芦丁对肥胖诱发的雄性小鼠生殖损伤的保护作用

目的探讨芦丁在肥胖雄性小鼠体质量抑制以及对肥胖诱发的生殖损伤的保护效果及其机制。方法将24只雄性ICR小鼠随机分成3组,每组8只:正常对照组(ND组,正常饮食),高脂饮食组(HFD组,高脂饮食),芦丁保护组(HRU组,高脂饮食+芦丁)。28 d后,按后续实验需要进行取材处理。试剂盒检测生化指标;睾丸与附睾进行石蜡切片,HE染色进行形态学观察;统计精子数、活动度和畸形率。荧光定量PCR检测相关基因的表达水平;Western blot检测Ucp1蛋白表达水平。结果 HRU组比HFD组的平均体质量轻。HFD组睾丸和附睾组织中的甘油三酯的含量以及附睾组织中的甘油三酯的含量,明显高于ND组和HRU组。相较于HFD组的睾丸和附睾均出现结构松散,细胞结构异常,管腔内成熟的精子数量较少的现象,精子数量下降,活动度差等问题,HRU组均有明显改善。解偶联蛋白Ucp1基因和蛋白的表达量在芦丁处理后显著上升(P<0.05),Mcp1和Tnfα的表达则显著下降(P<0.05)。结论芦丁可以有效抑制高脂诱导的肥胖小鼠体质量的快速增长,对肥胖诱发的生殖损伤有一定的保护效果。

全氟辛酸对大鼠肝脏氧化应激与PPARα及其所调控的CYP4A1基因表达的影响

目的研究全氟辛酸(perfluorooctanoic acid,PFOA)致大鼠肝脏氧化应激以及对过氧化物酶体增殖剂激活受体(PPAR)α、细胞色素P450(CYP)4A1基因以及PPARα蛋白表达的影响。方法将28只雄性SD大鼠随机分为4组,每组7只,分别为对照组(双蒸水)、低剂量组[PFOA 1 mg/(kg·d)]、中剂量组[PFOA 5 mg/(kg·d)]和高剂量组[PFOA 25 mg/(kg·d)],连续14 d经口灌胃后处死,称重肝脏并计算肝脏系数。用生化检测试剂盒测定大鼠肝脏组织总超氧化物歧化酶(T-SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性以及丙二醛(MDA)含量;荧光定量PCR检测PPARα及CYP4A1基因的mRNA转录水平;Western blot检测PPARα蛋白表达水平。结果从灌胃第5天开始,高剂量组体重与对照组差异有统计学意义(P<0.05)。中、高剂量组肝脏重量和肝脏系数与对照组相比,均显著升高(P<0.05)。低剂量组大鼠肝脏SOD和GSH-Px活性与对照组相比显著升高(P<0.05);中、高剂量组大鼠肝脏MDA含量是对照组2.5倍和3.5倍(P<0.05)。低、中、高剂量组PPARα及其所调控的CYP4A1基因mRNA表达水平均被显著诱导升高。低、中、高剂量组PPARα蛋白表达均上调(P<0.05)。结论 PFOA暴露可导致大鼠肝脏氧化应激,从而引起SOD和GSH-Px以及MDA的变化。同时,PFOA暴露可诱导大鼠肝脏的PPARα、CYP4A1基因表达上调,可增强脂肪酸β氧化,从而导致脂质过氧化产生,对大鼠肝脏有明显的毒性作用。

过氧化物酶体增殖物激活受体α基因在全氟辛酸致大鼠肝BRL-3A细胞氧化损伤中的作用

目的通过抑制和激活基因表达的方式,研究过氧化物酶体增殖物激活受体α基因(PPARα)在全氟辛酸(PFOA)致大鼠肝BRL-3A细胞氧化损伤中的作用。方法体外培养大鼠肝BRL-3A细胞,分为空白对照组(NC)、PFOA实验对照组、PPARα抑制剂组(GW6471)、PPARα激动剂组(WY14643)、PPARα抑制剂预处理PFOA组(GW6471+PFOA)、PPARα激动剂预处理PFOA组(WY14643+PFOA)。荧光免疫细胞化学检测法检测基因抑制和激动表达情况;自由基指示剂H2DCFDA检测活性氧(ROS)含量;q PCR检测PPARα及其下游基因Cyp4a1的表达;Western blot检测PPARα蛋白表达水平。结果通过抑制剂和激动剂成功抑制和激动了PPARα在大鼠肝BRL-3A细胞中的表达。GW6471+PFOA组与空白对照组、PFOA实验对照组比较,细胞内ROS含量显著升高(P<0.05);WY14643+PFOA组与空白对照组、PFOA实验对照组相比,ROS含量明显下降(P<0.05)。PPARα及其下游基因Cyp4a1在GW6471+PFOA组中的表达比PPARα抑制剂组高,但相较PFOA实验对照组明显降低(P<0.05)。WY14643+PFOA组相关基因的表达虽然低于PPARα激动剂组,但显著高于PFOA实验对照组(P<0.05)。GW6471+PFOA组中PPARα蛋白的表达水平较抑制剂组有所上调,但与空白对照组相比差异无统计学意义。WY14643+PFOA组中PPARα蛋白的表达水平与激动剂组比差异无统计学意义,但却显著高于PFOA实验对照组(P<0.05)。结论 PFOA的暴露可以激活PPARα的表达,减轻细胞内ROS的累积,PPARα在PFOA导致的大鼠肝脏细胞氧化损伤中起到了一定的保护作用。