目的探讨内源性多肽ECDP4在人外周血单核细胞(PBMCs)和子宫内膜癌Ishikawa细胞共培养体系下对PBMCs中T淋巴细胞亚群比例的影响。方法收集2020年9月至2020年11月手术切除的3例子宫内膜癌和3例配对正常子宫内膜组织标本。使用在线数据库Un...目的探讨内源性多肽ECDP4在人外周血单核细胞(PBMCs)和子宫内膜癌Ishikawa细胞共培养体系下对PBMCs中T淋巴细胞亚群比例的影响。方法收集2020年9月至2020年11月手术切除的3例子宫内膜癌和3例配对正常子宫内膜组织标本。使用在线数据库UniProt、ProteomicsDB、MaxQB、UniProt和The Human Protein Atlas分析多肽ECDP4的前体蛋白及其生物学功能。建立人子宫内膜癌Ishikawa细胞株和新鲜人PBMCs共培养模型,分为对照组(含5%胎牛血清培养基)和实验组(含5%胎牛血清培养基中加100 ng/L内源性多肽ECDP4),共培养96 h,收集PBMCs。用流式细胞术分析PBMCs中淋巴细胞亚群比例变化。结果在正常子宫内膜组织中,ECDP4表达量为7.33×10-4±1.13×10-4,而在子宫内膜癌组织中表达量为7.30×10^(-5)±8.47×10^(-6)(P=0.0016)。生物信息学分析显示,NOVA2是ECDP4的前体蛋白,但其并不是子宫内膜癌的预后因素。流式细胞术检测显示,相较于单纯培养PBMCs,共培养体系中CD4^(+)T淋巴细胞比例下调(51.31±11.05)%(P<0.001),CD8^(+)T淋巴细胞比例下调(52.98±5.86)%(P<0.001)。相较于对照组,在共培养体系中加入ECDP4后,CD4^(+)T淋巴细胞比例上调(15.58±2.34)%(P<0.001),Ki-67的比例上调(54.60±24.5)%(P=0.0043),干扰素γ(INF-γ)的比例上调(27.92±17.25)%(P=0.0486);CD8^(+)T淋巴细胞比例上调(20.04±6.70)%(P<0.001),Ki-67的比例上调(26.57±6.42)%(P<0.001),INF-γ比例上调(87.48±40.70)%(P=0.01)。结论多肽ECDP4作为NOVA2的降解产物在子宫内膜癌中显著低表达,其能够增加PBMCs中CD4^(+)T淋巴细胞及CD8^(+)T淋巴细胞的比例,促进CD4^(+)及CD8^(+)T淋巴细胞的增殖作用,同时增加INF-γ的分泌量。内源性多肽ECDP4具有进一步应用于临床研究的价值。展开更多
文摘目的探讨内源性多肽ECDP4在人外周血单核细胞(PBMCs)和子宫内膜癌Ishikawa细胞共培养体系下对PBMCs中T淋巴细胞亚群比例的影响。方法收集2020年9月至2020年11月手术切除的3例子宫内膜癌和3例配对正常子宫内膜组织标本。使用在线数据库UniProt、ProteomicsDB、MaxQB、UniProt和The Human Protein Atlas分析多肽ECDP4的前体蛋白及其生物学功能。建立人子宫内膜癌Ishikawa细胞株和新鲜人PBMCs共培养模型,分为对照组(含5%胎牛血清培养基)和实验组(含5%胎牛血清培养基中加100 ng/L内源性多肽ECDP4),共培养96 h,收集PBMCs。用流式细胞术分析PBMCs中淋巴细胞亚群比例变化。结果在正常子宫内膜组织中,ECDP4表达量为7.33×10-4±1.13×10-4,而在子宫内膜癌组织中表达量为7.30×10^(-5)±8.47×10^(-6)(P=0.0016)。生物信息学分析显示,NOVA2是ECDP4的前体蛋白,但其并不是子宫内膜癌的预后因素。流式细胞术检测显示,相较于单纯培养PBMCs,共培养体系中CD4^(+)T淋巴细胞比例下调(51.31±11.05)%(P<0.001),CD8^(+)T淋巴细胞比例下调(52.98±5.86)%(P<0.001)。相较于对照组,在共培养体系中加入ECDP4后,CD4^(+)T淋巴细胞比例上调(15.58±2.34)%(P<0.001),Ki-67的比例上调(54.60±24.5)%(P=0.0043),干扰素γ(INF-γ)的比例上调(27.92±17.25)%(P=0.0486);CD8^(+)T淋巴细胞比例上调(20.04±6.70)%(P<0.001),Ki-67的比例上调(26.57±6.42)%(P<0.001),INF-γ比例上调(87.48±40.70)%(P=0.01)。结论多肽ECDP4作为NOVA2的降解产物在子宫内膜癌中显著低表达,其能够增加PBMCs中CD4^(+)T淋巴细胞及CD8^(+)T淋巴细胞的比例,促进CD4^(+)及CD8^(+)T淋巴细胞的增殖作用,同时增加INF-γ的分泌量。内源性多肽ECDP4具有进一步应用于临床研究的价值。