溶葡球菌酶的纯化和某些性质

1.应用本实验室构建的克隆菌株枯草杆菌0044进行了溶葡球菌酶的发酵生产,产量为150—200mg/L; 2.通过DEAE-纤维素,CM-纤维素和Sephadex G-50层析纯化了该酶;并以NaCl盐析方式,首次获得了该酶结晶; 3.测定了溶葡球菌酶的某些性质; 4.观察并讨论了溶葡球菌酶与溶菌酶等在溶菌作用上的相互加强。

溶葡球菌酶的发酵生产

用溶葡球菌酶基因的克隆菌株枯草杆菌Bacillus subtilis 0044作为生产菌,研究了该菌的生长和产酶条件。结果表明:该菌株能利用国产廉价培养基有效地合成和分泌溶葡球菌酶,产量达200mg/L培养液;添加抗菌素能维持质粒的稳定及保证溶葡球菌酶的产量;添加表面活性剂Tween-80可使酶产量提高20%～40%;产酶高峰期为12～15h,16 h以后,溶葡球菌酶产量迅速下降,这种产量下降的现象似与蛋白酶活性的升高有关;在适宜时期添加葡萄糖,可使产酶高峰期延长。