氧化应激诱导的自噬与隐睾症及畸形精子症的相关性研究

为了分析氧化应激诱导的自噬与隐睾症及畸形精子症的相关性,首先采用高通量的qPCR array 技术检测44 个自噬相关基因在隐睾症患者和生育力正常男性的睾丸组织中的表达差异,筛选出11 个表达差异显著的自噬相关基因;然后用不同浓度过氧化氢(hydrogen peroxide, H2O2)分别处理小鼠精原细胞系GC-1 spg和睾丸支持细胞系TM4,通过3-(4,5-二甲基噻唑-2)-2,5-二苯基四氮唑溴盐[(3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyltetrazolium bromide, MTT)]分析H2O2处理对细胞增殖活性的影响,并采用实时荧光定量PCR (real-time quantitativePCR, qRT-PCR)检测11 个差异表达的自噬相关基因在细胞氧化应激条件下的表达;最后利用GEO (GeneExpression Omnibus)数据库分析自噬相关基因与畸形精子症的关系。通过综合比较发现, BCL2L1、EIF2AK3 在隐睾症、畸形精子症及氧化应激过程中均表达上调,表明这两个基因与男性不育的发生有关,推测其作用机制可能是通过响应氧化应激信号来实现。

核受体NR6A1与NDRG1互作促进肝癌进展

核受体在细胞稳态的维持以及疾病的发生发展等方面发挥着重要的作用。为了探究核受体亚家族6A组成员1(nuclear receptor subfamily 6 group A member 1,NR6A1)在肝癌中的作用及机制,首先,分析了癌症基因组图谱(The Cancer Genome Atlas,TCGA)等数据库信息,发现NR6A1在肝癌中异常高表达且与患者预后不良有关;然后,通过CCK-8(Cell Counting Kit-8)、5-乙炔基-2′-脱氧尿苷(5-ethynyl-2′-deoxyuridine,EdU)、划痕实验发现,干扰NR6A1使肝癌细胞的增殖明显受到抑制但不影响细胞的迁移;其次,通过免疫共沉淀、免疫荧光、RNA干扰和过表达等实验,鉴定出N-myc下游调控基因1(N-myc downstream-regulated gene 1,NDRG1)是NR6A1在肝癌中的互作蛋白质,二者在肝癌中的表达呈正相关,且NR6A1正调控NDRG1的表达;最后,利用功能拯救实验证实,干扰NDRG1可以抑制NR6A1过表达造成的肝癌细胞增殖增强的现象。综上可知,NR6A1通过与NDRG1相互结合且上调NDRG1的表达来发挥促癌作用。