Vater乳头新分型应用于ERCP针刀瘘管切开术的研究进展

经内镜逆行胰胆管造影术(Endoscopic Retrograde Cholangiopancretography, ERCP)的成功有赖于选择性胆管插管(Selective Biliary Cannulation, SBC),而SBC是ERCP最重要的步骤。然而,进入胆道系统的传统技术可能在5%~35%的病例中失败。因此,在接受ERCP的患者中,需要更先进的插管技术。

循环肿瘤细胞与循环肿瘤DNA在肝细胞癌中的研究进展

肝细胞癌(HCC)是我国最常见且致死率非常高的恶性肿瘤之一,在全球癌症致死病因中排名第三位,每年导致超60万人死亡。肝细胞癌复发率高且缺乏有效的检测方式,还受到治疗方式的局限性影响,约有82.4%的患者会在罹患肝细胞癌之后的5年内死亡。液体活检技术的进步给肝癌早期发现、治疗并提高生存率带来了希望;新分子技术的不断发展进步使得HCC循环肿瘤细胞(CTCs)与循环肿瘤DNA(ctDNA)的检测变得更加高效、准确。基于此,本文对CTCs和ctDNA的发现及其在肝细胞癌研究中取得的进展、潜在的临床价值等进行了综述。

原发性肝癌消融治疗的现状

肝细胞癌大多由慢性病毒性肝炎发展而来,其治疗方式主要以手术切除为主。本综述查阅国内外文献,归纳总结常见的消融方法及研究进展,为肝癌患者手术方式的选择提供参考。

胰腺癌诊断及治疗的研究进展

胰腺癌由于胰腺特殊的解剖位置及本身生物学特性,加上缺乏典型的临床表现和有效的诊断方法,大多数胰腺癌患者确诊时已是晚期,手术切除率低,治疗效果差,80%以上胰腺癌患者发现时即为晚期,失去了有效的手术切除机会,预后极差。本文我们通过回顾胰腺癌的诊疗现状,重点综述其当前诊疗方法和治疗手段,并对胰腺癌当前诊疗面临的挑战和未来研究趋势进行更进一步的探讨。

影像融合成像技术在结直肠癌肝转移微波消融治疗中的应用进展

肝脏作为结直肠癌最常见的远处转移器官,而结直肠癌肝转移是结直肠癌患者最常见的死亡原因之一。近年来,影像学引导下的微波消融术常被用来治疗结直肠癌肝转移。目前,术中引导结直肠癌肝转移微波消融最主要的影像学手段为常规超声,但由于常规超声空间分辨率和穿透力较低,易受气体干扰,在引导消融方面存在局限性。影像融合成像技术通过将多种图像实时融合,在引导结直肠癌肝转移微波消融治疗中对比单一影像学手段具有较大的优势。

CT三维重建在肝胆外科的应用现状

随着影像技术的发展,CT三维重建技术已广泛应用于肝胆外科的临床实践中。CT三维重建能够将二维图像进行分割重建形成三维投影图像,可清晰地显示病灶位置与肝内管道系统之间的关系,对术前评估肝体积,制订诊疗决策,术中精准操作及术后个体化管理等具有重要价值,推进了肝胆外科和微创技术不断发展,在临床应用上显示出了极大的前景。

泡型肝包虫病患者血清炎症因子的抗体芯片检测及分析

目的应用抗体芯片技术检测并分析泡型肝包虫病患者血清中炎症因子的表达及临床意义。方法选取泡型肝包虫病患者与健康对照组血清标本各3份,利用抗体芯片技术检测血清样品中炎症因子的水平,采用AAH-INF-G3数据分析软件进行分析。结果与对照组比较,泡型肝包虫病患者血清中多种炎症细胞因子(CSF-2/3、IL-1α、IL-2、IL-6、IL-8、IL-12p70、IL-13、IL-15、IL-17A、MCP-1/2、MIG、IFN-γ、TNF-α/β、TGF-β)表达水平发生显著变化(Fold change>2,<0.5;信号值>400)。其中IL-1α、IFN-γ、TNF-α/β等细胞因子升高(2倍以上),IL-12p70、MCP-2等细胞因子下降(3倍以上)。结论免疫调节相关炎症因子可能参与泡型肝包虫病慢性炎症反应,可能是揭示泡型肝包虫病免疫逃逸机制的重要切入点。

硫化氢对MDA及GSH在大鼠肝星状细胞氧应激中表达的影响

目的:探讨硫化氢对MDA与GSH在大鼠肝星状细胞氧应激中表达的影响.方法:将HSC-T6分为8组:空白组(B组,HSC-T6)、对照组(C组,B组+500μmol/LFe-NTA)、 NaHS组(N1:C组+20μmol/L NaHS;N2:C组+100μmol/L NaHS;N3:C组+200μmol/L NaHS)、格列苯脲组(G1:C组+20μmol/LGLBN;G2:C组+200μmol/LGLBN;G3:C组+700μmol/LGLBN).用MDA试剂盒测试血清MDA含量;用GSH试剂盒测定上清中GSH含量.结果:24h后MDA含量对照组和空白组有明显差异(P<0.05),而GSH含量12与24h均有明显差异(均P<0.05).给予 NaHS后,MDA含量24hN2和N3组与对照组均有明显差异(4.48±0.07nmol/mg prot,3.58±0.02nmol/mg prot vs 5.05±0.07nmol/mg prot,均P<0.05),12与24hGSH含量N2和N3组与对照组有明显差异(35.57±2.02mg/g prot,36.92±2.30mg/gprot vs 33.64±2.95mg/g prot;36.49±2.08mg/g prot,37.59±2.03mg/gprot vs 31.06±3.08mg/g prot,均P<0.05).给予GLBN处理后,各项指标结果与给予 NaHS处理后结果相对应,各组与相对应组比较均有明显差异(均P<0.05).结论:氧应激下硫化氢对HSC细胞具有保护作用,可抑制肝纤维化的发生发展.

硫化氢增加肝脏缺血再灌注损伤模型大鼠胰岛素样生长因子Ⅰ、核转录因子κB、肿瘤坏死因子α的表达

背景:硫化氢气体是一种新型气体信号分子,在生理浓度下具有抑制Ca2+内流、开放KATP通道功能,氧化还原等明确特定的作用。目的:观察硫化氢对大鼠肝脏缺血再灌注损伤胰岛素样生长因子Ⅰ、核转录因子κB及肿瘤坏死因子α表达水平的影响方法:70只SD大鼠随机等分为假手术组、缺血20min组,缺血20min+灌注2,4h组、硫氢化钠+缺血20min组、硫氢化钠+缺血20min再灌注2,4h组。除假手术组外,其余各组大鼠通过Pringle法建立大鼠全肝缺血再灌注模型,在术前5d中每天及术中向硫氢化钠+缺血20min组、硫氢化钠+缺血20min再灌注2,4h组,大鼠腹腔注射56μmol/kg硫氢化钠。结果与结论:肝脏缺血大鼠肝组织中胰岛素样生长因子Ⅰ、核转录因子κB和肿瘤坏死因子α表达明显下降(P<0.05),与缺血组比较,大鼠再灌注和腹腔注射硫化氢均能增加大鼠肝组织中胰岛素样生长因子Ⅰ、硫化氢、核转录因子κB和肿瘤坏死因子α的表达(P<0.05)。提示全肝缺血再灌注后可造成肝脏损伤,硫化氢增加肝脏缺血再灌注损伤模型大鼠胰岛素样生长因子Ⅰ、核转录因子κB、肿瘤坏死因子α的表达,肝脏损伤具有保护作用。

相关细胞因子的表达与肝泡型棘球蚴侵袭转移关系的研究

目的研究骨桥蛋白(OPN)和基质金属蛋白酶-2(MMP-2)在肝泡型棘球蚴(泡肝)组织中的表达,探讨OPN和MMP-2在泡肝侵袭转移中的作用。方法采用免疫组化SP法检测69例泡肝组织和12例正常肝组织(取自肝血管瘤手术切除的正常肝组织)中OPN与MMP-2的表达情况,并分析其表达与临床病理特征之间的关系。结果 OPN和MMP-2主要分布在泡肝囊泡壁周围肉芽肿炎症细胞和周边部分基质细胞及部分肝细胞中,其阳性表达程度以泡肝病灶与正常肝组织交界的浸润缘处最明显。泡肝组织中OPN、MMP-2阳性表达率72.5%(50/69)和59.4%(41/69),明显高于正常肝组织中的16.7%(2/12)和8.3%(1/12),差异有统计学意义(P<0.01);在发生转移的泡肝组织中OPN和MMP-2阳性表达率分别为86.8%(33/38)和76.3%(29/38),明显高于无转移的54.8%(17/31)和38.7%(12/31),差异有统计学意义(P<0.01)。OPN和MMP-2的阳性表达与泡肝患者的性别、年龄、民族、HBsAg状态、病灶大小等因素无关。OPN和MMP-2的表达呈显著正相关(r=0.36,P<0.01)。结论 OPN和MMP-2的表达可能与泡肝的侵袭转移有关。

肝包虫囊肿外囊切除的价值及术式选择

目的：分析肝包虫囊肿切除的价值及外囊手术实施的方式。方法回顾性分析我院收治的300例肝包虫病患者的手术资料，根据不同术式将患者分为保留带囊术组（41例）和带囊切除术组（259例）。结果外囊切除术患者术后原位复发率和残腔并发症发生率均低于保留外囊术组（P ＜0．01）。以肝切除技术为基础的外囊切除术组患者的出血量高于外膜内外囊切除术组（P ＜0．05）。结论肝包虫囊肿外囊切除可有效降低原位复发率和残腔并发症发生率，但手术的风险性与难度也随之增加。外囊切除手术选择外膜内外囊切除术安全、有效。

硫化氢在大鼠肝星状细胞氧应激中的作用

目的利用铁超载的方法在体外复制肝纤维化的氧应激模型,给予H2S供体硫氢化钠(NaHS)和内源性H2S作用的KATP通道阻滞剂格列苯脲(GLBN),论证氧应激下硫化氢对HSC细胞具有保护作用的假说。方法将HSC-T6分为8组:空白组、对照组、NaHS组(分为3个浓度组)、格列苯脲组(分为3个浓度组)。用CCK-8试剂盒测定HSC细胞增殖情况;用MDA试剂盒测定上清液MDA(丙二醛)含量;用SOD(超氧化物歧化酶)试剂盒测定上清液和裂解液中SOD活力;用RT-PCR试剂盒检测p38基因表达水平。结果1.Fe-NTA能够促进HSC的增殖,使p38基因表达水平降低、SOD活性降低、MDA浓度提高。对照组和空白组有明显差异(P<0.05);2.给予NaHS处理后,细胞增殖减慢,上清液中MDA含量下降,上清液、裂解液中SOD活性提高,p38基因表达水平增高(P<0.05);3.给予GLBN处理后,各项指标结果与给予NaHS处理后结果相对应,各组与对照组比较均有明显差异(P<0.05)。结论氧应激下硫化氢对HSC细胞具有保护作用,可抑制肝纤维化的发生发展。

肝包虫病不同术式术后胆汁瘘情况分析

包虫病是由属于棘球绦虫属的绦虫幼虫期引起的动物传染病。已知的棘球绦虫有6种,其中4种是人类疾病的主要原因：（1）细粒棘球绦虫（Echinococcus granulosus,Eg）;（2）多房棘球绦虫（Echinococcus multilocularis,Em）;（3）少节棘球绦虫（Echinococcus oligarthrus,Eo）;（4）福氏棘球绦虫（Echinococcus vogeli,Ev）.

泡球蚴感染青藏高原野生田鼠动物模型的建立

目的探索青藏高原野生田鼠是否可以作为泡球蚴感染的动物模型。方法将60只实验野生田鼠分为A组(皮下注射接种感染组)、B组(开腹肝穿刺注射感染组)、C组(经皮肝穿刺感染组),每组20只。感染3个月后观察各组大鼠的感染率、病死率。造模成功田鼠处死后分别从病灶浸润带、灶旁+50%病灶、病灶中心、液化部分、病灶边缘、病灶70%来进行HE染色,显微镜下观察包虫病灶的病理结构。从感染病灶中提取原头节,进行体外培养。计数资料比较采用χ~2检验。结果 A、B、C组田鼠泡球蚴感染的成功率分别为60%、80%、70%,3组比较差异无统计学意义(χ~2=4.138,P=0.126)。A、B、C组田鼠泡球蚴感染的病死率分别为5%、20%、15%,3组比较差异无统计学意义(χ~2=5.201,P=0.107)。将造模成功的田鼠病灶切片,从浸润带(灶旁2~3 mm)、灶旁+50%病灶、病灶中心(无液化部分)、液化部分、病灶边缘(不含正常组织)、病灶70%来进行HE染色,镜下可见被红染囊泡的角质层较薄、不连续,囊泡外可观察到大量炎性细胞浸润,所有切片中均未发现原头节。随后将病灶组织体外培养并染色,可发现大量存活原头节,不着色且有活动性。结论本研究证实高原野生田鼠作为青藏高原特有的物种,可以作为泡球蚴感染的动物模型,皮下接种感染泡球蚴是一种较合适的造模方法。

多房棘球蚴抗原蛋白TSP3抗原表位的生物信息学预测

目的预测多房棘球绦虫抗原蛋白TSP3的二级结构和优势抗原表位(T细胞和B细胞表位)。方法 Genbank获取TSP3的氨基酸序列后通过生物信息学软件SOPMA预测二级结构特征,进一步通过在线软件IEDB、SYFPEITHI、Bcepred和ABCpred预测TSP3的T细胞和B细胞表位。同时对TSP3的亲水性、柔韧性、抗原性及蛋白表面暴露区域的特征进行预测。结果无规则卷曲和β转角分别占TSP3蛋白质的二级结构的25.68%和4.05%,说明潜在优势抗原性表位存在。通过多种生物信息学方法分析出TSP3潜在的T细胞表位为T33-42、T45-55、T53-63、T68-77、T80-90、T92-104、T110-122、T134-144;TSP3潜在的B细胞表位为T18-33、T45-55、T53-63、T64-75、T80-90、T92-104、T110-122。结论 TSP3的二级结构特征显示潜在优势抗原性表位存在,预测出8种T细胞抗原表位和7种B细胞抗原表位,为后续表位疫苗的设计奠定了理论基础。

组合抗原金标渗滤快速诊断法对两型包虫病的诊断价值与评价

目的对比研究包虫病组合抗原金标渗滤（DIGFA）快速法对两型包虫病的诊断价值。方法手术和病理检查确诊的87例包虫病例，经DIGFA诊断的为实验组；经影像学诊断的为对照组；DIGFA并与同批病例中45例间接血凝试验（IHA）和42例酶联免疫吸附试验（ELISA）病例作对比研究。结果囊型包虫病中影像学确诊率为94．02％，DIGFA确诊率为79．10％，差异有统计学意义（P〈0．05）；泡型包虫病中DIGFA确诊率为95．00％，影像学确诊率为70．00％，差异有统计学意义（P〈0．05）；DIGFA总确诊率82．75％与IHA确诊率2．22％和ELISA确诊率16．67％之间差异均有统计学意义（P〈0．05）。结论DIGFA对泡型包虫病诊断更加有临床意义，影像学对囊型包虫病确诊率高，在血清学检查中DIGFA确诊率明显高于IHA和ELISA。DIGFA具有敏感性高、特异性好、且快速、操作简便的优点。

多房棘球蚴重组蛋白CTB-Emy162的原核表达及分离纯化

目的构建融合基因CTB-Emy162原核表达系统,纯化得到多房棘球蚴重组蛋白CTB-Emy162。方法根据多房棘球蚴抗原Emy162在Gen Bank中的序列,用生物信息学软件Optimum^(^(TM)) Codon优化密码子适应指数(CAI)、最优密码子频率(FOP)及GC含量从而获得适合大肠杆菌BL-21表达的Emy162基因序列。PCR扩增Emy162基因,定向在p ET-28a-CTB的CTB基因5'端插入Emy162基因。构建CTB和Emy162双基因原核表达质粒p ET28a-CTB-Emy162,将该质粒转化于E.coli BL-21(DE3)中,经IPTG诱导蛋白表达后,利用Ni-NTA柱亲和层析及离子交换色谱纯化后获得目的蛋白。结果 Optimum^(TM)Codon获得优化后的Emy162序列,经生物公司测序及酶切鉴定结果证明重组质粒p ET28a-CTB-Emy162构建成功,进一步实验结果表明CTB-Emy162在原核表达系统p ET-28a中主要以包涵体形式存在,在可溶部位少量表达。继而经Ni-NTA柱亲和纯化及离子交换色谱纯化获得CTB-Emy162纯蛋白。结论以大肠杆菌E.coli BL-21(DE3)及p ET-28a构成的原核表达系统能够成功表达重组蛋白CTB-Emy162,Ni-NTA纯化柱能够纯化目的蛋白CTB-Emy162。

生大黄在高海拔地区重症急性胰腺炎治疗中的临床观察

目的观察生大黄在治疗高海拔地区重症急性胰腺炎的疗效。方法对153例重症急性胰腺炎病人随机分为对照组72例,采用基本支持疗法,治疗组81例,在基本支持疗法的基础上,给予生大黄胃管注入及灌肠治疗。结果治疗组治疗总有效率达90.12%,对照组总有效率为72.22%,两组比较,P<0.05,差异有统计学意义,治疗组病人肠功能恢复,腹水的吸收较快,并发症及死亡率减少,住院日也明显缩短。提示在治疗重症急性胰炎过程中,配合使用生大黄治疗能降低病人并发症及死亡率。

藏族肝泡型棘球蚴病患者疾病认知现状及影响因素的分析

目的了解青海地区藏族肝泡型棘球蚴病住院患者疾病认知情况及其影响因素。方法对住院治疗的200例藏族肝泡型棘球蚴病患者采用藏汉双语版藏族肝泡型棘球蚴病患者疾病认知调查问卷进行调查,并分析其影响因素。结果藏族肝泡型棘球蚴病患者疾病认知得分为(5.09±2.74)分,处于中等水平;主要影响因素是性别、文化程度、职业和家族史(P<0.01)。结论藏族肝泡型棘球蚴病患者疾病认知处于中等水平,护理人员应结合藏族肝泡型棘球蚴病患者的性别、文化程度、职业和家族史等影响因素,为其制订合适的健康教育计划,以提高健康教育的效果。

探讨双镜联合与完全腹腔镜保胆取石术治疗胆囊结石的效果

目的:分析探讨双镜联合与完全腹腔镜保胆取石术治疗胆囊结石的临床效果和临床使用价值。方法:随机选取2015年1月至2016年1月期间于我院接受治疗的100例胆囊结石患者,按照随机双盲的原则对患者分组,观察组患者接受腹腔镜与胆道镜联合保胆取石术的治疗,对照组患者接受腹腔镜保胆取石术的治疗,比较两组患者治疗效果。结果:两组患者肠蠕动恢复时间、住院时间的比较无显著差异(P>0.05);但观察组患者术中出血量、手术时间、并发症发生率以及术后胆囊壁厚度、胆囊收缩功能均显著优于对照组患者(P<0.05)。结论:双镜联合保胆取石术治疗胆囊结石的效果优于完全腹腔镜保胆取石术,可进一步提高患者手术质量和手术效果。