美洲大蠊提取物抗肝损伤的实验研究

目的:观察美洲大蠊活虫冷浸药渣水提物对小鼠急性肝损伤模型及CCl4所致大鼠慢性肝损伤模型的影响,为美洲大蠊抗肝损伤的临床应用及物质基础研究提供一定实验依据。方法:美洲大蠊活虫冷浸药渣水提物连续灌胃给予小鼠10天,分别采用灌胃醋氨酚、60%乙醇及腹腔注射CCl4进行小鼠急性肝损伤造模,测定模型小鼠血清ALT与AST水平、肝组织SOD与MDA水平及肝脏、脾脏指数以评价受试药物的抗急性肝损伤作用;采用每周两次灌胃CCl4,连续8周的方式制备慢性肝损伤大鼠模型,测定模型动物血清ALT、AST水平及肝、脾、胸腺指数以评价药物的抗慢性肝损伤作用。结果:美洲大蠊活虫冷浸药渣水提物49.13 mg﹒kg^(-1)显著降低酒精性与CCl4性急性肝损伤模型小鼠血清AST、ALT水平(P<0.05),对醋氨酚模型小鼠血清AST、ALT水平有降低趋势(P>0.05),能显著性降低醋氨酚模型小鼠脾脏指数(P<0.05);65.51 mg﹒kg^(-1)显著降低酒精性急性肝损伤模型小鼠血清ALT、AST水平(P<0.05),32.75 mg﹒kg^(-1)显著降低血清ALT与肝组织MDA水平(P<0.05)。美洲大蠊活虫冷浸药渣水提物75.78 mg﹒kg^(-1)显著降低CCl4所致慢性肝损伤模型大鼠血清AST、ALT水平(P<0.05),45.76、75.78 mg﹒kg^(-1)显著提高模型大鼠胸腺指数(P<0.05),45.76 mg﹒kg^(-1)明显降低肝脏指数(P<0.05)。结论:美洲大蠊活虫冷浸药渣水提物具有抗急性和慢性肝损伤的作用,该部位可能是其保肝作用的物质基础之一。

荆防散乙酸乙酯萃取部位及分离物的抗过敏作用研究

目的:进一步明确荆防散乙酸乙酯萃取部位及其分离物的抗过敏作用,探讨其作用机制,初步揭示其有效物质基础。方法:采用C48/80刺激RBL-2H3细胞脱颗粒实验,以β-氨基己糖苷酶释放为评价指标初步筛选各分离物的抗过敏作用;采用半抗原DNFB(2,4-二硝基氟苯)诱导小鼠变应性接触性皮炎模型(ACD模型),观察荆防散乙酸乙酯萃取部位及其分离物的抗过敏作用与机制。结果:荆防散乙酸乙酯部位及其分离物对C48/80诱导的RBL-2H3细胞β-氨基己糖苷酶的释放均表现出一定的抑制作用;荆防散乙酸乙酯分离物A、C、D能抑制DNFB诱导所致的变应性接触性皮炎模型小鼠的耳肿胀度,并降低耳组织中IL-4、IFN-γ、TNF-α水平;分离物D显著降低模型小鼠血清IgE水平,分离物C对模型小鼠耳组织的病理损伤改善作用较优。荆防散乙酸乙酯萃取部位对模型小鼠耳组织中IL-4、IFN-γ及血清中IgE水平亦有降低作用。结论:荆防散乙酸乙酯萃取部位抗过敏作用明确,其分离物A、C、D为其主要有效物质,其中分离物D能显著抑制IgE生成,可能作用于过敏反应初级阶段,分离物A、C则对致敏后期相关过敏介质的释放具有抑制作用。

桂枝挥发油与桂皮醛对病毒性肺炎小鼠细胞因子及T细胞亚群的影响

目的:研究桂枝挥发油及主要成分桂皮醛抗甲型流感病毒A/PR/8/34(H1N1)作用及其抗病毒作用机制。方法:KM小鼠70只随机分为7组,分别为正常组,模型组,利巴韦林组(0.15 g·kg-1),桂枝挥发油高、低剂量组(0.348,0.174mg·kg-1),桂皮醛高、低剂量组(0.264,0.132 mg·kg-1),每组10只。将浓度为30 LD50的H1N1病毒液50μL注入小鼠气管,复制病毒性肺炎模型小鼠,观察连续ig给药5 d对模型小鼠肺组织血凝滴度的抑制作用;ELISA法观察上述组别连续ig给药5 d对模型小鼠血清细胞因子白细胞介素-2(IL-2),IL-6和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)分泌量的影响;流式细胞仪法测定桂枝挥发油0.348 mg·kg-1,桂皮醛0.264 mg·kg-1,正常组,模型组及利巴韦林组连续ig给药5 d对模型小鼠外周血T细胞亚群的影响。结果:与正常组比较,模型组小鼠肺组织血凝滴度,小鼠血清IL-6,TNF-α含量明显升高,小鼠外周血CD4+/CD8+,小鼠血清IL-2含量明显降低(P<0.05);与模型组比较,桂枝挥发油0.348 mg·kg-1,桂皮醛0.264 mg·kg-1能明显降低模型小鼠肺组织血凝滴度(P<0.05),桂皮醛0.264 mg·kg-1和桂枝挥发油0.348 mg·kg-1分别显著降低模型小鼠血清IL-6,TNF-α含量(P<0.05),桂皮醛0.264 mg·kg-1可使模型小鼠外周血CD4+/CD8+明显升高(P<0.05),各药物对小鼠血清IL-2含量的影响并不明显。结论:桂枝挥发油、桂皮醛治疗给药能明显降低模型小鼠肺组织血凝滴度,表现出较好的抗流感病毒作用。抗病毒机制与调控模型小鼠血清细胞因子IL-2,IL-6,TNF-α分泌水平及提高外周血T细胞亚群的比例有关。

逍遥散拆方药队的抗抑郁作用及部分机制研究

目的:观察逍遥散的拆方药队(柴胡、当归、薄荷,简称柴当薄组)对CUMS抑郁模型小鼠行为学及5-HT1A/2A受体激动剂所引起的小鼠行为反应的影响,揭示该拆方药组的抗抑郁作用及5-HT/BDNF信号通路作用机制。方法:慢性不可预知温和应激+孤养6周制备CUMS小鼠抑郁模型,造模第3周逍遥散全方(30g/kg)、柴当薄组(16.43g/kg、21.90g/kg)、阿米替林(10mg/kg)开始灌胃给药,连续4周,以小鼠体重、自主活动量、糖水偏爱百分比、空间记忆探索能力等行为学指标评价抗抑郁作用。ELISA法测定模型小鼠血清BDNF、5-HT水平及海马部位5-HT含量,及采用8-OH-DPAT(5-HT1A受体激动剂)、DOI(5-HT2A受体激动剂)引起小鼠行为学变化实验,探讨作用机制。结果:与模型对照组比较,柴当薄组16.43g/kg、21.9g/kg剂量均显著提高CUMS模型小鼠的自主活动、糖水消耗量,明显缩短水迷宫测试中定位航行的潜伏期;柴当薄组16.43g/kg可显著增加空间探索实验时目标象限运动距离及有效区域进入次数。柴当薄组16.43g/kg、21.9g/kg显著增加模型小鼠血清BDNF、5-HT含量及海马部位5-HT水平,显著对抗DOI所致的小鼠甩头反应;柴当薄组21.9g/kg对8-OH-DPAT引起的小鼠5-HT样行为表现出明显的协同作用。结论:逍遥散功效拆方研究所获得的柴当薄药组对CUMS模型小鼠有良好的抗抑郁作用,并能协同8-OH-DPAT、拮抗DOI的作用,抗抑郁作用机制可能与激动5-HT1A受体、阻断5-HT2A受体从而影响5-HT/BDNF受体信号通路有关。

逍遥散对嗅球摘除抑郁模型大鼠的抗抑郁作用机制研究

目的:观察逍遥散对嗅球摘除抑郁模型大鼠血清单胺类神经递质水平,及海马与皮质部位5-HT1A、5-HT2A mRNA表达、5-HT1A蛋白表达的影响,探讨其抗抑郁作用机制。方法:手术摘除方法建立SD大鼠的嗅球摘除抑郁模型。逍遥散三个剂量(30g/kg、15g/kg、7.5g/kg)和阿米替林(0.01g/kg)连续灌胃给药4周。高效液相-电化学法测定大鼠血清NE、AD、DA与5-HT水平,Real-time PCR测定大鼠海马及皮质部位5-HT1A、5-HT2A mRNA表达,Western-blotting法测定5-HT1A受体蛋白表达水平。结果:与正常组或假手术组比较,嗅球摘除抑郁模型大鼠血清NE、5-HT含量显著降低,海马与皮质部位5-HT1A mRNA表达水平相对下调,5-HT2A mRNA表达相对上调,5-HT1A蛋白表达水平明显下调,提示该模型动物存在单胺类神经递质水平紊乱表现。与模型组比较,逍遥散(30g/kg、15g/kg)提高血清NE、AD含量,30g/kg逍遥散提高5-HT含量,7.5g/kg亦提高血清NE含量;逍遥散(30g/kg、15g/kg)显著上调模型大鼠海马、皮质部位5-HT1A受体蛋白表达量,对5-HT1A、5-HT2A mRNA的异常表达有一定改善作用,7.5g/kg剂量明显上调皮质5-HT1A mRNA表达水平。结论:逍遥散对嗅球摘除抑郁模型大鼠的抗抑郁作用发挥与提高血清单胺类神经递质(NE、AD、5-HT)水平,上调海马、皮质部位5-HT1A mRNA表达及5-HT1A受体蛋白表达水平有关,表明逍遥散的作用机制与调控5-HT能神经功能有关。

桂枝不同萃取部位抗过敏作用的研究

目的:观察解表药桂枝不同萃取部位的抗过敏作用,探讨该药抗过敏作用的有效物质基础,为其功效和临床应用提供药理依据。方法:采用2,4-二硝基氯苯(DNCB)诱发的小鼠迟发型超敏反应模型,及小鼠异种被动皮肤过敏反应模型观察各受试药液对模型动物毛细血管通透性的影响,以初步筛选有效部位。进一步采用DNCB致小鼠迟发型超敏反应以及组胺、5-羟色胺所致小鼠皮肤毛细血管通透性增高模型,和体外透明质酸酶抑制实验验证桂枝去油水煎液、乙酸乙酯部位与水提部位的抗过敏作用。结果:桂枝去油水煎液(6g生药/kg)、乙酸乙酯萃取部位(6g生药/kg)、水提部位(6g生药/kg)能显著降低迟发型过敏反应模型小鼠的毛细血管通透性,乙酸乙酯部位组亦能明显抑制该模型小鼠的耳廓肿胀度;三者对小鼠异种被动皮肤过敏反应有明显抑制作用。桂枝去油水煎液及乙酸乙酯部位对组胺、5-HT所致小鼠毛细血管通透性的增加有显著抑制作用;两者在浓度0.5g/ml时,体外对透明质酸酶有较强的抑制作用,抑制率分别为52.48%、52.17%。结论:桂枝去油水煎液、乙酸乙酯部位具有较好的抗过敏作用,提示桂枝抗过敏作用的有效组分以极性较高的水溶部位为主,其作用机制与抗过敏介质(如His、5-HT)效应有关。

荆防散乙酸乙酯部位对过敏性动物模型和IFN-γ、IL-4水平的影响

目的:研究荆防散乙酸乙酯部位对大鼠、豚鼠过敏性模型及IFN-γ、IL-4水平的影响,初步探讨其抗过敏作用机制与纠正Th1/Th2免疫失衡的关系。方法:采用卵白蛋白合并百白破疫苗致大鼠全身主动过敏反应模型和卵白蛋白致豚鼠哮喘模型,测定大鼠脏器(胸腺、脾)指数及血清IL-4、IFN-γ水平;测定豚鼠全血白细胞计数、血清Ig E水平,及肺泡灌洗液(BALF)中IL-4、IFN-γ水平和总蛋白含量。结果:与模型对照组比较,荆防散乙酸乙酯部位5.0 g生药/kg、2.5 g生药/kg显著降低全身主动过敏反应模型大鼠血清IL-4水平、升高大鼠胸腺指数及血清IFN-γ水平,并能显著降低哮喘模型豚鼠全血白细胞计数和血清Ig E水平;荆防散乙酸乙酯部位2.5 g生药/kg显著对抗哮喘模型豚鼠肺泡灌洗液中IL-4、总蛋白含量的升高及IFN-γ水平的降低。结论:荆防散乙酸乙酯部位抗过敏作用良好,作用机制与上调IFN-γ水平、下调IL-4水平有关,提示其能通过纠正Th1/Th2免疫失衡来抑制过敏反应。

血尿安胶囊抗尿路感染的药效学研究

目的：评价血尿安胶囊防治尿路感染的作用,为其临床应用提供实验依据。方法：采用大肠ATCC25922标准菌株制备大鼠膀胱逆行泌尿系统感染模型,血尿安胶囊10g/kg、5g/kg、2.5g/kg连续灌胃给药6d,观察药物对模型大鼠尿常规、血清肌酐与尿素氮含量,膀胱洗液菌落计数的影响,并剖取肾脏进行脏器指数、菌落计数及病理组织学检查。采用琼脂对倍稀释法和纸片法检测血尿安胶囊体外对大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、阴沟肠杆菌、变形杆菌等临床分离菌株的抗菌作用。结果：血尿安胶囊显著降低膀胱逆行泌尿系统感染模型大鼠肾脏、膀胱洗液的菌落计数,降低尿蛋白阳性率和血清尿素氮水平,降低大鼠肾脏组织的炎性病变程度,以5g/kg剂量为优。血尿安胶囊体外对泌尿系统易感菌的抑菌范围为0.056~0.1g原生药/ml,对铜绿假单胞菌、变形杆菌有较强杀灭作用,杀菌浓度〈0.45g原生药/ml。结论：血尿安胶囊具有抗尿路感染作用,其作用机理有待进一步探讨。

洋椿苦素对人宫颈癌Hela细胞增殖的抑制作用研究

目的:研究洋椿苦素(cedrelone)体外对人宫颈癌Hela细胞增殖的抑制作用,并探讨其诱导细胞凋亡的作用机制。方法:采用CCK-8法计算不同浓度的洋椿苦素作用人宫颈癌Hela细胞后的IC50及增殖抑制率;Hoechst 33258荧光染色法和流式细胞术Annexin V-FITC/PI双染法检测洋椿苦素对Hela细胞凋亡的诱导作用;流式细胞术PI单染法检测洋椿苦素对Hela细胞生长周期的影响;Real-time PCR法测定CDK2、cyclinA mRNA表达。结果:不同浓度的洋椿苦素作用Hela细胞48小时后均能抑制其生长,其IC50值为1.4μg/ml。洋椿苦素作用24小时后,Hela细胞呈典型的凋亡形态学改变,细胞体积缩小,胞核致密浓染,呈半月状或呈碎块状。0.21μg/ml、0.42μg/ml、1.05μg/ml、1.47μg/ml、1.89μg/ml、4.22μg/ml的洋椿苦素作用Hela细胞24小时后的凋亡率分别为3%、4.1%、6.2%、7%、8.4%、58.5%。洋椿苦素作用于Hela细胞24小时后,可使细胞生长停滞在S期,即DNA合成期,并剂量依赖性地下调CDK2、cyclinA mRNA表达水平。结论:洋椿苦素对人宫颈癌Hela细胞增殖具有良好抑制作用,作用发挥与下调CDK2、cyclin A mRNA表达从而抑制Hela细胞S期DNA合成,诱导其凋亡有关。