试验组饲喂基础日粮+LP-EPS 0.4 mg/kg,试验期30 d;试验期间测定并统计2组断奶仔猪的各生产性能指标,试验结束时采集2组猪的血液和肠道组织,进行生化和免疫指标检测、肠道组织学观察以及TUNEL染色试验检测肠道细胞凋亡。结果显示:与对照组相比,添加LP-EPS的断奶仔猪,腹泻率和死亡率明显下降,平均日增重显著增加(P<0.05),料重比明显降低(P<0.05),血清中的总蛋白、白蛋白、免疫球蛋白G、免疫球蛋白A及总抗氧化能力水平明显上升(P<0.05)。此外,与对照组相比,日粮中添加LP-EPS显著提高了断奶仔猪的十二指肠、空肠和盲肠的绒毛高度(P<0.05),以及十二指肠、盲肠的绒毛高度/隐窝深度(P<0.05)。日粮中添加LP-EPS极显著降低了空肠(P<0.001)和盲肠(P<0.01)的细胞凋亡阳性率。提示:日粮中添加0.4 mg/kg的LP-EPS可提高断奶仔猪的生长性能,改善肠道绒毛形态,增强机体的免疫功能和抗氧化功能,减少肠道细胞凋亡。

不同浓度微量元素处理对斑兰叶组培过程中挥发性物质及角鲨烯相关酶活性的影响

为了研究不同浓度微量元素处理组培斑兰叶的挥发性物质及角鲨烯相关酶活性的变化,本研究以不同浓度锌(Zn)、镧(La)元素处理的组培斑兰叶为原料,采用GC-MS技术对其挥发性物质进行分析,并测定角鲨烯代谢关键酶活性。结果表明:不同浓度微量元素处理的组培斑兰叶挥发性物质的数量、含量均存在差异,与未处理的组培斑兰叶相比,4 mg/LZn元素处理和1、2、4 mg/LLa元素处理的组培斑兰叶中的挥发性物质较多。Zn、La元素处理均使组培斑兰叶中的醇类物质含量增加、烯烃类物质含量减少;Zn、La元素处理均使组培斑兰叶中的角鲨烯含量明显减少,2 mg/LZn元素处理使组培斑兰叶中的β-谷甾醇、豆甾醇、棕榈酸乙酯、3-甲基-2-(5H)-呋喃酮、2,3-二氢-3,5二羟基-6-甲基-4(h)-吡喃-4-酮含量增加,角鲨烯和叶绿醇含量减少;8 mg/L La元素处理组培斑兰叶的叶绿醇含量最高。角鲨烯代谢相关酶活性在组培斑兰叶培养过程中有一定变化,羊毛甾醇合成酶(LSS)和鲨烯环氧酶(SE)在混合物(愈伤组织开始分化出芽)中活性较强,角鲨烯合成酶(SQS)在不定根中活性较强。不同浓度微量元素处理对角鲨烯相关酶活性有一定影响,不同浓度Zn元素处理的组培斑兰叶中角鲨烯含量与LSS、SE、SQS酶活性均呈正相关;La元素处理组培斑兰叶中角鲨烯含量与LSS、SQS酶活性呈负相关,与SE酶活性呈正相关。研究结果丰富了微量元素调控斑兰叶挥发性物质的相关理论研究,为挖掘提高斑兰叶香气品质的组培新技术提供理论依据。

牦牛源肠道芽孢杆菌的分离、鉴定及生物学特性研究

为分离鉴定牦牛肠道有益菌的菌种资源,采集了西藏牦牛的肠道内容物,从中分离、纯化优势菌种,经16S rDNA序列比对和生化试验鉴定种属,通过革兰染色观察其形态,并进行抗逆性能、黏附能力、溶血活性、体外抑菌能力和药敏特性等生理生化试验鉴定了其菌种特性。结果从牦牛肠道内容物中成功分离纯化获得4株菌株,分别鉴定为枯草芽孢杆菌(XZMN-1)、短小芽孢杆菌(XZMN-2)、贝莱斯芽孢杆菌(XZMN-3)和蜡样芽孢杆菌(XZMN-4)。4株分离菌株均为γ-溶血、不具有生物膜,耐胆盐性、耐酸性强,能在pH值为3.0的培养基中存活;XZMN-3和XZMN-4具有耐高温性,其菌液在80℃下孵育30 min仍能检测到活性。4株菌对大多数抗生素敏感,在不同溶剂中的疏水性相差较大(1.91%~93.15%),自凝集性在13.29%~60.63%之间;4株菌均对沙门氏菌有抑制作用,XZMN-1和XZMN-2对金黄色葡萄球菌有抑制作用。综上说明,分离纯化的4株芽孢杆菌抗逆性高,黏附性能强,其中XZMN-1对大多数抗生素敏感,可作为开发高活性益生菌饲料添加剂的候选株。

状态机无关的TLS数据采集方法研究

网络安全审计系统用于监督规范用户行为,防止内部人员对网络的损害,对于保障内网安全有着重要的意义.传输层安全协议是网络上应用广泛的安全协议,由于协议对数据进行加密传输,在审计系统中需要采取一定的技术手段将其转化为相应的明文后才能进行分析审计工作.本文基于多核网络处理器实现传输层安全协议数据采集,提出了一种状态机无关的数据采集方法,使得系统具有更高的灵活性和可维护性.针对私钥操作,提出一种结构化私钥信息缓存算法,提高了系统的性能,实验表明当配置1024位和2048位RSA证书时,系统每秒新建连接数性能分别提升了130%和50%.

人骨形成蛋白7基因修饰的兔骨髓基质干细胞异位成骨实验

[目的]通过人骨形成蛋白7(human bone morphogenetic protein 7,BMP7)基因修饰的兔骨髓基质干细胞(m esenchymal stem cells,MSCs)与聚乳酸-羟基乙酸(polycleclide-co-plycoclide,PLGA)支架复合,进行自体皮下异位成骨实验,探索BMP-7基因治疗与组织工程技术相结合的可行性。[方法]PLGA与腺病毒Ad-BMP-7感染后的兔MSCs共培养,电镜观察了解细胞在PLGA上黏附、生长和合成分泌骨基质成分的情况;将转染基因的细胞和未转染基因的细胞分别与PLGA支架复合,构建组织工程化骨并植入体内,通过组织观察新骨形成情况。[结果]制备得到的PLGA为疏松多孔的网格样结构,具有一定的韧性和强度。将腺病毒感染的骨髓基质干细胞接种于修剪成一定形状的PLGA上,经电镜观察可见细胞贴附于材料表面和孔隙内并增殖。异位成骨实验证实空白对照PLGA孔隙内无新骨形成,对照细胞组内有部分新生骨形成,而Ad-BMP-7实验组形成的新生骨组织面积更大(P<0.05)。[结论]应用hBMP-7基因修饰的MSCs作为骨组织工程的种子细胞,可望取得更强的成骨能力。

构建人骨形态发生蛋白2及血管内皮生长因子165基因共表达重组腺病毒在兔骨髓基质干细胞中的表达

目的:构建人骨形态发生蛋白2及血管内皮生长因子基因共表达腺病毒并观察其在兔骨髓基质干细胞中的表达。方法:实验于2005-03/12在解放军第四军医大学唐都医院全军骨肿瘤研究所完成。①分别克隆人骨形态发生蛋白2及血管内皮生长因子基因,分别依次亚克隆至穿梭载体构建重组穿梭质粒pAdT-B2V并酶切鉴定;后经PmeI酶切线性化后与骨架质粒感受态细胞AdEasier-1Cells经电穿孔法同源重组得到腺病毒质粒pAdBMP-7并酶切鉴定。②PacI酶切线性化后的pAdBMP-7腺病毒质粒转染293细胞包装后获得复制缺陷型重组腺病毒AdBMP-7,在荧光显微镜下计算表达绿色荧光蛋白细胞个数,测定AdB2V滴度。③将AdBMP-7体外感染兔骨髓基质干细胞后,以荧光显微镜观察绿色荧光蛋白表达及反转录-聚合酶链反应方法鉴定外源基因的表达,以β-肌动蛋白为内参照,未感染细胞为对照。④AdB2V感染兔骨髓基质干细胞后72h以免疫细胞化学染色方法检测外源基因的表达,以未感染组为对照。结果:①酶切鉴定表明外源基因已插入到pAdTrack-CMV穿梭质粒且腺病毒重组质粒pAdBMP-7构建成功。②经293细胞包装3d后可观察到绿色荧光蛋白表达,氯化铯梯度离心法最终获得约3×109efu/L滴度的重组腺病毒。③体外感染兔骨髓基质干细胞后荧光显微镜观察及反转录-聚合酶链反应证实外源基因可在兔骨髓基质干细胞中表达,未感染组为阴性。④AdB2V感染兔骨髓基质干细胞后以免疫细胞化学染色均观察到外源基因的阳性表达,未感染组呈阴性表达。结论:成功构建人骨形态发生蛋白2及血管内皮生长因子165基因共表达重组腺病毒,证实了其在兔骨髓基质干细胞的表达,为骨再生的局部联和基因治疗打下基础。

网络安全审计系统中FTP解析策略研究

常见的防火墙、防病毒、入侵检测等系统,对于防止外部非法入侵都有一定的作用,但对于防范内部人员对企业网等网络的破坏却效果甚微。网络安全审计系统针对内部网络进行监控,受到越来越广泛的重视。FTP由于其简单性与易用性,广泛运用于企业网中。针对FTP协议控制流和实时数据流分离的特点,提出了基于数据流信息封装传递的解析策略。该策略可实现FTP命令、响应的正确解析,获取实时建立的数据流端口,关联数据流信息,并实时产生审计日志。基于网络处理器平台实现了该策略,平稳阶段系统每秒事务处理量大于3万,吞吐率达到1 300 Mbps。

辛伐他汀诱导促进骨形成蛋白-7基因修饰的兔间充质干细胞的成骨转化

目的:研究辛伐他汀诱导对骨形成蛋白-7(BMP-7)基因修饰的间充质干细胞(MSCs)增殖和分化表型的影响。方法:将辛伐他汀诱导和未经诱导的兔MSCs分别转导BMP-7基因后,Westernblotting检测转导后细胞BMP-7的表达;通过观察细胞生长以及碱性磷酸酶活性和测定骨钙素含量,分析辛伐他汀诱导对BMP-7基因修饰的MSCs的增殖和分化表型的影响。结果:转导后BMP-7基因在诱导组和未诱导组MSCs中均有表达,诱导组细胞BMP-7表达量、碱性磷酸酶活性和骨钙素含量均比较未诱导组明显增高。结论:转导前辛伐他汀诱导能够促进BMP-7基因修饰的MSCs的成骨转化。

不同能量Er,Cr:YSGG激光照射牙骨质后的形态学分析

目的:观察不同能量的Er,Cr:YSGG激光照射根面后的牙骨质表面形态变化,探讨此激光用于牙周病治疗及根面充填前预处理的可行性。方法:选用离体第一前磨牙,使用水冷却高速钻,釉牙骨质界向下延伸6mm区域,获取厚2mm,面积约6×5mm2标本,不同能量(1、2、3、4、5W)激光垂直照射根面,常规制SEM标本后扫描电镜观察。结果:随着能量的增加,可观察到牙根表面由较为平坦的凹陷至逐渐加深的弹坑样改变,大部分表面玷污层被去除。1W、2W激光照射后,照射区域较为平坦,牙骨质结构完整与清晰,3W、4W组,照射区内(弹坑内部),牙骨质呈现波浪状,片层状外观。5W组可见牙骨质丧失,牙本质小管的暴露。各组均未发现熔融,碳化现象。结论:Er,Cr:YSGG激光照射根面后,可去除牙骨质表面玷污层,并在微观上形成表面凹陷和基底较为平坦的弹坑,低能量的此激光(4W以下)临床上有望用于牙周治疗的根面处理中,1～2W激光更适用于修复前根面的预处理。

人骨形成蛋白-7基因增强的组织工程化骨修复骨缺损

目的:探讨腺病毒介导人骨形成蛋白-7(hBMP-7)基因修饰的骨髓间充质干细胞(MSCs)与聚乳酸-聚乙醇酸(PLGA)生物材料复合后修复兔桡骨缺损的效果。方法:制备含hBMP-7基因的重组腺病毒Ad-BMP-7并感染MSCs。制备新西兰大白兔桡骨1.3cm缺损模型,修复实验分为4组,BMP-7基因转染的MSCs-PLGA复合物组(A组)、未经转染的MSCs复合PLGA修复组(B组)、单纯PLGA修复组(C组)和对照组(D组)。分别于术后8、12周进行大体观察、X线检测和组织学检测。结果:定量检测分析结果证实经转染的MSCs修复骨缺损的成骨速度和成骨量均优于未转染组,单纯PLGA组和对照组均未见骨缺损得到骨性修复。结论:hBMP-7基因转染能够提高MSCs形成组织工程化骨组织和修复骨缺损的能力。

TLS协议现状与研究综述

传输层安全协议是互联网上一种应用广泛的安全协议,已成为传输层安全的事实标准。在多年的应用过程中,不断出现针对协议的攻击,围绕协议的安全性,出现了大量的研究成果。同时,由于协议为系统带来额外负载,协议的执行效率一直是研究的热点。提升协议安全性与提高协议性能,对于协议的普及发展具有重要的意义。本文针对传输层安全协议的安全性和性能研究进展进行了分析和总结。

基于哈希的TLS会话重用数据采集方法

网络安全审计系统用以审计用户行为保障内网安全,已受到越来越多的关注和重视。数据采集作为后续分析审计工作的基础,对系统起着至关重要的作用。传输层安全协议TLS是网络上应用广泛的安全协议,为建立起一条安全的TLS连接,客户端和服务器需要额外的握手过程进行协商,这一过程是十分耗时的。TLS会话重用特性使得双方重用已经协商好的会话参数,从而减轻握手开销。作为提高TLS性能的有效方式,会话重用已得到广泛的支持和应用。本文讨论了TLS协议重用会话的数据采集问题,通过分析session ID和session ticket两种会话重用方式的流程和特性,提出了基于哈希的会话重用采集方法。最后,在多核网络处理器平台上实现了该方法,实验证明了方法的有效性。

血管内皮生长因子在实验性根尖周炎中的表达

目的:通过检测正常根尖周组织和实验性根尖周炎进展过程中根尖周组织血管内皮生长因子(VEGF)免疫组化表达的分布情况及规律,探讨其在根尖周组织炎症进展中的作用。方法:HE染色与VEGF免疫组化染色,光镜观察大鼠根尖周炎进展情况和VEGF在根尖周组织的表达部位与程度,检测VEGF表达阳性部位的平均积分光密度值。结果:根尖孔周围炎性浸润区、根尖周肉芽组织及吸收程度严重的根尖周骨组织中,VEGF表达较正常组强,并有随牙髓暴露时间增长而逐渐增高趋势。结论:VEGF参与根尖周炎症的进展及肉芽组织形成,可能参与调节根尖骨吸收。

SRG基因的克隆及原核表达

目的克隆SRG基因、原核表达并鉴定。方法从培养的人骨肉瘤细胞SOSP-9607中提取总RNA,经RT-PCR获得SRG基因。将该基因克隆到pGEM-T-Easy克隆载体中,测序、鉴定。将测序正确的SRG基因亚克隆到pET-28(a+)表达载体中,构建SRG表达载体,IPTG诱导表达2h^6h,做SDS-PAGE分析,鉴定SRG蛋白的表达。结果DNA测序证明,获得了SRG基因,其序列与GenBank中报道序列完全一致。SDS-PAGE分析表明,SRG蛋白获得高效表达,其相对分子质量为22kDa,表达量约占菌体总蛋白的25%。结论SRG基因的克隆和表达均获得了成功,为进一步探讨SRG基因在骨肉瘤诊治中应用奠定了基础。

基于混合神经网络的槽式太阳能集热场出口温度预测研究

为解决槽式太阳能集热场实际现场工况难以满足现有热性能测试标准的难题,提出一种基于混合神经网络(ALSTM)模型预测槽式太阳能集热场出口温度的方法。首先对中国科学院电工研究所延庆、常州龙腾乌拉特中旗、中广核德令哈、中船乌拉特中旗4处槽式太阳能集热场动态热性能实验数据和气象数据进行预处理与相关性分析,形成训练样本数据和验证样本数据;其次对该网络模型进行训练与优化,最后进行验证,得出上述4处集热场实际出口温度与预测出口温度的最大相对误差分别为3.00%、0.31%、1.45%、1.95%。证明了该模型的预测精度较高,为槽式太阳能集热场实际现场热性能预测与评价提供了一种新的方法。

情景教学模式在牙体牙髓病学临床前期实习中的应用

目的:将情景教学模式应用在牙体牙髓病学临床前期实习中,以期提高教学质量。方法:将中国医科大学95期口腔医学专业19班32名学生随机分为2组,每组16人。分别采用情景教学模式、传统授课模式授课,通过考试和问卷调查评价教学效果。理论考试成绩采用SPSS 17.0软件包进行t检验。结果:在基础知识、病例分析、口腔检查方面,2组学生之间的分数无显著差异(P>0.05),实验组学生在病史采集、病历书写、实践总分、总成绩方面的分数高于对照组,差异显著(P<0.05)。实验组对情景教学模式普遍持赞成观点。结论:参与情景教学模式的学生喜欢这一新的教学方式。情景教学模式能够提高学生各方面的能力,获得满意的教学效果,适用于临床前期实习。

Stathmin基因在人成骨肉瘤细胞中的表达及意义

背景与目的:Stathmin作为细胞信号转导分子在细胞分化及恶性肿瘤发生、发展上发挥重要作用。本研究旨在探讨Stathmin基因在人成骨肉瘤细胞中的表达,并探讨阻断其表达对该肿瘤细胞的生物学行为的影响。方法:RT-PCR及原位杂交法检测2个人成骨肉瘤细胞系及45例人成骨肉瘤组织中Stathmin基因表达情况;以高表达Stathmin基因的人成骨肉瘤细胞系SOSP-9607为靶细胞、反义Stathmin(ASODN)为阻断剂,通过MTT实验观察ASODN对该细胞系的生长抑制作用,并用流式细胞仪分析其对细胞增殖周期的影响。结果:Stathmin基因在2个成骨肉瘤细胞系高表达,45例成骨肉瘤组织中24例呈阳性表达(阳性率为53.3%),10例正常组织中2例呈弱阳性表达,Stathmin在人成骨肉瘤组织的表达与正常组织中的表达有显著性差异(P<0.05)。ASODN明显抑制成骨肉瘤细胞的生长(P<0.05)。SOSP-9607在ASODN作用下,细胞分裂阻滞在分裂期的中期,并诱导细胞发生凋亡。结论:Stathmin基因在人成骨肉瘤中高表达,该基因有望成为成骨肉瘤生物治疗中的重要靶点。

单克隆抗体3A5-复方中药安迪偶联物的肝癌导向治疗

目的:探讨单克隆抗体3A5-复方中药安迪粉针剂偶联物(3A5-Andi)的肝癌导向治疗作用。方法:用单克隆抗体3A5与安迪粉针剂(Andi)制备偶联物,ELISA检测3A5-Andi偶联物保持对人肝癌BEL-7 402细胞的免疫反应性;采用小鼠/裸鼠移植性肿瘤模型,5-FU为阳性对照组,观察12、24和50mg/kg的导向治疗作用。结果:克隆生成法显示,3A5-Andi具有比Andi更强的细胞毒性,二者的IC_(50)分别为2.8 mg/L和5.1 mg/L(P<0.01)。24 mg/kg和50 mg/kg 3A5-Andi ip对小鼠移植性腹水型H_(22)肝癌的生命延长率(LPR)分别为133％和167％(P<0.05);而12mg/kg和24mg/kg Andi的LPR分别为112％和138％(P<0.05)。24 mg/kg 3A5-Andi和12 mg/kg Andi iv对裸鼠移植性人肝癌BEL-7402细胞瘤的瘤重抑制率分别为63.5％和52.2％(P>0.05)。24 mg/kg 3A5-Andi和12 mg/kg Andipt对BEL-7402人肝癌的抑制率分别为75.4％和61.0％(P>0.05)。结论:3A5-Andi偶联物具有一定的肿瘤导向治疗作用;3A5-Andi与Andi比较,3A5-Andi对裸鼠移植人肝癌BEL-7402具有较强的治疗作用;pt方式3A5-Andi比iv疗效更好。