神经酰胺诱导肝癌细胞凋亡

目的 :观察 C2 -神经酰胺诱导肝癌细胞凋亡 ,为进一步研究肝癌细胞凋亡信号的传导提供实验依据。 方法 :将 C2 -神经酰胺作用于肝癌细胞 SMMC- 772 1及 BEL- 740 2后 ,分别行 H- E染色、荧光染色、TU NEL 方法检测及流式细胞仪 Sub- G1法 ,检查细胞的凋亡。结果 :10 μm ol/ L C2 -神经酰胺作用肝癌 SMMC- 772 1细胞 ,48h后发生凋亡 ,H- E染色及荧光染色检测可见典型的细胞凋亡表现 ,细胞核固缩、碎裂 ,以及碎裂的细胞核浓染成为凋亡小体。经流式细胞仪检测可见典型的 Sub- G1凋亡峰 ,凋亡细胞占细胞总数 (9.2 0± 0 .73) %。在 BEL- 740 2细胞也观察到相似的结果。 结论 :C2 -神经酰胺可诱导肝癌SMMC- 772 1及 BEL- 740 2细胞的凋亡。

粉防已碱对大鼠血压、血浆肾素活性和心室乳头肌及门静脉收缩的影响

在麻醉的SD雄性大鼠上,观察到粉防己碱(Tetrandrine,Tet)30mg/kg 2/d,ig连续4d能显著地降低血压,而对心率和血浆肾素活性(PRA)无明显影响。一次静注Tet 15 mg/kg,血压降低的同时伴有心率减慢,也不影响PRA。先用Tet连续灌胃4d后的动物,一次静注Tet引起同等程度的降压效应,说明Tet的降压作用无耐受现象。在离体实验中发现,Tet抑制电刺激引起的心室乳头肌收缩及门静脉纵条的自主收缩,EC_(50)分别为5.33×10^(-6)mol/L和4.25×10^(-5)mol/L,Tet的血管选择性为0.12。

原发性肝癌切除术后的抗复发治疗

原发性肝癌（简称肝癌）主要指肝细胞癌（hepa-tocellular carcinoma,HCC）,是居我国第二位的肿瘤死亡原因。目前肝切除术及肝移植术仍是可治愈肝癌的唯一手段。但是,限于供体来源及经济条件,肝移植的应用范围小，肝切除术仍是目前肝癌治疗中最实用、最有效的方法。然而肝癌切除术后的疗效仍不令人满意，术后高复发及转移率是主要影响因素。

原发性肝内胆管癌的诊治现状和展望

原发性肝内胆管癌（primary intrahepatic cholangiocarcinoma,ICC）指起源于二级及以上肝内胆管上皮细胞的恶性肿瘤,占肝脏原发恶性肿瘤的5%-20%^[1]。由于ICC位于肝内,临床某些方面类似原发性肝细胞癌（hepatocellular carcinoma,HCC）,国内曾将其放在原发性肝癌名下一起叙述，易引起混淆。事实上ICC无论在病因、发病机制、临床表现和治疗上均与肝细胞癌不同。另一方面由于来自于胆管细胞，ICC在浸润方式和肉眼形态上与肝外胆管细胞癌相近，但在临床特点、影像学表现及治疗上又明显不同于肝门部胆管癌及胆总管中下段癌。

酶联免疫吸附试验检测人血清抗双链DNA抗体在系统性红斑狼疮诊断中的性能评估

目的对人血清抗双链DNA(dsDNA)抗体的酶联免疫吸附检测试剂盒Anti-dsDNA-NcX ELISA行实验室检测性能评估及在系统性红斑狼疮(SLE)诊断中的应用评价。方法对Anti-dsDNA-NcX ELISA试剂盒进行实验性能评价;并用间接免疫荧光法(IIF)和酶联免疫吸附法(ELISA)两种方法共三种试剂盒,同时检测健康体检正常者30例、非系统性红斑狼疮自身免疫病患者27例及SLE患者92例血清抗dsDNA抗体。以SLE的临床诊断为金标准,评价Anti-dsDNA-NcX ELISA试剂盒用于SLE的诊断性能。结果 Anti-dsDNA-NcX ELISA试剂盒达到了各项实验室检测性能指标,试剂盒的最低检测限为2.7 U/m l,线性相关系数为0.998,批内精密度变异系数(CV)<6%,批间精密度CV<10%,溶血、脂血、黄疸对检测结果没有干扰,与类风湿性关节炎、干燥综合征等非SLE自身免疫病患者血清间不存在交叉反应。健康体检正常者血清抗dsDNA抗体水平P97.5为67.0 U/m。l92例狼疮性肾炎患者,两种ELISA试剂的阳性率(60.9%)均高于IIF(20.6%),差异有统计学意义(P<0.05),其中Anti-dsDNA-NcXELISA试剂盒诊断狼疮性肾炎的正确率要高于AESKULISA dsDNA-Check ELISA试剂盒(曲线下面积分别为0.90和0.68),差异有统计学意义(P<0.001)。当抗dsDNA抗体取108 U/m l为诊断界值时,Anti-dsDNA-NcX ELISA试剂盒诊断狼疮性肾炎的特异性为98.2%,阳性预测值为96.6%。结论 Anti-dsDNA-NcX ELISA试剂盒各项检测性能良好,诊断狼疮性肾炎在不降低敏感性的基础上提高了特异性和阳性预测值,是目前IIF的有益补充,其试剂可以用于SLE的临床诊断。

应用端粒重复序列扩增法检测原发性肝癌组织端粒酶活性的研究

目的:检测原发性肝癌及癌旁组织端粒酶活性并探讨端粒酶活性在原发性肝癌中的临床意义。方法:应用端粒重复序列扩增法(TRAP)检测36例原发性肝癌及癌旁组织和3例正常肝组织端粒酶活性。结果:36例原发性肝癌组织有29例(80.6%)阳性。而36例癌旁组织只有4例(11.1%)阳性。3例正常肝组织均阴性。4例癌旁组织端粒酶阳性的患者均于术后半年内复发。结论:原发性肝癌癌旁组织端粒酶活性可望成为预测原发性肝癌术后复发的重要指标,对患者术后治疗方案的选择以及术后随访观察具有一定的指导意义。

化学发光微粒子免疫分析在梅毒螺旋体抗体筛查中的应用探讨

目的 评价化学发光微粒子免疫分析法（CMIA）用于梅毒螺旋体抗体（TP-Ab）筛查的价值,并制定合理的TP-Ab血清学筛查方案.方法 收集在我院进行TP-Ab筛查的患者标本,共计30,100例,对于CMIA为阴性者直接报告结果,CMIA阳性者采用梅毒螺旋体明胶凝集试验（TPPA）确认,并同时进行快速血浆反应素环状卡片试验（RPR）,分析结果的一致性.结果 在30100例筛查标本中,CMIA阳性者402例（1.3％）,样本吸光度与临界质控吸光度比值（S/CO）在1.05～40.56之间.CMIA结果＞10 S/CO的标本共178例,TPPA阳性比例为100％,RPR阳性63例;在6-10 S/CO之间的标本共计50例,RPR阳性8例,TPPA阳性比例92％;在3～6 S/CO之间的标本59例,RPR阳性者5例,TPPA阳性的比例66.1％;在1～3 S/CO之间的标本115例,RPR均为阴性,TPPA阳性的比例仅为20％.结论 CMIA筛查TP-Ab具有较高的灵敏度,但特异性相对较低,采用CMIA进行TP-Ab筛查,并根据其S/CO值确定是否需要进一步采用另外一种高特异性梅毒螺旋体抗体检测试验进行确认,是TP-Ab筛查理想的方案,确认方法可以选择TPPA等试验.确认阳性者,应报告RPR结果,辅助临床区分既往感染和现症感染.

肝癌患者术前的抑郁情绪与术后复发相关性的临床研究

目的前瞻性地探讨肝细胞癌(Hepatocellular Carcinoma,HCC)患者外科手术前的抑郁状态与治疗后复发的关系。方法纳入2009年1月至2010年1月接受手术的124例HCC患者,术前行近3～5天的抑郁状态进行测定,并采用抑郁自评量表进行评分。以评分数的中位数为界值,分为高抑郁评分组及低抑郁评分组。随访截止至2012年3月。应用Kaplan-Meier生存分析判别术前肝癌患者的抑郁状态与术后复发的关系,并以COX比例风险模型分析肝癌术后复发的独立危险因素。结果肝癌病人术前的抑郁评分(SDS评分)高于国内常模(P=0.007)。高抑郁评分组和低抑郁评分组的术后1、2年复发率分别为:9.5%、11.4%vs 19.1%、37.2%(P=0.036)。进一步行COX比例风险模型多因素分析得出与预后有关因素为:SDS评分高、微血管癌栓侵犯、肿瘤最大径大于5 cm、肿瘤个数多发(P<0.05)。结论肝癌患者术前的抑郁情绪与术后复发密切相关,预防与治疗肝癌患者的抑郁状态是降低肝癌术后复发率的重要途径之一。

B细胞融合人肝癌细胞疫苗^(60)Co照射后生长及表型的观察

目的：探讨Ｂ细胞与人肝癌细胞的融合细胞经６０Ｃｏ照射后的生长和免疫原性相关表型的变化。方法：体外照射后观察融合细胞生长曲线和软琼脂集落形成；体内采用裸鼠成瘤试验，观察体外生长和动物体内成瘤性，应用流式细胞仪检测照射后融合细胞ＭＨＣ－Ⅰ，ＭＨＣ－Ⅱ，Ｂ７及肝癌抗原（ＧＰ７５）表达，观察其免疫原性相关表型变化。结果：经６０Ｃｏ照射的融合细胞失去增殖能力，４ｄ后可见部分细胞死亡，７ｄ后几乎全部死亡。６０Ｃｏ照射后３ｄ内ＭＨＣ－Ⅰ，ＭＨＣ－Ⅱ，Ｂ７及ＧＰ７５表达无明显变化。结论：经６０Ｃｏ照射后融合细胞失去增殖能力。

结直肠癌同时肝转移的手术疗效分析

目的分析结直肠癌同时肝转移的手术疗效。方法回顾性分析自1996年1月至2004年4月东方肝胆外科医院手术治疗的74例结直肠癌同时肝转移患者,其中同时手术组47例,异时手术组27例。结果无手术后1月内死亡病例,总的术后1、3、5年累积生存率分别为81.1%、41.2%和14.8%;同时手术组术后1、3、5年累积生存率分别为82.9%、40.5%和11.8%;异时手术组术后1、3、5年累积生存率分别为77.8%、42.2%和19.7%,两组比较差异无统计学意义(log-rank,P>0.05)。两组手术并发症发生率同时组为19.1%,而异时组为11.1%(χ2,P>0.05)。原发肿瘤位于直肠共21例,12例行同时手术,9例行异时手术,两组术后生存率比较无明显差异(log-rank,P>0.05)。结论结直肠癌同时肝转移患者同时手术和异时手术疗效相似,手术并发症无明显增加,同时手术是安全可行的;原发肿瘤位于直肠不能作为选择同时手术的禁忌症。

非那西丁在二乙基亚硝胺诱发肝癌大鼠的代谢

目的 ①研究非那西丁在二乙基亚硝胺 (DEN)诱发肝癌大鼠中的代谢 ,以及其它评估肝脏功能指标的改变 ;②血浆结合型代谢产物含量改变对非那西丁试验的影响。方法 饮用DEN诱发大鼠肝癌 ,观察血液非那西丁及利多卡因代谢产物 ,白蛋白和胆红素含量 ,凝血酶原时间的改变 ;采用HPLC法测定血浆中非那西丁结合型和游离型代谢产物含量。结果 与正常对照组相比 ,DEN组大鼠肝脏出现多发性癌结节 ,肝 /体重比增加 3 3倍 ,血浆谷丙转氨酶、γ 谷氨酰转肽酶和碱性磷酸酶含量明显升高 ,但凝血酶原时间、血浆白蛋白、非那西丁和利多卡因代谢产物含量无明显改变。DEN组大鼠血浆非那西丁游离型代谢产物含量高于正常对照组 43 9% (P <0 0 1) ,但结合型 +游离型代谢产物总量无明显差别。结论 在DEN诱发肝癌大鼠 ,肝细胞严重受损 ,肝脏体积增大 ,非那西丁代谢等肝功能试验无明显改变。同时测定游离型及结合型代谢产物含量 ,才能正确反映肝脏的生物转化功能。

对临床医学研究生科研能力培养的体会

临床医学研究生的科研能力是其必须具备的能力之一,也是高等医学教育的目的之一。围绕这一课题,我们从端正学生科研的态度和认识、增强其创新能力这两个方面进行了探索和实践,努力促进临床医学研究生科研能力的培养。

术前糖类抗原19-9水平评估不同甲胎蛋白水平肝细胞癌肝切除术后患者的预后

目的探讨术前糖类抗原19-9(CA19-9)水平对不同甲胎蛋白(AFP)水平肝细胞癌患者术后预后的影响。方法前瞻性收集2008年1月4日至2010年12月31日在我院因肝细胞癌首次接受肝切除术治疗的3 791例患者的临床及随访资料。以400 ng/m L为术前AFP水平的截断值,32 U/m L为术前CA19-9水平的截断值,将患者分为双阳性组(DP组)、CA19-9单阳性组[SP(CA19-9)组]、AFP单阳性组[SP(AFP)组]和双阴性组(DN组),比较各组患者的肿瘤学特征。采用Kaplan-Meier法和log-rank检验分析各组患者的总生存(OS)和无瘤生存(DFS)情况。采用Cox回归模型进行单因素和多因素分析,筛选影响肝细胞癌患者预后的危险因素。结果 4组患者有不同的肿瘤学特征。与DN组相比,SP(AFP)组、DP组患者的肿瘤最大径更大、病理EdmondsonSteiner分级为Ⅲ~Ⅳ级的比例和微血管侵犯(MVI)发生率更高(P<0.01),且DP组患者的多发肿瘤比例更高(P<0.05);而SP(CA19-9)组患者的肿瘤最大径更小(P<0.05),多发肿瘤的比例更高(P<0.01)。按DN组、SP(CA19-9)组、SP(AFP)组与DP组的顺序,患者的1年、3年和5年OS率均依次降低(P均<0.01);DN组患者的1年、3年和5年DFS率最高(P<0.01),DP组最低(P<0.01),SP(CA19-9)组与SP(AFP)组差异无统计学意义。术前AFP水平分层分析结果表明,CA19-9<32 U/m L组患者的1年、3年和5年OS率及DFS率均高于CA19-9≥32 U/m L组患者(P<0.05)。多因素分析结果显示,AFP≥400 ng/m L、CA19-9≥32 U/m L、术中出血≥600 m L、肿瘤最大径≥5 cm、肿瘤多发、肿瘤包膜缺如、MVI、Edmondson-Steiner分级为Ⅲ~Ⅳ级是影响患者OS的独立危险因素(P<0.05);乙型肝炎病毒表面抗原(+)、AFP≥400 ng/m L、CA19-9≥32 U/m L、肿瘤最大径≥5 cm、肿瘤多发、肿瘤包膜缺如、MVI是影响患者DFS的独立危险因素(P<0.05)。结论术前血清AFP≥400 ng/m L和CA19-9≥32 U/m L均是影响肝细胞癌患者OS和DFS的独立危险因素。对于不同术前AFP水平的肝细胞癌患者,术前CA19-9水平是进一步评估预后的重要指标。

年轻人与中年人肝癌肝切除的预后比较:倾向评分匹配分析

目的比较年轻人（18—40岁）和中年人（41～65岁）肝细胞癌（HCC）的临床特点和预后。方法回顾性分析东方肝胆外科医院2008年1月至2010年12月初诊为的HCC患者临床资料，纳入18～65岁行根治性肝切除术的患者，其中年轻组466例、中年组2918例。采用倾向评分匹配法（Propensity Score Matching，PSM）平衡两组间基本资料不均衡的变量并获得匹配患者，采用Log—rank检验Kaplan．Meier法进行生存分析，Cox比例风险模型预测独立危险因素。结果PSM前，年轻组和中年组1、3、5年累计生存率分别为96．1％、73．0％、42．5％和1、3、5年累计生存率分别为96．5％、76．8％、45．2％，两组间无统计学差异（P=0．139）；按1：1PSM后分别获得452例患者，1、3、5年累计生存率分别为96．2％、72．3％、41．4％和97．5％、80．6％、48．5％，两组间统计学差异（P=0．004）。亚组分析显示，肿瘤最大径大于3cm的年轻人肝癌预后较差（P=0．001），而小于3cm和中年人无差异（P〈0．05）。多因素分析得出年龄≤40岁、肿瘤最大径〉3cm、多发肿瘤、微血管侵犯等4个因素为18～65岁肝癌患者术后死亡的独立危险因素。结论年轻人较中年人肝癌切除术后预后差，且肿瘤最大径〉3cm的年轻肝癌患者预后更差。

尼群地平单用及其与美多洛尔合用对大鼠血压和胸主动脉环收缩的影响

近年来,在高血压病的治疗中,钙拮抗剂(如硝苯啶)与β受体阻断剂(如醋丁洛尔)的合用已引起关注.尼群地平(nitrendIpine,Nit)是一种较新的二氢吡啶类钙通道阻滞剂,美多洛尔(metoprolol,Met)是一种选择性β_1受体阻断剂.该二药的合用尚未见研究报道.

肝细胞癌个体化治疗的临床预测模型

肝细胞癌(HCC)往往伴有肝炎和肝硬化,根据其疾病分期、肿瘤部位及肝功能等情况进行精准治疗的要求很高。临床上多种诊疗方法均对HCC具有一定的疗效,故如何有效地对患者进行预后分析,从而选择合适的个体化治疗方案,成为亟需解决的问题。针对HCC的预后,有多种预测系统,其中列线图因能够较好地针对HCC患者进行个体化分析而备受关注。目前,根据不同类型的HCC已建立了多种列线图预测模型,这些模型纳入了一些临床和病理指标,如肿瘤标志物、肝功能、HBV指标、微血管癌栓等,其对不同患者计算出不同的风险评分,能够较好地预测预后。同时,可以根据不同的风险等级指导患者选择合适的治疗方式和术后抗复发治疗,从而达到个体化治疗的目的。

试论孙中山关于中国国民经济近代化的思想

伟大的民主革命先行者孙中山,为了把一个贫穷落后的半殖民地半封建的中国,改造为一个独立富强的近代化强国,写出了一部具有鲜明时代特点的建国方略,制定了一幅宏大的《实业计划》的蓝图,并为此而花费了毕生精力,进行了坚持不懈的努力奋斗。尽管这一伟大的理想、宏大的计划没有得以实现。

肝内胆管癌的外科综合治疗

肝内胆管癌(intrahepatic cholangiocarcinoma,ICC)约占原发性肝癌的10%~15%,近年来其发病率在全球范围内呈上升趋势[1]。ICC的发病诱因及病因复杂,目前已确定的危险因素有年龄、肝内胆管结石、肝血吸虫病、胆管腺瘤、胆管乳头状瘤病、胆管囊肿和Caroli病[2]。近年来,全基因组测序技术发展和ICC基因表达谱的深入研究为ICC的分子靶向治疗提供了新的线索,将有望成为ICC的突破性治疗方法。ICC恶性程度高,发病隐匿,许多病人就诊时已经达到疾病的中晚期,失去根治性手术治疗的机会,加之临床上缺乏有效的肿瘤筛查及诊断标志物,故导致ICC病人诊疗困难,预后极差。根治性手术切除是目前唯一有效的治疗方法,但因术后高复发率导致ICC病人术后5年的生存率在20%~40%[1]。因此,如何有效地综合治疗ICC成为摆在临床医生面前的一个难题。

新型冠状病毒肺炎疫情下肝癌的诊断与治疗策略

目的2019年12月以来,新型冠状病毒肺炎在武汉爆发,并迅速向全国蔓延。新型冠状病毒传染性强,人群普遍易感。如何在做好疫情防控的同时,又能确保肝癌患者得到有效的诊疗,是当前亟待解决的临床问题。笔者依据原发性肝癌诊疗规范,结合自身经验,概述了疫情当下的肝癌诊疗策略。包括门诊患者的严格筛查与诊断,肝癌患者不同分期的针对性临床实践方法,需紧急处理的情况如破裂出血和梗阻性黄疸等。有助于肝脏肿瘤专科医师在新型冠状病毒肺炎疫情下合理有效地开展肝癌的诊断与治疗工作。

DETECTION OF HUMAN TELOMERASE ACTIVITY BY TELOMERASE TRAP-ELISA ASSAY

Objective : Telomeric repeat amplification protocol (TRAP) is now a conventional assay for detecting telomerase activity. However, this method presents problems related to tedious quantifying, radioisotopic handing and the limited number of samples to be examined. In order to alleviate these inconveniences, we have developed and evaluated a novel telomerase TRAP ELISA assay detecting human telomerase activity. Method: Telomerase TRAP ELISA assay is a system based on the combination of PCR ELISA with TRAP. Comparing with the conventional TRAP assay, we detected telomerase activity in 293 cell and negative controls (RNase pretreated or heat treated). Result : Telomerase activity in 293 cell is positive. The OD value of serial extracts from 10、10 2、10 3 and 10 4 cells assayed by telomerase PCR ELISA depended on the number of 293 cells in assay. RNase pretreated or heat treated control was negative. Telomerase TRAP ELISA detection yields results within one day and is handled without radioisotopes. Conclusion : Telomerase TRAP ELISA assay is non radioisotopic, fast and quantitative method for detecting human telomerase activity.