无菌药品生产企业微生物洁净室微生物污染的鉴定与结果分析

目的:利用DNA测序技术对天津地区5家药品生产企业微生物洁净室采集到的微生物菌株进行测序鉴定和结果分析,为药品微生物污染追踪溯源提供技术支持。方法:采用革兰氏染色技术、VITEKⅡ生化鉴定和分子测序鉴定技术,对我市5家无菌药品生产企业微生物洁净室(A/B和A/C级洁净区)采集到的90株细菌和6株霉菌共计96株菌进行鉴定和分析。结果:通过96株菌株的鉴定结果,发现葡萄球菌属细菌数最多,占全部分离株的50.0%,芽孢杆菌属占18.8%,库克氏菌属占10.4%。其中表面微生物有52株,占54.2%,沉降菌有20株,占20.8%,浮游菌有24株,占25.0%。结论:利用DNA测序技术对采集到的环境菌株进行鉴定结果更为准确可靠,菌株的采集位置及鉴定结果能有效地为无菌药品企业微生物污染情况进行整体分析和风险控制。

牛磺酸颗粒微生物限度检查方法适用性试验研究及市场质量考查

目的:依据《中国药典》2015年版,建立了牛磺酸颗粒的计数方法和控制菌检查方法的适用性试验,对17个生产企业的47批次样品进行检验,根据检验结果对牛磺酸颗粒的市场质量情况进行分析。方法:需氧菌总数、霉菌和酵母菌总数采用平皿法;大肠埃希菌采用常规法。结果:47批样品中有1批样品不合格,合格率约为98%。结论:建立了牛磺酸颗粒的计数方法和控制菌检查方法的适用性试验,牛磺酸颗粒的整体质量相对稳定。

注射用盐酸地尔硫[艹卓]无菌方法适用性试验研究及市场质量考查

目的:建立适用于生产企业的注射用盐酸地尔硫[艹卓]无菌适用性方法,并对3个生产企业的34批次样品进行检验,根据检验结果对注射用盐酸地尔硫[艹卓]的质量现状进行分析。方法:依据《中国药典》2015年版四部微生物限度相关内容,采用0.9%无菌氯化钠溶液作为溶剂,并用0.1%无菌蛋白胨溶液300 ml进行冲洗。结果:方法适用性试验中在规定时间内各试验菌均正常生长;对抽取的34批样品进行无菌检查,结果均符合规定,合格率为100%。结论:建立了适用于生产单位的注射用盐酸地尔硫[艹卓]无菌适用性方法,注射用盐酸地尔硫[艹卓]的整体质量情况较好且稳定。

补肾强身胶囊微生物限度方法的研究及相关市场质量考查

目的:建立补肾强身胶囊微生物限度检查方法,进行方法适用性试验,并对抽取的143批样品进行微生物限度检查。方法:细菌计数采用培养基稀释法,霉菌和酵母菌采用平皿法;大肠埃希菌和大肠菌群采用常规法。结果:稀释法可有效去除补肾强身胶囊的抑菌作用,使各试验菌的加菌回收率均符合《中国药典》要求。结论:补肾强身胶囊可按照此方法进行微生物限度检查。抽验143批次结果均符合规定。

葡萄球菌分类与鉴定的两种方法研究与探讨

目的鉴于葡萄球菌传统表型鉴定方法的局限性,为确保药品微生物检验中葡萄球菌检验结果的准确性,依据《中国药典》2015年版四部通则,利用DNA测序技术对15株菌株成功进行了序列测定,并与传统的生化鉴定方法进行比较和分析。方法用PCR仪扩增提取到的葡萄球菌基因组DNA,然后进行琼脂糖凝胶电泳并对目的条带进行切胶回收,用ABI 3500测序仪对15株菌株进行DNA序列测序,对测定结果用CExpress软件进行拼接,并与数据库进行比对,用该结果与VITEKⅡ生化鉴定仪的结果进行比较和分析。结果 15株菌株的测序结果除了10号菌株DNA相似度为93.38%外,其余均大于99%,序列比对结果与VITEKⅡ生化鉴定仪的结果一致。结论利用DNA测序技术对葡萄球菌进行鉴定的结果比传统的表型鉴定和生化鉴定结果更为准确可靠。

制药用水微生物限度检查新方法的研究

目的：建立新的制药用水微生物限度检查方法，更好地指导国内企业控制制药用水的微生物污染。方法：比较中国药典（2010年版）、欧洲药典（EP 7.0）及美国药典（USP 35）制药用水微生物限度检查方法，通过数据分析确立最优条件：采用R2A琼脂培养基，按薄膜过滤法，30-35 ℃培养不少于5 d。结果：新方法在污染菌的检出率上较现行中国药典制药用水微生物检验方法存在显著提高。结论：本研究建立的制药用水微生物限度检查方法有更高的检出率，能够更好的反映制药用水微生物污染的真实情况，可作为中国药典2010年版增补本收载方法。

天津市市售26种益生菌饮品标示菌种情况调查

目的考察天津市市售益生菌饮品中益生菌添加情况,包括乳酸菌总数、添加菌与标示菌种是否一致等问题。方法2018年3月-2019年10月,在大型超市、连锁便利店和小卖部等销售点共抽取26批样品。对标准菌株进行菌种鉴定方法适用性试验,用建立的方法对26份样本进行了乳酸菌菌数计数、菌种分离及鉴定等检验。结果26批样品乳酸菌菌数未达到GB 19302-2010《食品安全国家标准发酵乳》规定或产品标示的乳酸菌菌数的样品有9批,乳酸菌菌数不合格占比为35%。22批(未经巴氏消毒处理)标示含有嗜热链球菌的样品均鉴定为嗜热链球菌,与产品标示均一致。5批样品未检出标示的双歧杆菌,其余标示有双歧杆菌的样品均检测到双歧杆菌,但5批样品的测序结果和标示的不一样。6批样品检出的乳杆菌和标示的一致。其余样品中,10批样品标示的菌部分检出;5批样品标示的菌检出,但同时还检出未标示的乳杆菌;2批样品标示的乳杆菌未检出,但检出了未标示的乳杆菌。结论天津市市售益生菌饮品存在问题,提高监管力度势在必行。