河北省细菌耐药监测网耐药数据质量分析:鲍曼不动杆菌对阿米卡星耐药数据问题初步探讨

目的为了提高我省细菌耐药监测网数据质量,探讨我省细菌耐药监测网耐药数据现存的质量问题。方法分析我省细菌耐药监测网三级医院成员单位上报的耐药数据中鲍曼不动杆菌对阿米卡星的耐药率。收集我市4家三级甲等医院临床分离的鲍曼不动杆菌538株,对比各种药敏试验法结果一致性以验证分析中发现的问题。结果分析发现我省细菌耐药监测网中鲍曼不动杆菌对阿米卡星的耐药数据存在明显异常和误差。通过试验验证发现通过各种药敏试验方法检测鲍曼不动杆菌对阿米卡星的药敏结果并不一致。结论鲍曼不动杆菌对阿米卡星药敏试验采用全自动药敏分析系统并不可靠,需要配合纸片扩散法、E-test等方法进行验证。需要不断细化微生物药敏试验工作,提高耐药监测网各成员单位的数据质量。

实时荧光聚合酶链反应熔解曲线检测人类白细胞抗原B27方法建立及评价

目的构建并评价实时荧光聚合酶链反应(PCR)熔解曲线法检测人类白细胞抗原-B27(HLA-B27)。方法通过采用本研究所构建的实时荧光PCR熔解曲线法和微量淋巴细胞毒法、实时荧光定量PCR法检测81例标本,并对3种方法进行评价。结果实时荧光PCR熔解曲线法与实时荧光定量PCR的敏感度和特异度均达到93.8%、90.9%,明显优于微量淋巴细胞毒法的敏感度56.2%和特异度81.8%。结论实时荧光PCR熔解曲线法具有很好的敏感度和特异度,具有较好的临床适应性。

替加环素等常用抗生素对鲍曼不动杆菌体外药敏结果分析

目的分析鲍曼不动杆菌的耐药特性,评价替加环素等对鲍曼不动杆菌的抗菌活性,评价替加环素联合阿米卡星、美罗培南对鲍曼不动杆菌体外抗菌作用,为临床合理应用抗生素提供实验室依据。方法收集河北医科大学第三医院2013年581株鲍曼不动杆菌,采用K-B琼脂纸片扩散法测定鲍曼不动杆菌对替加环素等临床常用抗菌药物的敏感性;应用K-B琼脂纸片扩散法对替加环素不敏感的菌株,采用微量肉汤稀释法进行验证。应用棋盘微量肉汤稀释法检测替加环素联合阿米卡星、美罗培南对30株ICU病房分离多重耐药鲍曼不动杆菌的最低抑菌浓度,计算部分抑菌浓度指数。结果大多数常用抗生素的耐药率均达到90%左右,只有头孢哌酮/舒巴坦为17.6%,左氧氟沙星为74.8%,经过微量肉汤稀释法验证,替加环素的耐药率为28%。替加环素和阿米卡星、美罗培南均表现出一定的协同作用,协同率分别达到47%和20%,均没有发现拮抗现象。结论医院临床分离鲍曼不动杆菌对多种抗生素耐药严重,对替加环素、头孢哌酮/舒巴坦等耐药率较低。替加环素与阿米卡星、美罗培南联合应用协同率较高。

采用ERIC-PCR与PFGE分析鲍曼不动杆菌基因型和同源性并对比方法学差异

目的比较脉冲场凝胶电泳(pulsed field gel electrophoresis,PFGE)与肠杆菌科基因间重复序列聚合酶链式反应(enterobacterial repetitive intergenic consensus-polymerase chain reaction,ERICPCR)检测鲍曼不动杆菌同源性的结果差异。方法分别采用PFGE和ERIC-PCR对我院院内分离的43株鲍曼不动杆菌进行分型检测。结果 43株鲍曼不动杆菌通过PFGE分型得出:A型22株、B型10株、C型3株、D型4株、E型2株、F型1株、G型1株;通过ERIC-PCR得出7种型别:Ⅰ型22株、Ⅱ型10株、Ⅲ型3株、Ⅳ型2株、V型3株、Ⅵ型1株、Ⅶ型2株。2种方法结果相符率为76.8%。我院鲍曼不动杆菌存在克隆株传播。结论 ERIC-PCR操作简便、结果可靠,与PFGE结果一致性高,2种分型方法均适合作为医院进行病原菌流行病学调查的分型检测手段。

三磷酸腺苷结合盒转运蛋白G2基因单核苷酸多态性与痛风发病的相关性

尿酸代谢异常被看作是高尿酸血症和痛风的主要病因之一,尿酸盐转运蛋白的功能异常是导致尿酸代谢异常的最主要原因,其影响了肾脏对尿酸的重吸收和排泄功能。近年来三磷酸腺苷结合盒转运蛋白G2(ATP-binding cassette superfamily G member 2,ABCG2)作为最受关注的尿酸盐转运蛋白,得到国外国内学者的较多研究报道。ABCG2定位在细胞膜,表达在近曲小管上皮细胞刷状缘侧,可以转运尿酸。其功能性障碍阻碍了肾脏和肠道对尿酸的排泄,从而引起高尿酸血症并引发痛风。本文就ABCG2基因单核苷酸多态性与痛风发病相关性的研究进展作一综述。

应用肠杆菌科基因间重复序列聚合酶链反应对鲍曼不动杆菌进行同源性分析

目的了解临床不同来源的鲍曼不动杆菌是否存在同源性,判断其是否存在耐药菌株的克隆播散,追踪其在医院交叉感染的可能途径,以便有效防控鲍曼不动杆菌在医院中传播。方法收集2012年10月至2013年6月临床分离的73株多重耐药鲍曼不动杆菌,用肠杆菌科基因间重复序列-聚合酶链反应(enterobacterial repetitive intergenic consensus-polymerase chain reaction,ERIC-PCR)对菌株进行同源性分析。结果 73株多重耐药鲍曼不动杆菌经ERIC-PCR分型分为8个基因型,分别用A、B、C、D、E、F、G、H表示,其中A型31株,B型15株,C型12株,D型8株,E型3株,F型2株,G和H型各为1株。A型为主要的流行株,分布在多个不同的科室。重症监护室(intensive care unit,ICU)分离的菌株存在6个基因型;骨科系统病区存在4个基因型;急诊科有5个基因型;内科发现有6个基因型;外科发现3个基因型。ICU病房环境物体表面共分离出4株鲍曼不动杆菌,其中9号和10号菌株来自于不同患者的床旁,12号和13号来自于护理站电脑键盘。结论临床分离的多重耐药鲍曼不动杆菌存在多个基因型。多重耐药鲍曼不动杆菌存在时间和空间的聚集性。

医院环境中物体表面碳青霉烯耐药鲍曼不动杆菌污染及同源性分析

目的调查某院重点部门物体表面碳青霉烯耐药鲍曼不动杆菌污染情况及其同源性。方法对该院重症监护室(ICU)、急诊重症监护室(EICU)、血液透析室、手术室进行环境卫生学监测,采用肠杆菌科基因间重复序列聚合酶链反应(ERIC-PCR),对ICU、EICU环境中污染的条件致病菌鲍曼不动杆菌进行扩增分型。结果除EICU医务人员手卫生结果达标外,ICU及EICU各检测项目细菌计数均不达标;血液透析室及手术室采样标本均合格。ICU、EICU物体表面共采集标本53份,检出鲍曼不动杆菌7株,检出率为13.21%;此7株菌均为碳青霉烯耐药鲍曼不动杆菌,其中6株基因型相同,与患者痰中分离的鲍曼不动杆菌基因型相同。结论该院重点部门环境中物体表面分离的碳青霉烯耐药鲍曼不动杆菌具有同源性,应加强其环境物体表面清洁与消毒,降低医院感染的发生。

中国河北地区汉族健康人与RA患者padi4_94单核苷酸多态性的研究

目的研究中国河北地区汉族人群PADI4基因padi4_94位点多态性及其分布特征。方法选取河北地区汉族健康个体106例和类风湿关节炎(RA)患者115例,采用直接测序法对padi4_94位点单核苷酸多态性进行分析,探讨此位点SNP与抗CCP抗体产生的关系。结果本地区汉族人群padi4_94位点存在AA、AG和GG等3种基因型,健康组与RA组的基因频率及等位基因频率无明显区别,且这种SNP并不对RA患者抗CCP抗体的存在产生影响。结论中国河北地区汉族人群padi4_94位点存在多态性,但可能不影响RA的易感性以及抗CCP抗体的产生。

类风湿关节炎与巨噬细胞炎性蛋白-1α的相关性研究

目的探讨巨噬细胞炎性蛋白-1α(MIP-1α)在类风湿关节炎(RA)患者外周血、关节液的mRNA表达水平及其在RA发病机制中的作用。方法采用实时荧光定量PCR技术检测19例RA、6例骨关节炎患者的关节液和外周血单个核细胞(SFMC和PBMC)中MIP-1αmRNA表达水平。同时采用ELISA法测定MIP-1α的浓度。并与15例健康对照者比较。结果 MIP-1αmRNA在RA组外周血和关节液中均有表达,差异有统计学意义(P<0.01)。RA组MIP-1α的血清及关节液含量明显高于其他组;关节液中MIP-1α的浓度高于血清(P<0.01)。结论 MIP-1α介导的炎性反应是RA发病机制中重要因素。

临床分离鲍曼不动杆菌耐消毒剂基因携带情况分析及消毒对策

目的了解临床分离的鲍曼不动杆菌的耐药特性和耐消毒剂基因qacEΔ1-sul1的携带情况及其对含氯消毒剂的敏感性。方法采用K-B琼脂纸片扩散法检测抗菌药物的敏感性,采用聚合酶链反应(PCR)检测耐消毒剂基因qacEΔ1-sul1,用肉汤稀释法检测菌株的最低抑菌浓度(MIC)。结果 73株鲍曼不动杆菌中,37株(50.68%)qacEΔ1-sul1阳性,含氯消毒剂对鲍曼不动杆菌的平均MIC值为365.07 mg/L。结论临床分离的鲍曼不动杆菌为多重耐药菌,qacEΔ1-sul1基因携带率较高,但临床常用浓度的含氯消毒剂可将鲍曼不动杆菌杀灭。

类风湿性关节炎患者血浆和关节滑液中miR-16的表达

目的通过检测miR^(-1)6在类风湿关节炎(rheumatoid arthritis,RA)患者血浆和关节滑液中的表达,探讨其在RA鉴别诊断以及病情评估中的应用价值。方法应用茎环逆转录引物的SYBR GreenⅠ实时荧光定量PCR法检测RA患者血浆、关节滑液以及单核细胞(peripheral blood mononuclear cell,PBMC)中miR^(-1)6的表达水平,以U6snRNA为内参,另有10例骨关节炎(osteoarthritis,OA)作病例对照。结果目的基因miR^(-1)6和内参U6snRNA的扩增曲线及熔解曲线均良好,未出现非特异性产物及引物二聚体现象。miR^(-1)6在血浆中表达水平显著高于关节滑液和外周血PBMC(P<0.01);miR^(-1)6在RA患者PBMC中的表达水平显著高于正常对照组(P<0.01)。与OA患者相比,miR^(-1)6在RA患者关节滑液中的表达水平显著升高(P<0.01)。血浆中miR^(-1)6表达与疾病活动度量表(Disease Activity Score,DAS28)评分呈负相关(P<0.05),与红细胞沉降率(erythrocyte sedimentation rate,ESR)及C反应蛋白(C-reactive protein,CRP)均无相关性(P>0.05);PBMC中miR^(-1)6表达与DAS28评分、ESR及CRP均呈正相关(P<0.05);关节滑液中miR^(-1)6表达与DAS28评分、ESR及CRP均无相关性(P>0.05)。结论茎环逆转录引物的SYBR GreenⅠ实时荧光定量PCR法是灵敏而且特异的miRNA检测方法。血浆和关节滑液miR^(-1)6的来源并不相同,在血浆和关节滑液中可能存在不同的miRNA表达谱。miR^(-1)6的表达水平可望用于RA与OA的鉴别诊断以及作为RA病情活动度的有效评价指标。

中国河北地区汉族人群padi4-94单核苷酸多态性的研究

目的研究中国河北地区健康汉族人群PADI4基因padi4-94位点多态性及其分布特征,比较种族间的基因型及等位基因频率分布差异。方法随机选取106例河北地区汉族个体,对padi4-94位点PCR产物进行直接测序。结果中国汉族人群padi4-94位点存在三种基因型,AA、AG和GG,频率分别为22.6%、40.6%和39.8%,等位基因频率A为42.9%,G为57.1%。将日本、英国、西班牙、瑞士、北美等人群相关资料与本研究比较发现,此位点的基因型及等位基因频率差异均无统计学意义(P>0.05)。结论中国河北汉族人群padi4-94位点存在多态性,这种多态型在种族间可能不存在差异,这将为在汉族人群中研究padi4-94相关疾病提供可靠依据。

开放骨折清创术后患者住院费用的多元线性回归分析

目的对开放骨折清创术后患者住院费用及其影响因素进行分析,为开放骨折清创术后手术部位感染(surgical site infections,SSI)的预防及治疗提供依据。方法对2011至2013年住院患者电子病历数据库468例患者住院费用进行描述性统计,通过多元线性回归分析其影响因素。结果数据研究纳入468例患者,感染组244例,非感染组224例。西药费用、检查费用、护理费用、诊疗费用、手术费用、总费用的增加与SSI的发生有关(P <0. 01)。多元线性回归显示,首次清创时间、清创次数、手术次数、实际住院天数对开放骨折清创术后患者住院费用有显著性影响(P <0. 01)。结论开放骨折清创术后SSI患者住院总费用明显高于非感染患者,有效预防SSI的发生可能会节省医疗费用。

padi4-104单核苷酸多态性与河北省汉族人群类风湿关节炎的相关性研究

目的探讨中国河北汉族人群肽酰基精氨酸脱亚胺酶4-104(padi4-104)单核苷酸多态性(SNP)与RA易感性的关系。方法用PCR-DNA测序法对无血缘关系的115名RA患者和106名健康体检者的PADI4基因padi4-104位点的SNP进行检测分析。结果 padi4-104的基因型分布符合Hardy-Weinberg平衡(P>0.05),AA、AG、GG基因型和A、G等位基因分布在RA病例组与对照组间差异均无统计学意义(P值分别为0.368、0.245、0.252),比值比(OR)分别为0.709(95%可信区间:0.336～1.498)、0.636(95%可信区间:0.296～1.364)、0.800(95%可信区间:0.546～1.172)。结论河北汉族人群PADI4基因的padi4-104位点具有多态性,但此单核苷酸多态性与RA的易感性无相关性。

微小RNA与临床疾病

微小RNA(microRNA,miRNA)是一类广泛存在于真核生物体的内源性单链小分子RNA。作为天然存在的基因表达调控分子,miRNA及其靶位点的单核苷酸多态性(single nucleotide polymorphisms,SNPs)和人类疾病的发生有密切关系。特定miRNA表达谱可辅助临床对疾病进行诊断、分型及预后,将为生命科学以及临床医学等领域带来一场新的革命。

肽酰基精氨酸脱亚氨酶4与类风湿关节炎

肽酰基精氨酸脱亚氨酶（peptidylarginine deiminases，PADIs）是产生瓜氨酸蛋白酶的一个亚型，它能够催化蛋白质中精氨酸残基转化为瓜氨酸残基，形成瓜氨酸肽。类风湿关节炎（rheumatoid arthritis，RA）是一种病因尚未明了的自身免疫病，以慢性、多滑膜关节炎和关节外病变为主要临床表现，

痛风及高尿酸血症的研究进展

近年来,痛风和高尿酸血症的患病率越来越高,引起了人们的高度重视。目前痛风和高尿酸血症被认为是由血尿酸异常引起的全身性疾病,但是从高尿酸血症到痛风的整个进展过程还不明了,人们试图从基因突变上寻找痛风发生的原因。本文介绍了痛风和高尿酸血症的最近研究进展,并列举了几种可用于检测痛风突变基因的检测方法,对此做一阐述。

超声波裂解法在中心静脉导管尖端行细菌培养中的敏感性研究

目的观察超声波裂解法应用在中心静脉导管尖端培养的效果,探讨该方法在诊断导管相关性血流感染中的作用和价值。方法对122份中心静脉导管尖端标本进行细菌培养。所有标本均来自我院ICU病房住院并接受中心静脉导管留置术治疗的患者。所有标本均同时应用导管尖端滚动培养法和超声波裂解液血培养瓶增菌培养法进行细菌培养,并对两种培养方法的敏感性和培养效率进行对比分析。结果2种培养方法中超声波裂解液血培养瓶增菌培养法有35例导管尖端培养结果为阳性,得到37株病原菌。导管尖端滚动培养法敏感性较低,出现17例标本培养结果为阳性,只培养得到病原菌18株。2种培养方法的培养敏感性之间差异有统计学意义(P<0.05),超声波裂解培养法的敏感性明显好于导管尖端滚动培养方法(P<0.05)。超声波裂解液培养法的培养阳性生长时间明显缩短,导管尖端的细菌培养效率明显好于滚动接种培养法(P<0.05)。结论应用超声波裂解液培养法相比导管尖端滚动培养法表现出较好的敏感性,并且超声波裂解培养法表现出更好的培养效率。研究结果显示,当前中心静脉导管尖端培养可能存在一定的假阴性结果。我院导管相关性血流感染确诊率可能比实际情况偏低。

PFGE对医院分离鲍曼不动杆菌的同源性分析

目的:调查鲍曼不动杆菌的临床分布状况,分析医院内不同病房鲍曼不动杆菌是否存在同源性和医院交叉感染的可能途径,以便更好地控制鲍曼不动杆菌在医院中传播。方法:收集我院2012年2月至12月临床分离的55株鲍曼不动杆菌,采用脉冲场凝胶电泳(PFGE)方法对菌株进行同源性分析,采用KerbyBauer琼脂纸片扩散法测定鲍曼不动杆菌对临床常用抗菌药物的敏感性。结果:55株鲍曼不动杆菌经PFGE分型分为A、B、C、D 4个主要基因型,其中A型33株,B型14株,C型4株,D型4株,A型和B型为主要的流行株,分布在多个不同的科室。ICU病房分离的菌株以A型和B型为主,骨科系统病区以B型为主,呼吸科病区以A型和C型为主。结论:医院内鲍曼不动杆菌存在多个基因型,初步判断存在多重耐药鲍曼不动杆菌院内交叉感染。