新城疫病毒—减蛋综合征病毒抗原液与抗原浓缩液的HA效价关系

采用Millipore CogentTM超滤系统对新城疫病毒抗原液和减蛋综合征病毒抗原液进行浓缩试验。结果显示,新城疫病毒浓缩抗原液的HA效价按浓缩比率相应上升,而超滤液的HA效价为阴性;减蛋综合征病毒浓缩病毒液的HA效价均比未浓缩病毒液相应增高,而超滤液的HA效价均为零。

人β2微球蛋白成熟肽基因克隆及其原核表达载体的构建

根据GenBank基因库中人β2微球蛋白(β2m)成熟肽基因序列设计2对引物,使用RT-PCR法从健康人血液中扩增人β2m成熟肽基因,扩增产物进行T-A克隆和测序.结果表明,获得的人β2m成熟肽基因为297 bp,与模板序列的同源性为100%.利用基因重组技术,将β2m成熟肽基因亚克隆入pET-28 a(+)载体中,经PCR、酶切和测序鉴定,证实所获重组表达质粒pET-28/Humβ2m中含有目的片段,且连接、构建正确,表明成功构建了重组表达质粒pET-28/Humβ2m.

鸭MHC-Ⅰα链胞外区成熟肽基因的克隆、序列分析及表达载体构建

【目的】克隆鸭MHC-Ⅰα链胞外区成熟肽基因cDNA序列,构建并鉴定其原核表达质粒pET/DuMHC-Ⅰ。【方法】依据GenBank/DDBJ/EMBL基因库中公布的鸭MHC-Ⅰ基因序列设计1对引物,采用RT-PCR技术从鸳鸯鸭脾脏组织中扩增MHC-Ⅰα链胞外区成熟肽基因cDNA,T-A克隆到pGEM-T Easy载体中,并进行测序。通过PCR和酶切的方法,将鸭MHC-Ⅰα链胞外区成熟肽基因亚克隆入pET-28a(+)载体,构建重组表达质粒pET/Du MHC-Ⅰ,并进行PCR、NcoⅠ和NotⅠ双酶切及测序鉴定。【结果】测序结果表明,获得了MHC-Ⅰα链胞外区成熟肽基因,其长度为813 bp,编码271个氨基酸。MHC-Ⅰα链胞外区成熟肽基因与GenBank中登录的鸭MHC-Ⅰα链胞外区成熟肽基因序列的同源性为89.4%~91.7%,氨基酸同源性为78.2%~83.7%;与鸡、鹅、鹌鹑、草鱼、狗、猪、鼠和人的MHC-Ⅰα链胞外区成熟肽氨基酸序列的同源性分别为64.6%,79.3%,59.4%,41.0%,26.6%,45.0%,12.5%和22.1%,这表明MHC-Ⅰα链胞外区成熟肽基因存在着种属多样性,且...

白来航鸡MHC-Ⅰ重链基因克隆与序列分析

参照GenBank发表的鸡MHC-Ⅰ重链（BF2）基因序列,设计并合成1对引物,无菌采取纯系来航SPF鸡抗凝静脉血,直接提取总RNA,采用RT-PCR技术,PCR扩增BF2基因,并进行克隆和序列测定。测序结果表明,获得了来航鸡BF2基因,其大小为1 035 bp,包含一个完整阅读框,共编码345个氨基酸。与GenBank上鸡BF2基因序列进行比较,其核苷酸同源性在93.0%~97.6%之间,氨基酸同源性在83.2%~97.1%之间。来航鸡与人和其他种动物的MHC-Ⅰ重链基因核苷酸同源性在12.9%~83.6%之间。

鸳鸯鸭MHC-Ⅰα链基因的克隆与分子进化分析

根据GenBank中登录（登录号：AB115244）的鸭MHC-Ⅰα链序列设计并合成1对引物,采用RT-PCR技术从鸳鸯鸭脾脏组织中克隆出鸳鸯鸭MHC-Ⅰα链基因,并进行T-A克隆和序列测定。结果表明,所获得的鸳鸯鸭MHC-Ⅰα链基因长909bp,编码303个氨基酸的多肽,含一个完整的鸳鸯鸭MHC-Ⅰα链胞外区成熟肽基因。序列比较发现,鸳鸯鸭MHC-Ⅰα链基因与GenBank登录的其它品种的鸭MHC-Ⅰα链核苷酸同源性为89.4%～91.0%,与人和其他动物的MHC-Ⅰα链胞外区成熟肽基因的氨基酸同源性为11.1%～79.3%,表明MHC-Ⅰα链胞外区成熟肽基因存在着种的多样性,且亲缘关系越近,同源性越高。鸳鸯鸭MHC-Ⅰα链胞外区成熟肽基因的成功克隆为进一步研究鸭MHC-Ⅰ基因表达、生物学活性和应用奠定基础。

金银花提取物的体外抑菌试验

分别用药敏片法、管碟法测定金银花的黄酮类、绿原酸类提取物对供试菌种的抑菌效果.结果表明：金银花黄酮类、绿原酸类提取物对鸭巴氏杆菌、猪链球菌抑菌效果明显,对猪沙门氏菌抑菌效果次之.

河南省畜间狂犬病防控现状与对策

据统计,截止2018年1月河南省共有犬581.8547万条,免疫犬270.6008万条,免疫率为46%。由于狂犬病疫苗免疫没有纳入政府强制性免疫种类,犬类免疫主要在动物医院和宠物医院。2017年河南省狂犬病畜间发病48只,主要集中在4个县的22个村,48只犬全部进行了处理,较2016年畜间发病死亡的87只同比下降44%。

鸡场参考免疫程序及免疫失败原因分析

鸡场免疫程序是指鸡场根据本地区、本场疫病发生情况(疫病流行种类、季节、易感日龄)、疫苗性质(疫苗的种类、免疫方法、免疫期)和其他情况制定适合本场的科学的免疫计划,称作免疫程序。没有一个免疫程序是通用的,而生搬硬套别人现成的程序也不一定能获得最佳的免疫效果,唯一的办法是根据本场的实际情况,参考别人已成功的经验,结合免疫学的基本理论,制定适合本地或本场的免疫程序。现将自己多年积累鸡场免疫经验总结如下.

鸡新城疫-传染性支气管炎-减蛋综合征三联油乳剂灭活苗免疫抗体消长规律的测定

将120日龄的蛋鸡分为5组，每组10只。第1组，皮下注射新支减三联油乳剂灭活苗0．5ml／只；第2、3、4组，分别皮下注射ND油乳剂灭活苗、IBM41株油乳剂灭活苗、EDS76油乳剂灭活苗，0．5ml／只；第5组，不注射疫苗作为试验对照组。用血凝抑制方法检测ND抗体、IB抗体、EDS76抗体。结果证明：ND免疫联苗组与免疫单苗组，在14d至77d抗体差异不显著（P〉0．05），在77d至119d抗体差异组不显著（P〉0．05）或抗体差异组显著（P〈0．05）。免疫联苗组与空白对照组的抗体差异极显著（P〈0．01）；IBM41株免疫联苗组与免疫单苗组的抗体差异不显著（P〉0．05），免疫联苗组与空白对照组的抗体差异极显著（P〈0．01）；免疫联苗组与空白对照组的抗体差异极显著（P〈0．01）；EDS76免疫联苗组与免疫单苗组的抗体差异不显著（P〉0．05），免疫联苗组与空白对照组的抗体差异极显著（P〈0．01）。

鸡传染性支气管炎病毒M41株、HN99株免疫交叉保护试验

将试验鸡分为免疫组和对照组，分别用IBV M41、HN99株等毒株滴鼻、气管内注入、点眼等途径攻毒，每种病毒各攻毒10只，攻毒剂量为10 5.0 EID50。同时从对照组取10只，同时攻毒。结果表明，M41株乳化抗原免疫组能够对M41株和Hb株攻毒提供保护、HN99株乳化抗原免疫组能够对HN99株攻击提供保护，而M41株＋HN99株联合乳化抗原免疫组能够对M41株和HN99株、Hb株的攻毒提供100％保护，对照组发病。

鸡传染性支气管炎病毒M41株和Conn株的血清交叉血凝抑制试验

本试验用系统血凝抑制(HI)交叉试验,对鸡传染性支气管炎病毒M41株和Conn株进行抗体区分。结果表明,M41株和Conn株标准抗原与M41阳性血清HI抗体效价在免疫后21d分别为8log2、5log2,相差3log2;免疫后28d分别为8log2、5log2,相差3log2;免疫后35d分别为8log2、5log2,相差3log2。M41株和Conn株标准抗原与Conn阳性血清HI抗体效价在免疫后21d分别为4log2、8log2,相差4;免疫后28d分别为4log2、8log2,相差4log2;免疫后35d分别为4log2、9log2,相差5log2。因此,用血清HI交叉试验能够将抗M41株和Conn株抗体区分开来。

新城疫-传染性支气管炎-减蛋综合征三联灭活油乳剂疫苗的攻毒保护试验

用新支减三联灭活油乳剂疫苗皮下注射健康鸡，免疫3周后，分别用NDVF48E9株、IBVM41株、EDSVHE02株进行攻毒，检验新支减三联灭活油乳剂疫苗的免疫保护能力。结果显示，免疫组的攻毒保护率为：新城疫100％保护，传染性支气管炎书0％保护，减蛋综合征90％保护；对照组攻毒保护率为：新城疫0％保护，传染性支气管炎20％保护，减蛋综合征20％保护。

兔Musclin基因片段克隆与序列分析

依据大鼠的musclin基因序列(NM_207612)和牛电子克隆的osteocrin基因序列(XM_588390)设计的引物,成功克隆了兔Muslin基因。克隆的兔musclin基因包含一个完整的开放阅读框架,其全长为409bp,编码有132个氨基酸。克隆的Musclin基因与小鼠、大鼠、人、猪和鸡的同源性分别为78.2%、79%、87.9%、98.2%和46.7%,推测的氨基酸序列同源性分别为73.1%、74.2%、87.9%、96.2%和56.8%,氨基酸序列含有"KKKR"结构和与小鼠ANP,BNP,CNP蛋白的同源性区域。试验克隆的兔Musclin基因注册于Gen Bank(EF547185)。

一起断奶仔猪急性死亡病例的调查

2016年4月，开封市某养猪企业新购断奶仔猪猪群发病，呈高发病率、高死亡率的特点，仔猪出现呼吸困难、共济失调、食欲减退、精神萎靡、嗜睡、皮肤有出血点、耳紫和腹部皮肤发绀等症状。经过治疗后未控制病情。该试验对引起此次断奶仔猪突然死亡的原因进行流行病学调查和实验室诊断。

一例高致病性蓝耳病的诊断及其综合防控建议

2016年4月，开封市北郊一猪场于半月前从外省购入380多头土猪，购入半月以来陆续有230多头猪发病，其中113头死亡，通过临床症状、病理变化和实验室诊断，最终确诊为高致病性蓝耳病。

感染巴氏杆菌的兔蚓突、圆小囊组织病理学观察

试验应用常规石蜡切片，HE染色，对感染兔多杀性巴氏杆菌的蚓突、圆小囊这两个兔所特有的肠道淋巴组织进行组织病理学观察。结果表明：蚓突的病变主要在黏膜层，黏膜上皮细胞脱落、淋巴细胞增生、固有层毛细血管充血、肠腺内有细胞分化增生；间区内血管充血。圆小囊的病变主要也是在黏膜层，黏膜上皮细胞脱落、淋巴细胞增生、固有层毛细血管充血严重、肠腺大量增生、肠腺内有细胞分化增生；间区内血管充血。这些病变对研究兔巴氏杆菌病有重要意义。

一起人炭疽事件引发的畜间流行病学调查

2023年7月26日,河南省某县卫健委通报马某等3人被确诊为皮肤炭疽,3人系亲属关系,从事牛羊养殖、屠宰、加工和销售工作。为调查疫病传染源、传播途径,降低畜间疫情发生和公共卫生风险,重点对病例关联的某养殖专业合作社马某肉牛养殖场、马某牛羊屠宰点和老马本地牛羊肉店开展了紧急流行病学调查。调查发现:病原随省外引进肉牛传入的可能性较小,马某等人通过宰杀带菌肉牛感染,并通过人员或生产资料将病原传入牛场的可能性较大,当前及近一段时间内当地发生人间和畜间炭疽的风险较低,但病原对当地牛羊养殖和公共卫生的潜在风险不容忽视。建议当地加大动物防疫相关政策宣传力度,普及炭疽等人兽共患病防控知识,切实做好炭疽等人兽共患病防控工作,防范疫情再次发生。