靶向HER2的通用型CAR-T细胞来源的细胞外囊泡的制备及功能鉴定

目的 利用可持续传代的T淋巴细胞系,制备携带靶向人表皮生长因子受体2(HER2)蛋白的嵌合抗原受体(CAR)的细胞外囊泡(EV),并检测其对HER2^(+)肿瘤细胞的杀伤能力。方法 采用分子克隆技术构建重组慢病毒质粒。利用成簇的规律间隔的短回文重复序列(CRISPR)/CRISPR相关蛋白9(Cas9)技术和慢病毒感染的方法构建底盘Jurkat细胞。流式细胞术检测底盘Jurkat细胞、嵌合抗原受体T(CAR-T)细胞和CAR-Jurkat细胞的构建。通过聚乙二醇6000(PEG6000)浓缩方法和细胞挤压方法制备EV;微粒子追踪分析(NTA)和Western blot法鉴定EV。萤光素酶报告基因系统检测细胞和EV对肿瘤细胞的杀伤作用。荧光显微镜观察免疫细胞对EV的吞噬作用。结果 酶切鉴定和基因测序结果表明重组质粒构建成功。流式细胞术结果显示底盘Jurkat细胞、 CAR-T细胞和CAR-Jurkat细胞顺利制备。NTA结果显示制备的EV大小正确。萤光素酶报告基因系统证明CAR-T细胞、 CAR-Jurkat细胞、 CAR-T EV和CAR-Jurkat EV对HER2+肿瘤细胞均具有靶向杀伤能力。荧光显微镜观察表明,提高CD47分子的表达水平能够减弱免疫细胞对通用型CAR-Jurkat EV的吞噬作用。结论 通用型CAR-T细胞来源EV能够靶向杀伤HER2+肿瘤细胞。

靶向人表皮生长因子受体2嵌合抗原受体T(HER2-CAR-T)细胞毒性作用的体内外验证

目的 对靶向人表皮生长因子受体2嵌合抗原受体T(HER2-CAR-T)细胞进行毒理学评估,为其后期HER2-CAR-T细胞治疗的临床上评估提供安全性依据。方法 利用重组慢病毒载体制备HER2-CAR-T细胞,采用软琼脂集落形成实验,观察HER2-CAR-T细胞集落形成情况并对集落形成率进行统计分析;将HER2-CAR-T细胞悬液与兔红细胞悬液共孵,通过直接观察法以及酶标仪检测法评估红细胞溶解情况;对雄性新西兰兔耳缘静脉注射HER2-CAR-T细胞制剂,通过组织切片染色观察HER2-CAR-T细胞对动物血管的刺激作用;以pMD 2.G载体上的水泡性口炎病毒囊膜糖蛋白(VSV-G)基因为目标序列,利用荧光定量PCR进行慢病毒载体安全性的验证;取接受HER2-CAR-T细胞输注的小鼠心、肝、肺、肾,HE染色观察其病变情况。结果 成功制备了HER2-CAR-T细胞,这些细胞在体外不具备软琼脂集落形成能力,HER2-CAR-T细胞制剂对新西兰兔红细胞不产生溶血现象。新西兰兔耳缘静脉输注HER2-CAR-T细胞后未发现明显血管刺激反应,也未检测到VSV-G的特异性扩增,治疗组小鼠心、肝、肺、肾组织未见明显病变。结论 所制备的HER2-CAR-T细胞具有可靠安全性。

具有短路限流功能的统一潮流控制器设计

统一潮流控制器(UPFC)在电力系统发生短路故障时,其串联变换器极有可能因承受系统高电压和大电流的冲击而损毁。针对该问题,提出了一种新型柔性交流输电系统装置——具有短路限流功能的统一潮流控制器(简称限流式UPFC),给出了其主电路拓扑结构、工作原理和控制策略。PSCAD/EMTDC软件的建模和仿真结果表明,在电网正常运行状态下,该装置特性等效为常规UPFC;当电网在装置安装点附近发生短路故障时,装置中的限流器模块能立即自动从零阻抗转变为高阻抗,将系统及流经UPFC的短路电流限制到较低数值,保护了UPFC免受系统高电压和大短路电流的冲击,同时也降低了系统的短路电流水平,增加了系统的可靠性和经济性。

限流式统一潮流控制器的动态分析与实验

限流式统一潮流控制器(UPFC)是一种可以有效应对系统短路电流冲击的新型柔性交流输电系统(FACTS)装置。文中分析了系统短路时限流式UPFC的详细动态过程和限流工作原理,建立了故障下的数学模型。以系统限流指标、直流电容电压限值和绝缘栅双极型晶体管(IGBT)电流限值3个条件为依据,给出了直流限流电感的计算方法和选取原则。100V/3kVA限流式UPFC实验装置平台的实验结果证实了限流动态过程分析的合理性和限流式UPFC的有效性。

UPFC状态反馈精确线性化潮流控制策略

统一潮流控制器(unified power flow controller,UPFC)传统线性控制器的性能可能因运行点的大范围变化而恶化,针对该问题提出了一种基于微分几何状态反馈精确线性化理论的UPFC非线性潮流控制策略。通过选择李雅普诺夫型输出函数、适当的非线性坐标变换和状态反馈将UPFC的5阶非线性系统完全转化为一个线性系统,然后采用线性极点配置方法设计了UPFC内部潮流控制器。IEEE 118节点系统的仿真对比结果表明,所提UPFC潮流控制策略改进了传统PI控制近似线性化的缺陷,有效适应了UPFC控制范围的大幅度变化,在提高电力系统暂态稳定性方面的效果明显优于传统PI控制。此外,该控制策略设计过程可以应用于所有基于电压源型换流器(voltage source converter,VSC)的柔性交流输电系统(flexibleAC transmission system,FACTS)装置。

基于反馈线性化H_∞方法的UPFC非线性鲁棒控制器

针对一类基于电压源换流器(VSC)的FACTS装置在电力系统中面临的不确定性和干扰问题,以统一潮流控制器(UPFC)为例,基于反馈线性化H∞理论设计非线性鲁棒内部控制器.采用状态反馈精确线性化方法将考虑外干扰的UPFC五阶仿射非线性系统转化为一个线性系统,根据线性H∞理论设计线性鲁棒控制律,并通过预反馈映射得出原UPFC系统的非线性鲁棒控制律.在4机12节点电力系统中将所提控制器与传统PI控制器进行仿真对比,结果表明所提控制器在多种外部干扰下都具有良好的鲁棒性,可以更好地提高UPFC安装点附近电网的暂态稳定性和功率振荡抑制能力.

任务型教学模式在大学英语教学中的应用研究

任务型教学模式就是让学生在教师的指导下,通过感知、体验、实践参与和合作等形式,逐步达到教学目标规定的要求。大学英语教学要在任务型教学理念的指导下,通过前期任务阶段、任务循环阶段和语言聚焦阶段组织实施教学,提高学生英语综合能力,实现高等院校大学英语的教学任务。

浊度法快速测定培养液中的生物量

浊度法是一种常用的测定浓度的方法 ,本文通过实验介绍一种应用浊度法测定培养液中细胞的生物量的方法 ,该方法采用分光光度计测定培养液在某个波长下的吸光度 。

HPLC-ELSD法测定葛兰心宁软胶囊中绞股蓝皂苷XL IL的含量

目的：建立以HPLC-ELSD法测定葛兰心宁软胶囊中绞股蓝皂苷XL IX含量的方法。方法色谱柱为Kromasil C18（250 mm ×4．6 mm，5μm），流动相为乙腈—水（35∶65），检测器为蒸发光散射检测器，流速2．8 L· min-1，漂移管温度105℃。结果绞股蓝皂苷XL IL的线性良好，Y（峰面积）＝1．56X＋5．25，r＝0．999，平均回收率（ n＝6）为101．56％，绞股蓝皂苷XL IX在0．513～10．254μg范围内线性关系良好。。结论该方法专属性强、重复性良好，可用于葛兰心宁软胶囊的质量控制。

陕西野生薄荷挥发油化学成分的气相色谱-质谱分析

目的利用气相色谱-质谱(GC-MS)法对采自陕西省的野生薄荷挥发油化学成分进行分析。方法采用水蒸气蒸馏法提取挥发油,取适量配制成溶液,用GC-MS进行分析。色谱柱为HP-FFAP石英毛细管柱(30 m×0.32 mm,0.25μm),进样口温度为220℃,柱温为程序升温,初始温度为65℃,保持3 min,以5℃/min的速率升温至230℃,保持5 min,载气为N2,流速为1.5 mL/min,分流比为10∶1。质谱条件,接口温度为230℃,离子源温度为220℃。结果共鉴定了5批野生薄荷挥发油中的67个化学成分,主要成分有薄荷醇、左旋香芹酮和乙酸松油酯。结论生长环境、居群和采收时间不同,陕西野生薄荷挥发油化学成分的种类和相对含量差异很大。

生物化学教学中的想象力

目的探讨发挥想象力调动形象思维在生物化学教学中的应用。方法尝试将丰富的想象力运用于课堂教学,以物质代谢章节教学为例,从三个层次改善教学效果。结果想象力的发挥调动了形象思维,既能够使生化概念的理解更为生动形象,也可以使复杂的代谢过程归纳起来更为简便直观,还可以加深对整个物质代谢网络内在规律的逻辑整合。结论充分发挥想象力可以使生化知识变得生动有趣,大大激发了学生的学习兴趣,提高了教学质量。

医学生物化学与分子生物学实验教学方式的改进

医学生物化学与分子生物学实验课是衔接理论知识与实际临床应用、科学研究的纽带。传统灌输式的实验课教学形式导致学生吃现成饭、不动脑筋。针对这一弊端,摸索改进了一套新教学方法,通过引导学生自主设计实验方案,允许学生犯错误、找错误、改错误,大大激发了学生的学习兴趣,明显改善了实验课教学效果。

基于建构主义六要素的英语阅读教学模式探究

阅读教学是大学英语教学的核心,其目的是传授语言知识,培养学生阅读能力,激发语言学习兴趣和开发非智力因素。鉴于传统阅读教学存在的诸多弊端,文章结合建构主义基本要素,构建阅读教学新模式,即创建情境、提出问题;组织协作、展示成果;效果评价,课后反思。建构主义指导下的阅读教学,以学生为中心,注重学生自主能力的培养,提高阅读教学效果。

利用幼穗愈伤组织筛选小麦抗赤霉病菌毒素体细胞突变体的研究

以不同小麦品种（系）幼穗诱导的愈伤组织进行小麦抗赤霉病体细胞突变体筛选。结果表明，不同赤霉病抗性的品种（系）对赤霉菌毒素表现不同的反应，抗性品种愈伤组织生长受毒素抑制小，感病品种愈伤组织受毒素抑制强烈；筛选出了赤霉病菌毒素加入的最适浓度为２％（Ｖ／Ｖ），在该浓度下可筛选出抗性突变体；获得了咸农１５１、陕１６７、陕２２９等品种（系）的赤霉病菌毒素抗性体细胞无性系再生植株，再生植株田间人工接种鉴定表现出中或高抗赤霉病。

斑点叉尾鮰和杂交鲟幼鱼昼夜摄食节律和胃肠排空时间的研究

采用一次饱食投喂(将一昼夜分为8个时间段,每个时间段作为一个处理组,每天每个处理组饱食投喂一次)和分段式连续投喂(将一昼夜分为8个时间段,每天每个实验缸连续投喂8次)两种方法研究斑点叉尾和杂交鲟幼鱼的昼夜摄食节律,同时研究它们在摄食后24h内胃和全肠的排空时间。结果显示,在两种投喂方式下,斑点叉尾均表现出24h一周期的摄食节律,两个日摄食率高峰值均出现在06:00和18:00(P<0.05)。杂交鲟在一次饱食投喂下表现出24h一周期的摄食节律,高峰值分别出现在11:00、17:00和05:00,在分段式连续投喂时表现出48h一周期的摄食节律,高峰值分别出现在11:00、17:00和36:00。在摄食后1—9h内,斑点叉尾的胃内含物比率急剧降低(P<0.05),并在24h时出现极低值(P<0.05),而1—9h内全肠内含物比率迅速升高(P<0.05),在9h时达到最大(P<0.05),在24h出现极低值(P<0.05)。在摄食后1—7h内,杂交鲟的胃内含物比率迅速下降(P<0.05),在24h时出现极低值(P<0.05),1—7h内肠内含物比率迅速升高(P<0.05),24h时呈现极低值(P<0.05)。结果表明,两种实验鱼表现出不同的昼夜摄食节律,该节律受各自胃肠排空时间的影响,也受投喂时间的影响。研究建议,在斑点叉尾和杂交鲟幼鱼的养殖中宜在光线较弱的清晨(05:00-06:00)和黄昏(17:00-18:00)进行投喂。

水分子簇结构改变的分子动力学

为揭示水分子团簇形成的理论,在制备具有生物功能的六环结构水的工作基础上,应用量子力学的理论方法,对单个水分子转动惯量进行模拟计算.结果表明,当水分子的键长、键角和偶极矩发生变化时,其转动能谱也随之变化.用分子动力学方法分析了水分子簇微观结构改变后的六环水中原子运动方式,从理论上证明了六环结构水具有稳定存在的动力学特征.

知识产权文化内涵——以财产权劳动理论为视角

国内学者关于知识产权文化的概念可以归纳为广义、中义、狭义三种,经过比较分析,本文选取知识产权狭义文化观,从意识观念层面探讨文化对知识产权制度的反作用。对财产权劳动理论进行评述,并以该理论为视角对知识产权文化的内涵进行总结,并梳理出西方知识产权文化中所蕴含的人权和所有权观念、重视创造、权利本位等文化因素。在此基础上,提出构建知识产权权利观念、创新观念、秩序观念的文化观。

综合方法治疗复杂性区域疼痛综合征23例临床分析

目的探讨复杂性区域疼痛综合征(CRPS)的临床治疗方法。方法对本院23例CRPS患者采用物理治疗、药物治疗、交感神经阻滞和针灸治疗等综合方法治疗,观察治疗效果。结果本组患者显效9例,有效11例,无效3例,总有效率87%。结论采用综合方法治疗CRPS临床效果满意。

从《逃离德黑兰》获奖看美国的文化霸权

《逃离德黑兰》获得金球奖最有分量的两项大奖,在奥斯卡颁奖典礼上又获得最佳影片奖,而且有美国第一夫人视频连线颁奖,折射出奥斯卡奖的政治色彩。由于有雄厚的经济基础作支撑,美国的文化霸权迷梦在全球扩散。本文从分析《逃离德黑兰》获奖遭到伊朗媒体和舆论的多方指责着手,对美国的文化霸权进行深层次的剖析,以期提醒那些沉溺于看美国大片的青少年,不要被这层迷雾所笼罩。