小麦梭条斑花叶病毒(WSSMV)和小麦黄花叶病毒(WYMV)的细胞质内含体的电镜观察

小麦梭条斑花叶病毒(WSSMV)和小麦黄花叶病毒(WYMV)分别感染小麦(Triticum aestivum L.)后所诱发的细胞质内含体和细胞嚣病变几乎完全相同。感病的叶肉细胞、表皮细胞和木质部薄壁细胞的细胞质中都可看到大量风轮体、柱状体、板状集结体和膜状体,其中以叶肉细胞中更为普遍。风轮体成群出现、同一组内风轮体常平行排列,而相邻群间常垂直排列。膜状体的内部常夹杂着许多小囊泡,其四周与内质网呈辐射状相连。在发病初期的心叶叶肉细胞质的液泡附近可看到颗粒状病毒束,而分散的病毒状颗粒则多见于发病中后期坏死的细胞中。感病细胞的叶绿体、线粒体、核、质膜及胞间联丝中均未见病毒状颗粒。感染病毒的细胞中,细胞质丰富、内质网膨大,核糖体增加、小囊泡大量出现,随着病害的加重,叶绿体、线粒体逐渐肿大,基粒缩小、膜破裂、类囊物流入细胞中。

禾谷多粘菌休眠孢子的简易提取方法

简化了的禾谷多粘菌(Polymyxa graminis Ledingham)休眠孢子提取方法为:洗净干燥麦根,经高速粉碎机粉碎,称1g浸泡于15ml 1％偏磷酸钠和0.25％吐温20的混合提取液中,4℃下过夜。在强度为1000KHz的超声波发生器上处理45min,过滤,在血球计数板上计0.03mm^3的体眠孢子数。此提取法省去了组织捣碎机捣碎和低速离心等程序,因此工效比原方法提高3倍以上。比较了简化与不简化2种方法提取不同大麦品种根部所得的孢子数量,探讨了样品放置在超声波发生器上不同部位对休眠孢子提取效果的影响。

玉米多堆柄锈菌的生物学特性

根据症状和夏孢子形状、大小和颜色等 ,将浙江省淳安县等地近年来流行的玉米锈病鉴定为由多堆柄锈菌 (PucciniapolysoraUnderw)引起的玉米多堆锈病。该菌夏孢子发芽最适温度为 2 6℃ ;夏孢子发芽还必须有水滴和空气。有自然光时夏孢子发芽率最高 ,其次为黑色和蓝色光 ,而黄、红、绿色光发芽最少。在适宜条件下 ,夏孢子经 7h发芽率达最高。夏孢子存活期 ,在 - 15℃时不到 5d ,12～ 2 0℃时鲜病叶为 10d ,风干病为 15～ 30d。喷雾毛笔刷、手指涂孢子悬浮液和手指擦干孢子粉 4种接种方法的发病率、病情指数均相似。玉米苗期到乳熟期接种的发病率可达 98%～ 10 0 % 。

大麦黄花叶病毒机械接种的条件及汁液稳定性的测定

本文探讨了提高大麦黄花叶病毒机械接种发病率有关的条件和因素,试验结果表明以0.1M pH7.0磷酸盐缓冲液(含DIECA)1～5倍量,用新鲜或短期冰冻贮存的病株为接种毒源,接种于不完全叶麦苗,在18～20℃,每天光照(50001x以上)10～12h的条件卜,株发病率可达90％。本方法可试用于大麦品种抗黄花叶病的鉴定。同时用机械接种法测定病毒粗汁液的钝化温度为55～60℃,10min,稀释终点为10^(-3),体外保毒期(20℃)约2天。

苏云金杆菌和胰蛋白酶抑制剂基因工程研究的进展

基因工程又称基因重组或基因操作,是生物技术领域里一个重要的方面。所谓基因工程是将某种生物的基因,连接到另一种生物的DNA中,使之重新组建。转化体能表达新的性状特性,并能遗传。其主要环节有:1.从基因供体分离目的基因;2.

真菌传植物病毒的种类和主要特征

真菌传植物病毒的种类和主要特征阮义理（浙江省农业科学院病毒实验室杭州３１００２１）真菌传植物病毒的研究是当今植物病毒领域内的一个热门，国外有数家著名的实验室正在进行深入的探讨［１、２］。近年来真菌传植物病毒的危害显著加重，新的病毒种类不断被发现，已成...

我国大麦黄花叶病毒主要分离物对大麦品种致病性的研究

大麦黄花叶病是我国长江中下游和东部沿海大麦的重要病害,造成严重减产。我们以往初步研究认为,我国各地大麦黄花叶病毒对大麦品种的致病性存在差异。近年日本和西欧等报道,本病毒具有不同株系。为了探明我国该病毒致病性的分化,进行本研究,现将结果报道于后。一。

应用酶联免疫吸附分析法评价大麦品种对黄花叶病毒的抗性

选用国内外大麦种质资源384份，分别种植于上海、江苏和浙江三省市的3个病圃中。用F（ab’）2－ELISA检测带毒情况，并进行田间发病率调查。结果有364份大麦品种经血清学检测与田间发病相符，发病轻重与植株内病毒含量基本一致。另有20份大麦品种经检测为阳性，但田间未查到明显病株，为隐症带毒。

我国禾谷多粘菌地理分布和生理分化研究

调查我国２６ 个省、市、自治区，９３ 个县市，１８３ 个取样点，１ ３７３ 个大、小麦根样本。根据休眠孢子出现频率（有休眠孢子样本数／总样本数）和每克麦根休眠孢子数，将我国禾谷多粘菌的分布区分为３ 个，多菌区包括江、浙、沪、皖、赣、湘、鄂和鲁的大部分和川、陕小部分，冀个别地区；少菌区包括豫大部和晋、甘小部或个别地区；其余地区为无菌区。分布区主要在长江、黄河和淮河中下游流域。禾谷多粘菌的分布范围比大麦黄花叶病等 ３ 种病毒病的分布更广泛。

浙、苏、沪的大麦黄花叶病毒对日、英、德部分大麦抗病品种的致病性研究

我国大麦黄花叶病以浙江、江苏和上海3个省市为重。为了探明这3个省市的大麦黄花叶病毒对来自日本、英国和德国的部分大麦抗黄花叶病品种的致病性,于1990—1993年进行了本研究。材料和方法供试日本抗病品种31个,英国和德国抗病品种26个,分别在浙江省嘉善、宁波、浦江、江苏省盐城和上海市等5个病圃(分离物),进行了自然诱发测定,于发病盛期调查株发病率和严重度,并用血清ELISA法检测品种感病情况。发病级别:无症状,且血清检测为阴性的品种为免疫(Ⅰ),株发病率【5.0％为高抗(HR),株发病率】5.1％

大麦品种对禾谷多粘菌的抗性

1989～1994年在浙江省嘉善、宁波和浦江，江苏省盐城和上海市等5地大麦黄花叶病重病田，用休眠孢子定量法评价399价大麦品种对禾谷多粘菌的抗性。结果免疫和高抗品种0份，抗64份，中抗到高感335份。大麦不同品种对禾谷多粘菌的抗性，有极显著差异，孢子数相差近14倍。抗大麦黄花叶病的品种数远多于抗禾谷多粘菌的品种数。在抗禾谷多粘菌的品种中，仅不到半数品种高抗大麦黄花叶病。经统计分析，大麦品种间抗禾谷多粘菌与抗病毒无相关性。

国外大麦抗黄花叶病育种

大麦黄花叶病(BaYMV)是我国长江中下游及东部沿海地区大麦最重要的病害之一。在日本和联邦德国此病发生危害也十分严重,日本自50年代开始,黄花叶病在二棱大麦栽培区迅速蔓延,70年危害明显加重,在二棱大麦面积占全日本一半的九州发病尤烈。目前病田面积占二棱大麦面积的30％以上,成为日本啤酒大麦生产上危害最大的病害。70年代BaYMV给联邦德国冬大麦生产造成严重损失,产量明显降低。1980年黄花叶病首次在英国流行,目前英国凡种植冬大麦的地区均有此病。另外,民主德国、法国、比利时和芬兰等国均有此病发生。

农作物抗除草剂育种的进展

由于大规模连续使用除草剂,出现了农田杂草对除草剂的抗性,已知抗阿特拉津的杂草有苋属、藜属、狗尾草属、蓼属、龙葵、繁缕和马唐等近30种;抗2,4-D的植物有拟南芥菜、胡萝卜等;抗百草枯的杂草有飞蓬、加拿大飞蓬和早熟禾等;抗西玛津的杂草有毛线稷、早熟禾和欧洲狗舌草等。已知各国有27属41种杂草和作物抗除草剂,63属87种杂草或作物耐除草剂(Jensen等,1982)。为防治抗性杂草,就要提高除草剂的使用浓度,增加其用量。但作物对除草剂的耐受性或抗性却没有改变,这样就易产生药害。因此育成抗除草剂的作物新品种,已成为育种工作者们一个新的课题。

传播植物病毒的真菌

传播植物病毒的真菌浙江省农业科学院阮义理传播植物病毒的真菌称介体真菌。由真菌传播的植物病毒约３０种，属于马铃薯Ｙ病毒科，大麦黄花叶病毒属的有大麦黄花叶病毒（ＢａＹＭＶ）、大麦和性花叶病毒（ＢａＭＭＶ）、小麦黄花叶病毒（ＷＹＭＶ）或小麦梭条斑花叶病毒（...

小麦梭条斑花叶病毒(WSSMV)提纯、粒子性质和血清学

采用冰冻患病小麦叶片,经0.5M磷酸钾缓冲液pH7.0抽提,1/4体积四氯化碳澄清,6%聚乙二醇,3%NaCl和1%Triton X—100沉淀,二次差速离心(含20%蔗糖垫,0.3%Triton X—100).一次10—50%蔗糖密度梯度离心,最后经一次超速离心浓缩,成功地获得部分提纯制剂。经电镜观察,可见大量线状病毒粒子,很少有杂质。病毒粒子在中性条件下稳定,在酸性条件下变形。病毒粒子直径13—14nm.长度250—1800nm,其中在300—400nm,550—700nm之间具有二个主要分布峰。经紫外读数,病毒制剂表现为典型的核蛋白吸收特性.其中OD260/OD244为1.19,OD260/OD280为1.29。病毒粒子外壳蛋白有二个组分,分子量分别约为30kd和27kd。在免疫电镜实验中,小麦梭条斑花叶病毒(WSSMV)和小麦黄花叶病毒(WYMV)抗血清不仅均能显著而有效地捕获汁液中的WSSMV粒子,而且还可在粒子外面包上一层厚厚的抗血清外套。

胶体金免疫电镜技术检测和鉴定病汁液中不同形态的植物病毒

本文报道胶体金免疫电镜技术的建立:铜网捕获病毒后,用其稀释约200倍的同源抗血清修饰处理3～5分钟,羊抗兔IgG-金复合物标记3～5分钟,经磷钨酸负染,电镜下可见病毒粒子周围金颗粒特异性吸附,而背景上非特异性吸附很少。用此技术成功地快速检测和鉴定了病汁液中线状病毒(大麦黄花叶病毒,大麦温和花叶病毒,小麦梭条斑花叶病毒,芜菁花叶病连和马铃薯Y病毒)、棒状病毒(烟草花叶病毒、长叶车前草花叶病毒和土传小麦花叶病毒)以及球状病毒(水稻矮缩病毒、黄瓜花叶病毒和大麦黄矮病毒)。用0.5M PBSpH7.0制备病汁液,可大幅度提高同源抗血清对黄瓜花叶病毒的捕获能力。

应用免疫吸附电镜技术研究三种真菌传线状病毒的血清学关系

应用免疫吸附电镜技术研究了我国大、小麦上三种由禾谷多粘菌Polymyxagraminis传线状病毒,即大麦黄花叶病毒(BaYMV)、小麦黄花叶病毒(WYMV)和小麦梭条斑花叶病毒(WSSMV)分离物的血清学关系,结果表明这三种病毒具有共同的抗原性,尤其是WYMV与WSSMV,它们的血清学性质几乎完全相同。我国的BaYMV-萧山(XSh)、嘉善(JSh)、上海(ShH)、扬州(YZh)、盐城(YCh)和常熟(ChSh)6个分离物,均能与日本BaYMV标准分离物(BaYMV-J)的抗血清以及欧洲的So、Wiltshire(W)、NM株系抗血清起反应,表明属欧洲所划分的BaYMV血清型Ⅰ。WSSMV的新昌(XCh)、安吉(AJ)、宜兴(YX)、扬州(YZh)和雅安(YA)6个分离物的血清学性质一致,均能与加拿大和美国的WSSMV抗血清以及日本WYMV抗血清发生反应。讨论了抗血清中甘油的存在对免疫吸附电镜检测结果的影响。

大麦黄花叶病毒(BaYMV)的提纯

本文提出了一个改进了的大麦黄花叶病毒提纯方法。病大麦叶片在高浓度(0.5M)磷酸钾缓冲液pH7.0(内含0.1%ME,0.01M EDTA)中匀浆,经1/4体积四氯化碳澄清后,病汁液用6%PEG,3%NaCl和1%TritonX-100混合物沉淀,高浓度(0.5M)同种缓冲液(含0.5M尿素,0.1%ME和0.01M EDTA)悬浮,接着进行20%蔗糖垫(含0.3%Triton X-100)超迷离心去除寄主细胞成分,10—40%蔗糖密度梯度离心进一步纯化。所获得的BaYMv提纯制剂A260/A280,A260/A240比值分别为1.20和1.04,纯病毒产量约为5.5—8.0mg/kg病叶。提纯病毒制剂在电镜下看不到有寄主杂质存在。