腺病毒介导的TIMP-2基因对恶性胶质瘤血管生成能力的影响

目的 探讨基质金属蛋白酶组织抑制因子 (TIMP 2 )参于恶性脑胶质瘤发生发展 ,及对脑胶质细胞瘤血管生成的抑制作用。方法 选用含TIMP 2基因的重组腺病毒载体 ,体外转染人胶质瘤细胞系U87,用逆转录酶 多聚酶链反应法 (RT PCR)检测其mRNA的表达 ,并用酶联免疫分析法(ELISA)检测其蛋白表达。用四唑蓝比色法 (MTT)法检测含TIMP 2上清对人脐静脉内皮细胞生长(ECV 30 4 )的影响 ,并检测它对鸡胚绒毛尿囊膜 (CAM)血管生成的作用。结果 RT PCR、Western结果表明转染AdTIMP 2病毒后的U87细胞TIMP 2表达上调。MTT示蛋白含量为 10 0ng/ml的TIMP 2对人脐静脉内皮细胞生长表现出明显的抑制作用。CAM结果显示AdTIMP 2组可见血管稀疏区 ,并出现血管结构紊乱。血管指数 :U87组为 (91.1± 8.2 ) %、AdX gal组为 (6 2 .4± 3.3) % ,AdTIMP 2组为 (45 .7± 6 .1) %。VIII因子相关抗原的表达病理指数U87组为 17.2 7± 7.4 8,AdX gal组为 16 .98± 7.5 4 ,AdTIMP 2组为 6 .78± 3.37。结论 TIMP

基质金属蛋白酶组织抑制剂-2对胶质瘤血管生成的影响

目的 探讨基质金属蛋白酶组织抑制剂-2(TIMP-2)对人脑胶质瘤细胞血管生成的抑制作用。方法 腺病毒 AdTIMP-2转染人胶质瘤细胞系U87,用酶联免疫分析法(ELISA)检测其表达,用噻唑蓝比色法(MTT)检测含TIMP-2上清对人脐静脉内皮细胞生长的影响,并检测它对鸡胚绒毛尿囊膜(CAM)血管生成的作用。先建立裸鼠胶质瘤动物模型,体内检测血管内皮第Ⅷ因子的表达强度。结果 U87转染 AdTIMP-2病毒后 TIMP-2表达上调,100μg/L的 TIMP-2对人脐静脉内皮细胞生长表现出明显的抑制作用,TIMP-2对鸡胚尿囊膜血管形成有明显的抑制作用,血管指数:U87组为(91.1±8.2)％、AdX-gal组为(62.4±3.3)％,AdTIMP-2组为(45.7±6.1)％。Ⅷ因子相关抗原的表达在各组中均为阳性,病理指数 U87组为 17.27±7.48,AdX-gal组为 16.98±7.54,AdTIMP-2组为 6.78±3.37,后者与前两者相比较,差异有显著性(P<0.05)。结论TIMP-2具有明显的抗血管生成作用,可作为有效的抗胶质瘤血管生成治疗基因。