中药胃康宁对胃癌细胞周期因子Cyclin E、CDK2和p27表达的影响

目的：观察中药胃康宁含药血清对胃癌细胞Cyclin E、CDK2（Cyclin dependant kinase 2,CDK2）和p27mRNA及其蛋白表达的作用.方法：分别以高、中、低不同剂量的胃康宁制剂对Wistar雄性大鼠进行灌胃,制备含药血清,然后分别用不同剂量组含药血清培养胃癌细胞,采用免疫组织化学SABC法检测各组胃癌细胞中CyclinE、CDK2和p27蛋白的表达,RT-PCR法检测各组胃癌细胞中Cyclin E、CDK2和p27 mRNA的表达.结果：免疫组化法结果显示,胃康宁高、中、低剂量组Cyclin E和CDK2灰度值均有明显升高,与空白对照组比较,P＜0.05～0.01,而p27灰度值则显著降低（P＜0.05～0.01）;RT-PCR结果显示,与空白对照组比较,胃康宁低、中、高剂量组均能明显降低Cyclin E和CDK2 OPTDI值（P＜0.05～0.01）.同时,还能升高p27 OPTDI值（P＜0.05～0.01）.结论：中药胃康宁可抑制胃癌细胞周期因子Cyclin E、CDK2及其mRNA的表达,促进细胞周期抑制因子p27及其mRNA的表达,这可能是胃康宁抑制胃癌细胞生长的机制之一.

脑还丹对快速老化小鼠学习记忆能力的影响及其抗氧化和抗凋亡作用

目的:观察脑还丹对快速老化小鼠学习、记忆的影响及其抗氧化、抗凋亡作用。方法:将40只SAM-P/8快速老化小鼠随机分为4组:模型组、银可络组、脑还丹低剂量组和脑还丹高剂量组,每组10只。模型组予以生理盐水灌胃,其余各组予以相应药物治疗。治疗105d后,采用跳台实验及Y型迷宫实验进行小鼠行为学测试,并检测小鼠血清超氧化物歧化酶(superoxidedismutase,SOD)、丙二醛(malondialdehyde,MDA)、谷胱甘肽过氧化物酶(glutathioneperoxidase,GSH-Px)的含量。采用逆转录聚合酶链反应(reversetranscription-polymerasechainreaction,RT-PCR)检测小鼠大脑皮质及海马凋亡抑制基因bcl-xlmRNA的表达。结果:银可络组和脑还丹低、高剂量组小鼠的学习、记忆成绩均明显优于模型组(P<0.05或P<0.01),其中以脑还丹高剂量组的疗效最为显著(P<0.01)。银可络组和脑还丹低、高剂量组小鼠血清SOD、GSH-Px的含量及大脑皮质和海马bcl-xlmRNA的表达,均明显高于模型组(P<0.05或P<0.01);而血清MDA的含量则明显低于模型组(P<0.01)。结论:脑还丹能改善快速老化小鼠的学习、记忆能力,具有抗氧化及促进bcl-xlmRNA表达的作用。

胃康宁含药血清对胃癌细胞生长与血管内皮生长因子及其受体KDR、Flt-1表达的影响

目的观察中药胃康宁含药血清对胃癌细胞生长和VEGF及其受体表达的作用。方法分别以高、中、低等不同剂量的胃康宁制剂对Wistar雄性大鼠进行灌胃,制备含药血清,然后分别用不同剂量组合药血清培养胃癌细胞,以倒置显微镜及流式细胞仪观测各组胃癌细胞的生长状况,免疫组织化学SABC法检测各组胃癌细胞中血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)及其受体Flt-1的表达,RT- PCR法检测各组胃癌细胞中VEGF及其受体KDR,Flt-1 mRNA的表达。结果与对照组比较,用药组胃癌细胞的生长及细胞周期明显改变(P＜0．01),用药组G_0-G_1期细胞增多,S期细胞减少,凋亡率增加,并呈一定的量效关系。VEGF的灰度值由对照组的147．82±0．15升高到低剂量组的174．80±0．81,中剂量组的178．65±0．56,高剂量组的182．44±0．54(P＜0．01)。Flt-1的灰度值由对照组144．31±0．71升高到低剂量组148．20±0．69,中剂量组162．01±0．52,高剂量组168．51±0．81(P＜0．01)。胃康宁含药血清培养的胃癌细胞中VEGF及其受体KDR、Flt-1 mRNA的表达明显减弱(P＜0．01)。结论中药胃康宁对胃癌细胞的生长,VEGF及其受体的表达有抑制作用。

中药胃康宁对胃癌细胞生长与胃癌细胞周期调控因子的影响

目的观察中药胃康宁含药血清对胃癌细胞生长与胃癌细胞周期调控因子CyclinD2、CyclinE、Cdk2(Cyclin dependant kinase2,CDK2)Cdk4、Cdk6和p16INK4a、p27KIP1mRNA及其蛋白表达的作用。方法分别将高、中、低不同剂量的中药胃康宁制剂对SD大鼠进行灌胃,制备含药血清,然后分别用不同剂量含药血清培养胃癌细胞,用流式细胞仪检测细胞周期的变化;采用免疫组织化学SABC法及RT-PCR法检测各组胃癌细胞中CyclinD2、CyclinE、Cdk2、Cdk4、Cdk6和p16INK4a、p27KIP1蛋白和mRNA的表达。结果中药胃康宁能将增殖过程中的MGC-803胃癌细胞阻滞于G0-G1期,使之不进入或延迟进入S期(即DNA合成期),抑制胃癌细胞的生长;免疫组化法结果显示,与空白对照组比较,中药胃康宁高、中剂量组CyclinE和Cdk2,CyclinD2和Cdk4、Cdk6蛋白均有明显升高,而p27KIP1、p16INK4a蛋白则显著降低(P<0·01);RT-PCR结果显示,中药胃康宁高、中剂量组均能明显降低CyclinD2、CyclinE、Cdk2和Cdk4、Cdk6OPTD值,同时升高p27KIP1、p16INK4aOPTDI值(P<0·01)。结论中药胃康宁可抑制胃癌细胞促细胞周期相关因子CyclinD2、CyclinE、Cdk2、Cdk4和Cdk6的表达,同时增强胃癌细胞周期抑制因子p27KIP1、p16INK4a的表达,这可能是中药胃康宁抑制胃癌细胞生长的作用机制。

经皮穴位电刺激治疗瘀滞型肩周炎疗效观察

目的：客观和规范地观察经皮穴位 电刺激疗法治疗瘀滞型肩关节周围炎的临床疗效。方法：采用规范化和 标准化的诊断、辨证和疗效评价标准，明确和固定各治疗参数，以肩部疼痛和肩关 节活动为观察指标，分别运用经皮穴位电刺激和电针对７８例患者进行对照治疗。 结果：经皮穴位电刺激具有与电针相似的良好疗效，在对疼痛指标和改善肩关节活 动等方面，两种疗法差异无显著性意义。结论：经皮穴位电刺激是一种 治疗瘀滞型肩周炎的较好疗法。

电针对胶原性关节炎大鼠的镇痛效应和抗体、IL—1β水平的影响

目的 :观察电针对胶原诱导性关节炎大鼠痛阈、β 内啡肽、抗II型胶原抗体及白介素 1β 水平(IL 1β)等的影响 ,以探索电针镇痛与免疫调节的双重作用及其相关性。方法 :Wistar雄性大鼠经牛II型胶原皮内注射接种诱导胶原性关节炎动物模型 ,在造模后第3天起在“足三里”穴进行电针刺激 ,连续19天。采用辐射热甩尾法测定大鼠痛阈 ,Wood氏法评估关节炎指数 ,酶联免疫吸附实验(ELISA)检测关节炎大鼠血清抗II型胶原抗体水平和脾脏白介素 1β 含量 ,放射免疫分析(RIA)法检测大鼠脑组织与脾脏中 β 内啡肽水平。结果 :电针能明显提高胶原诱导性关节炎大鼠的痛阈 ,对不同时期胶原免疫大鼠的痛阈有显著的即时升高效应 ,并能相应地增加大鼠脑组织和脾脏中 β 内啡肽的含量。电针不仅能有效地减少造模大鼠的肢体累及率 ,更明显地降低大鼠的关节炎指数和血清中抗II型胶原抗体水平。同时电针能显著抑制胶原诱导的大鼠脾组织中IL 1β 的水平。结论 :本研究说明 ,电针在对疼痛和免疫失调相兼疾病的治疗中不仅能镇痛 ,同时进行相应的免疫调节 。

中药胃康宁防治胃癌作用的机制探讨

目的:观察健脾解毒散结中药胃康宁含药血清对胃癌细胞周期调控因子CyclinD1,CyclinD2,Cdk4(Cyclin dependant kinase4,CDK4),Cdk6和p16INK4amRNA及其蛋白表达的作用。方法:分别将高、中、低不同剂量的中药胃康宁制剂igSD大鼠,制备含药血清,然后分别用不同剂量含药血清培养胃癌细胞;采用免疫组织化学SABC法及RT-PCR法检测各组胃癌细胞中CyclinD1,CyclinD2,Cdk4,Cdk6和p16INK4amRNA和蛋白的表达。结果:免疫组化结果显示,与空白对照组比较,胃康宁高、中、低剂量组CyclinD1灰度值变化,无统计学意义(P>0.05);CyclinD2,Cdk4,Cdk6灰度值均有明显升高,而p16INK4a灰度值则显著降低(P<0.05,P<0.01);RT-PCR结果显示,胃康宁高、中、低剂量组CyclinD1 OPTDI值变化,无统计学意义(P>0.05);但能明显降低CyclinD2,Cdk4和Cdk6 OPTDI值,同时升高p16INK4a OPTDI值(P<0.05,P<0.01)。结论:中药胃康宁可抑制胃癌细胞促细胞周期相关因子CyclinD2,Cdk4和Cdk6的表达,同时增强胃癌细胞周期抑制因子p16INK4a的表达,这可能是健脾解毒散结中药胃康宁抑制胃癌细胞生长的作用机制。