抗ENA单克隆抗体的研制

目的：制备与分析抗可提取性核抗原（ＥＮＡ）单克隆抗体；方法：以ＥＮＡ为抗原，免疫ＢＡＬＢ／ｃ小鼠，取其脾细胞与小鼠Ｓｐ２／０骨髓瘤细胞融合，经反复筛选和再克隆化，建立能稳定分泌抗ＥＮＡ单克隆抗体（ＭｃＡｂｓ）的杂交瘤细胞株；结果：共获得１１株能稳定分泌抗ＥＮＡ的杂交瘤细胞株。对其中的５种单克隆抗体（ＩＧ５，２Ｅ５，２Ｃ６，４Ｃ１０和４Ｅ６）进行了初步分析，结果如下：小鼠腹水抗体效价范围２×１０－５～３×１０－６；免疫球蛋白亚类鉴定，１株为ＩｇＧ２ａ，１株为ＩｇＧ２ｂ，其余３株均为ＩｇＧ１；

抗人绒毛膜促性腺激素(HCG)单克隆抗体的研制和特性分析

以HCG为抗原,免疫BALB/c小鼠,取其脾细胞与小鼠Sp2/0—Ag14骨髓瘤细胞融合,经反复筛选和再克隆化,获得8株能稳定分泌抗HCG特异单克隆抗体的杂交瘤细胞株。对其中6个高效价单抗进行了特异性和抗原决定簇检测,选出两个抗相距较远不同决定簇的单抗(2D_4,4F_4)作进一步特性分析。结果显示:免疫球蛋白亚类鉴定,2D_4为IgGl亚类,4F_4为IgG2a亚类;亲和力常数(K_(affi)),2D_4为5.41±0.94×10^(-10)mol/L,4F_4为1.37±0.33×10^(-9)mol/L。证实该两种单克隆抗体可用于研制有关临床诊断试剂盒。

单抗亲和纯促卵泡激素(FSH)的制备及其特性研究

采用细胞杂交技术生产出抗猪促卵泡激素(pFSH)的单克隆抗体,以其中的AF05单克隆抗体(亲和力常数K=(1.14±0.28)×10^(-9)M)制作成单抗免疫亲和层析柱。以简便快速的一步纯化法从猪垂体浸出液中提取出高纯度pFSH。经小鼠卵巢增重法测定,该pFSH的生物学活性在30Armour单位/mg蛋白以上;聚丙烯酰胺凝胶电泳(pAGE)结果显示,该pF-SH的纯度超过美国Schering公司的pFSH产品。