肾结石伴泌尿系统念珠菌感染复发患者病原真菌鉴定及耐药机制研究

目的研究临床分离念珠菌对常用抗真菌药物的敏感性及耐药机制。方法从肾结石伴泌尿系统念珠菌感染反复发作患者在药物治疗不同阶段的中段尿中分离得到9株病原菌并鉴定。微量液基稀释法检测药物最低抑菌浓度。PCR扩增ERG11和FKS1基因、测序并分析突变位点。气质联用检测药物作用下菌株的细胞膜甾醇成份及含量。采用实时定量PCR检测细胞膜外排泵相关基因及靶酶基因的表达情况。结果菌种鉴定为光滑念珠菌。测序结果经比对后显示ERG11存在4处无义突变,FKS1存在18处无义突变。菌株对药物的敏感性及基因表达情况随临床用药而改变。唑类药物处理后细胞膜麦角甾醇减少,提示靶酶ERG11被药物抑制。结论临床分离菌株的药物敏感性测试可指导临床用药。该光滑念珠菌耐药机制是由于靶酶高表达和外转运蛋白高表达引起。

白念珠菌线粒体呼吸途径研究进展

白念珠菌是侵袭性念珠菌病中最常见的致病菌。在对白念珠菌感染治疗过程中,许多临床分离菌对有限的抗真菌药物逐渐耐药,亟需发现和确定新的抗真菌靶点进而研发新药。线粒体是白念珠菌重要的细胞器,与众多生命活动有关,特别是线粒体呼吸途径关系到白念珠菌的能量供应。白念珠菌线粒体中存在3条呼吸途径,分别是经典呼吸链、交替氧化酶途径和平行电子传递链,其中交替氧化酶途径是其特有的,有望成为抗真菌药物新靶点。本文就白念珠菌3条呼吸途径研究进展进行综述。

单核苷酸多态性及其在生物医学中的应用进展

单核苷酸多态性 (SNP)是继限制性片段长度多态性(RFLP)和微卫星多态性标记之后的新一代遗传标记系统 ,具有密度高、遗传稳定、分析易自动化等特点。SNP可通过电泳、PCR、酶切、杂交及测序等方法检测 ,已广泛应用于基因作图、群体遗传学、疾病相关性分析及药物研究等领域。本文综述了近几年SNP在生物医学领域的应用进展。

体外诱导白念珠菌对氟康唑耐药性的研究

目的:建立白念珠菌耐氟康唑模型,研究白念珠菌耐药前后相关生物学特性变化。方法:体外用氟康唑诱导敏感白念珠菌SC5314和y01.09成为耐药子代SC5314R和y01.09R,利用微量液基稀释法和小鼠体内实验确定耐药表型,通过生长动力学、菌丝和生物膜形成实验观察生物学特性变化。结果:氟康唑对耐药子代SC5314R和y01.09R的MIC80分别为>128μg/mL,64μg/mL。无药培养35代后,MIC80分别为>128μg/mL,16μg/mL。有/无氟康唑环境下,敏感母本和耐药子代倍增时间无显著差异。氟康唑作用下,SC5314和y01.09菌丝形成受到抑制,SC5314R和y01.09R仍有菌丝形成;SC5314R和y01.09R可以形成牢固生物膜,SC5314和y01.09形成松散生物膜。结论:本实验成功诱导对氟康唑产生高度耐药的白念珠菌菌株,其耐药性通过体内外实验获得证实。

在临床药物治疗学教学中引入病例讨论的建议

临床药物治疗学是研究药物预防和治疗疾病的理论和方法的一门学科,具有很强的实践性。在传统的理论教学和临床见习之间增加临床病例讨论,可以提高教学效率,通过对疾病诊断、治疗的讨论分析,训练学生如何正确选择和合理应用药物,为临床药物治疗学实践教学打下基础。在临床病例讨论教学过程中,应注意因材施教,提高教师自身素质,培养学生兴趣,并加强师生互动。

临床药物治疗学授课反馈与教学改革

对药学专业2008级、2009级、2010级临床药物治疗学课程的教学情况进行了问卷调查。通过调查分析,对教学效果进行检测和评价,发现现行教学中所存在的问题,并提出改革相应措施,提高教学质量。

谈记忆心理学在药理学教学中的应用

药理学是介于基础医学和临床医学、医学与药学之间的一门重要学科。药理学的内容繁杂抽象,较难理解掌握。在教学过程中运用概括归纳记忆法、形象记忆法、比较记忆法、分总记忆法、材料互联记忆法等记忆心理学方法,可帮助学生提高记忆效果。

面向审方岗位的临床药物治疗学教学改革

本文基于药师审方岗位的现状,通过开展临床药物治疗学课程教学改革,探索审方岗位人才培养方案、课程建设以及教学方式改革,突出案例教学法在处方审核理论和实践教学中的应用,重视在四查十对、处方用药适宜性审核等环节中合理用药知识的讲授和审方能力培养,以促进药师审方能力的提升。

培菲康临床应用进展

(第二军医大学药学院药理教研室上海200433)摘要目的:介绍三联活菌制剂“培菲康”的临床研究与应用。方法:查阅国内外文献,并进行分析、归纳和综述。结果:“培菲康”临床应用广泛,对儿童腹泻、儿童功能性便秘、新生儿黄疸、肠易激综合征等有肯定疗效;对儿童厌食症、肝硬化、幽门螺旋杆菌感染、儿童单纯性肾病综合征等有很好疗效。结论:“培菲康”具有重要的临床意义,随着研究的深入,其临床应用将有更大的发展空间和潜力。

白念珠菌总蛋白质组二维电泳条件的建立和优化

目的:建立并优化白念珠菌总蛋白质组分析的二维电泳条件。方法:以白念珠菌国际标准菌株SC5314为材料,制备其总蛋白质组样品。以真菌细胞破碎方法、裂解液成分、上样量、固相pH梯度胶条的选择为侧重点,通过不同条件下电泳图谱的比较建立最佳二维电泳技术条件。结果:成功建立白念珠菌总蛋白质制备方法,优化了白念珠菌蛋白质组分析的二维凝胶电泳技术,获得重复性和分辨率都较理想的白念珠菌总蛋白质二维电泳图谱。结论:优化后的二维电泳条件符合白念珠菌的特点,为白念珠菌蛋白质组分析奠定基础。

天然产物 T12抗真菌作用及其机制研究

目的:研究从刺蒺藜(Tribulus terrestris L.)分离的一种皂苷类化合物T12的抗真菌作用及机制。方法:采用微量液基稀释法测定T12体外MIC_(80)值;透射电镜观察T12对白色念珠菌超微结构的影响;薄层色谱法、气质联用色谱法分别研究T12对细胞膜麦角甾醇生物合成通路的影响。结果:T12具有强的抗真菌活性,对白色念珠菌的体卟MIC_(80)值为0.87μmol·L^(-1);透射电镜观察,可见T12作用后,细胞膜多处破裂,细胞壁未见明显改变;T12对细抱膜麦角甾醇生物合成通路有明显影响。结论:结构新型、具有强抗菌活性的T12,通过影响白色念珠菌细胞膜麦角甾醇的生物合成发挥抗真菌作用。

临床药学思维模式培养浅谈

临床药学是以病人为对象,研究药物与病人的相互作用,以及药物应用规律的综合性学科。临床药师融入临床一线,运用药学专业知识,结合具体病情,协助医生制订个体化给药方案,并全程监测用药过程,保证药物治疗的安全、有效、经济和合理。药师参与临床治疗是今后医院药学发展的必然趋势。

《中药大辞典》记载的抗真菌中药体外药效再评价

目的对《中药大辞典》中记载有抗真菌药理作用的127种中药醇提物进行体外抗深部感染真菌(白念珠菌、新生隐球菌、烟曲霉)的研究。方法采用75%乙醇超声提取法对127种中药进行统一提取,参考CLSI微量液基稀释法M27-A3和M38-A2方案进行抗白念珠菌、新生隐球菌、烟曲霉的最低抑菌浓度(MIC)测定,并进一步考察其抗菌谱及抑制菌丝作用。结果在2mg/mL浓度下,仅博落回等17种中药、月季花等34种中药、黄柏等5种中药分别对白念珠菌、新生隐球菌、烟曲霉有抑制作用,其中博落回和粉萆薢的抗菌谱广;在4mg/mL浓度下,127种中药中仅粉萆薢和藜芦能完全抑制菌丝生长,最低浓度分别为200μg/mL和500μg/mL。结论首次用统一标准对《中药大辞典》中记载的抗真菌中药进行体外活性筛选,并对其药效进行再评价,为新型抗真菌药物开发提供理论依据和参考。

肠炎冲剂解热镇痛抗炎作用的实验研究

目的:研究肠炎冲剂的解热、镇痛和抗炎作用。方法:用蛋白胨所致发热模型研究肠炎冲剂的解热作用;用热板法及扭体法观察其镇痛作用;用足跖肿胀法及耳肿胀法研究其抗炎作用。结果:肠炎冲剂能显著抑制蛋白胨所致体温升高;肠炎冲剂能明显延长动物对热刺激的反应潜伏期,并明显减少其扭体次数;该药也能显著减轻动物足跖及耳片肿胀反应。结论:肠炎冲剂具有解热、镇痛和抗炎作用。

肠炎冲剂对溃疡性结肠炎模型大鼠的治疗作用

目的 :研究肠炎冲剂对三硝基苯磺酸 (TNBS)所致慢性溃疡性结肠炎模型大鼠的治疗作用。 方法 :TNBS的 5 0 %乙醇溶液一次性注入大鼠直肠 ,造成大鼠的慢性溃疡性结肠炎模型后 ,连续给药 ,观察腹泻率、死亡率 ,分别于连续给药 3周及4周后麻醉处死动物 ,测定组织髓过氧化物酶 (MPO)活力。地塞米松为阳性对照药。 结果 :地塞米松组动物症状减轻 ,但解剖学检查可见胸腺明显萎缩 ;连续给予不同剂量的肠炎冲剂药液 (给药剂量为 11 4、5 7、2 9g生药 /kg体重 ) ,各剂量组动物腹泻明显缓解 ,动物死亡率、腹泻率、结肠组织MPO活力明显降低 ,病理学检查或尸检可见结肠组织溃疡面积明显缩小 ,水肿缓解 ,坏死减轻 ,未见肠壁增厚。肠炎冲剂能显著缓解TNBS所致慢性溃疡性结肠炎症状 ,且未见地塞米松所致免疫器官萎缩的免疫抑制作用。 结论 :肠炎冲剂连续给药 ,对慢性溃疡性结肠炎模型大鼠治疗作用明显 ,并且未见地塞米松所致严重不良反应 ,是治疗慢性溃疡性结肠炎的较合适药物。

122味维吾尔药体外抗真菌作用

目的测定122味维吾尔药的体外抗真菌活性,以期找到活性较好的抗真菌药物。方法用75%乙醇超声提取维吾尔药;美国临床实验室标准化协会(CLSI)推荐的M38-A2和M27-A3微量液基稀释法进行抗深部真菌活性筛选;棋盘微量液基法考察维吾尔药与氟康唑协同抗耐药白假丝酵母菌的作用;磷钼钨酸-干酪素法测定鞣质含量,并比较不同溶剂提取部位抑菌活性与鞣质含量的关系。结果和结论在122味维吾尔药活性测定中,在2 000μg/m L测定浓度下,对新生隐球菌有抑制作用的有黄诃子皮(Terminalia chebula Retz.)、毛诃子(Terminalia bellerica Roxb.)等21味,对白假丝酵母菌有抑制作用的有黄诃子皮、毛诃子等15味,对烟曲霉仅姜黄(Curcuma longa L.)有效。姜黄抗菌谱最广,且对深部真菌及浅部真菌均有较好的抑制作用。9味维吾尔药与氟康唑合用对耐药白假丝酵母菌有较好协同抗真菌作用;黄诃子皮、毛诃子、岩白菜(Bergenia purpurascens Engl.)、阿拉伯胶树汁(Acacia senegal Willd)、鞣树果(Rhus coriaria L.)这5味活性较好药材的抗真菌活性部位集中在乙酸乙酯部位,且不同溶剂提取部位的最低抑菌浓度与鞣质含量呈正相关。

一种四步法提取分离白念珠菌总蛋白质方法的建立

目的:建立白念珠菌总蛋白质分步提取分离的方法。方法:利用四种溶解能力不同的溶液分步提取白念珠菌总蛋白,定量后,分别进行一维等电聚焦分离和二维聚丙烯酰胺凝胶电泳分离。结果:成功分步提取获得白念珠菌不同溶解度的蛋白,得到各步提取蛋白的二维凝胶电泳图谱。结论:四步法提取白念珠菌总蛋白质是研究白念珠菌蛋白质组的有效方法,为进一步研究白念珠菌耐药机制以及抗真菌药物作用机制奠定基础。

试管法研究肠炎颗粒的体外抑菌作用

目的 :对肠炎颗粒的抑菌作用进行探讨。方法 :用试管法研究肠炎颗粒对 9种临床常见致病菌的抑菌作用。结果 :试管培养 2 4～ 4 8h,对金黄色葡萄球菌最低抑菌浓度为 0 .0 39g生药 /ml,对伤寒沙门氏菌、甲型副伤寒沙门氏菌、乙型副伤寒沙门氏菌、丙型副伤寒沙门氏菌、大肠埃希菌、致病性大肠埃希菌、粪肠球菌、福氏志贺菌最低抑菌浓度为 0 .31～ 0 .6 2 g生药 /ml。结论 :肠炎颗粒对 9种实验细菌均有抑菌作用 ,其中对金黄色葡萄球菌抑菌作用最强。

白念珠菌V-ATPase研究进展

白念珠菌是临床最常见的条件致病真菌,V-ATPase是真核生物中高度保守的质子泵转运复合物,可以维持液泡和细胞质pH稳态。近年来,V-ATPase作为一个抗白念珠菌感染的潜在靶点为人们所关注,本文就V-ATPase抑制剂、相关的其他靶点及抑制剂筛选等方面的研究进展作一综述。