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精细定位和克隆9p21-22区域内鼻咽癌候选抑瘤基因 被引量:34
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作者 阳剑波 宾亮华 +7 位作者 李忠花 张小慧 钱骏 张必成 周鸣 谢奕 邓龙文 李桂源 《癌症》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2000年第1期6-9,共4页
目的:进一步精细限定鼻咽癌9p21-22区域等位基因杂合性丢失的频率和范围,筛选和克隆其共同缺失区内鼻咽癌相关的候选抑瘤基因。方法:应用11个定位于 9p21-22区域的高密度微卫星位点,检测 25例低分化鼻咽癌患者的... 目的:进一步精细限定鼻咽癌9p21-22区域等位基因杂合性丢失的频率和范围,筛选和克隆其共同缺失区内鼻咽癌相关的候选抑瘤基因。方法:应用11个定位于 9p21-22区域的高密度微卫星位点,检测 25例低分化鼻咽癌患者的杂合性丢失,确定其共同缺失区;用RT-PCR和Northern筛出在鼻咽癌细胞株HNE1和鼻咽癌活检组织中表达下调的、定位于共同缺失区内的 3’末端ESTs(Express Sequence Tags);采用 RACE技术和生物信息学资源克隆出候选EST的全长cDNA。结果: 25例患者中有17例(68%)存在一个或多个位点的杂合性丢失,其中D9s161(35.0%,7/20),D9S1678(31.5%,6/19),D9S263(3.3%,6/18)和D9S1853(33.3%,7/21)四个紧邻位点的丢失频率相对较高,并发现六位患者在该四个位点表现为连续性缺失;筛选D9S161-D9S1853区域内25个代表新基因的3’末端ESTs序列,发现一个EST(dbEST:208825)在鼻咽癌细胞株HNE1及73%(11/15)的活检组织中表达降低, Multiple Tissue Nort 展开更多
关键词 鼻咽肿瘤 染色体 9p21-22 杂合性丢失 克隆
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面对21世纪的人类“圣餐” 中国该怎样分享 被引量:9
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作者 阳剑波 李桂源 《医学与哲学》 1998年第8期393-396,共4页
人类基因组计划(HumanGenomeProject,HGP)实施7年来已取得巨大进展,不断涌现的新技术、新策略使人基因组全长测序有望在今后几年内提前完成,结构基因组学时代正向功能基因组学时代过渡。然而,发达国家之间... 人类基因组计划(HumanGenomeProject,HGP)实施7年来已取得巨大进展,不断涌现的新技术、新策略使人基因组全长测序有望在今后几年内提前完成,结构基因组学时代正向功能基因组学时代过渡。然而,发达国家之间的基因争夺战亦愈演愈烈,中国现正面临着严峻挑战。本文简要介绍了HGP研究的国际背景、最新进展及发展趋势。 展开更多
关键词 人类基因组计划 基因专利 对策 HGP
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参麦注射液对小鼠烫伤后胸腺细胞凋亡保护及机制 被引量:1
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作者 阳剑波 尤灿 《中国感染控制杂志》 CAS 2002年第1期4-7,共5页
目的 探讨参麦注射液对小鼠烫伤后胸腺细胞凋亡有无保护作用及其机制。方法  30只昆明小鼠随机分为三组 :①烫伤组 (n =10 ) ,造成体表面积 35 %烫伤 ;②参麦处理组 (n =10 ) ,在烫伤前后腹腔注入参麦液(10ml/kg) ;③对照组 (n =10 ) ... 目的 探讨参麦注射液对小鼠烫伤后胸腺细胞凋亡有无保护作用及其机制。方法  30只昆明小鼠随机分为三组 :①烫伤组 (n =10 ) ,造成体表面积 35 %烫伤 ;②参麦处理组 (n =10 ) ,在烫伤前后腹腔注入参麦液(10ml/kg) ;③对照组 (n =10 ) ,不烫伤仅腹腔注入等量生理盐水。以上动物在烫伤后 6小时取胸腺细胞 ,观察胸腺细胞凋亡指标及血浆皮质酮含量和细胞中BCL 2含量。结果 参麦处理组小鼠胸腺细胞数量、胸腺细胞凋亡百分率、DNA断裂百分率及血浆皮质酮含量均明显降低 (与烫伤组比P <0 .0 1) ,DNA琼脂凝胶电泳也未见凋亡细胞特有的“梯式”条带 ,BCL 2蛋白含量也明显提高 (与烫伤组比P <0 .0 1)。结论 参麦注射液有效防止烫伤后胸腺细胞凋亡 ,其保护机制与参麦能阻断血浆糖皮质激素诱导胸腺细胞凋亡效应以及能防止BCL 展开更多
关键词 烫伤 参麦注射液 胸腺细胞 细胞凋亡 糖皮质激素 BCL-2 小鼠
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用双向电泳和质谱技术检测NGX6转染后人鼻咽癌细胞表达差异的蛋白质(英文) 被引量:20
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作者 李江 谭琛 +7 位作者 向秋 张晓梅 马健 李伟芳 王洁如 阳剑波 梁宋平 李桂源 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2001年第4期573-578,共6页
NGX6是克隆的鼻咽癌相关基因 ,它的功能与作用机制目前尚不十分清楚 .通过脂质体转染把NGX6导入鼻咽癌细胞株中 ,采用双向凝胶电泳分离细胞内所有蛋白质 ,通过软件分析 ,找到与未处理细胞表达差异的蛋白质 ,通过质谱分析和生物信息学资... NGX6是克隆的鼻咽癌相关基因 ,它的功能与作用机制目前尚不十分清楚 .通过脂质体转染把NGX6导入鼻咽癌细胞株中 ,采用双向凝胶电泳分离细胞内所有蛋白质 ,通过软件分析 ,找到与未处理细胞表达差异的蛋白质 ,通过质谱分析和生物信息学资料处理 .鉴定出七种表达上调的蛋白质 ,其中包括Fas蛋白 ,锌指蛋白(ZNF) ,主要组织相容性抗原Ⅱ (MHCⅡ )等 .Fas蛋白参与细胞凋亡的信号传导途径 ,它的上调可以促进细胞凋亡 ;ZNF蛋白参与基因的转录调控 ,它的上调也可影响细胞异常增殖的信号传导通路 ;MHCⅡ可以促进机体对肿瘤细胞的免疫应答 .这些结果说明NGX6可能通过多种途径抑制鼻咽癌细胞的生长 ,为研究NGX6的作用机制提供了很好的实验资料 ,对鼻咽癌的基因治疗奠定了一定的研究基础 。 展开更多
关键词 双向电泳 细胞转染 基质辅助性激光解吸飞行时间质谱 鼻咽癌相关基因
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定位于染色体9p21-22的一个新基因UBAP1的克隆测序及在鼻咽癌中的表达分析 被引量:8
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作者 钱骏 王洁如 +6 位作者 向秋 阳剑波 张小慧 张必成 曹莉 李伟芳 李桂源 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第3期299-305,共7页
在染色体 9p2 1 2 2鼻咽癌杂合性丢失 (lossofheterozygosity,LOH)高频区 ,应用EST介导的定位 侯选克隆策略 ,用RT PCR及Northern杂交检测了 2 2个表达序列标记 (expressedsequencetag ,EST)在鼻咽癌细胞株HNE1和原代培养的正常鼻咽上... 在染色体 9p2 1 2 2鼻咽癌杂合性丢失 (lossofheterozygosity,LOH)高频区 ,应用EST介导的定位 侯选克隆策略 ,用RT PCR及Northern杂交检测了 2 2个表达序列标记 (expressedsequencetag ,EST)在鼻咽癌细胞株HNE1和原代培养的正常鼻咽上皮细胞中的表达差异 ,并对其中一个在鼻咽癌细胞株HNE1中表达下调的EST检测了在鼻咽癌活检组织中的表达 .用生物信息学方法获得其全长cDNA序列 ,GenBank登录号AF2 2 2 0 4 3.该基因cDNA全长 2 70 1bp ,其开放阅读框 (openreadingframe ,ORF)编码一个含 50 2个氨基酸、分子量为 55kD的碱性蛋白质 ,在蛋白羧基端含有 2个连续的重要UBA功能域 (ubiquitinassociateddomain) ,属于遍在蛋白相关蛋白家族的一个新成员 ,经国际人类基因命名委员会同意 ,将其命名为UBAP1 (ubiquitinassociatedprotein 1 ) .Northern表达分析显示UBAP1在所检测的人组织中广泛表达 ,但在人的心脏、骨骼肌及肝脏中的表达较强 .UBAP1基因在63 2 % ( 1 2 1 9)的鼻咽癌活检组织中表达下调 .UBAP1基因作为一个遍在蛋白相关蛋白家族的新成员 ,结合其在 9p的重要定位信息 ,有必要进一步研究其表达下调参与鼻咽癌发生发展的可能机制 . 展开更多
关键词 鼻咽癌 染色体9p 基因克隆 表达分析 UBA功能域
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NGX6基因转染对鼻咽癌细胞基因表达谱的影响 被引量:6
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作者 马健 周洁 +6 位作者 李小玲 龚佳蕾 何显锋 唐珂 阳剑波 胡赓熙 李桂源 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第4期416-422,共7页
鼻咽癌是我国南方的常见肿瘤 .NGX6是新近克隆的定位于 9p2 1 2 2 ,在鼻咽癌组织中表达下调的基因 .初步的研究结果显示 ,NGX6基因转染鼻咽癌细胞HNE1能够延缓其生长速度 ,使肿瘤细胞更多地停留在G0 G1期 .为探索NGX6基因在鼻咽癌发... 鼻咽癌是我国南方的常见肿瘤 .NGX6是新近克隆的定位于 9p2 1 2 2 ,在鼻咽癌组织中表达下调的基因 .初步的研究结果显示 ,NGX6基因转染鼻咽癌细胞HNE1能够延缓其生长速度 ,使肿瘤细胞更多地停留在G0 G1期 .为探索NGX6基因在鼻咽癌发病机制中的作用 ,建立了高表达NGX6的鼻咽癌细胞系 .利用包含 14 0 0 0个基因的cDNA微阵列分析了NGX6基因转染对HNE1细胞基因表达谱的影响 ,发现NGX6基因的转染能够上调p2 9、APC7、NEU1、RNasek6、αE catenin和TFⅡEα等基因的表达 ;同时也下调properdinP因子、G0S2、BAZ2B、ZHX1,OS4和PBX3等基因的表达 .研究结果提示 ,NGX6基因对鼻咽癌细胞的生物学行为的影响可能与它对一些细胞周期调控因子和转录调控因子的影响相关 .作为一种高通量的分析技术 。 展开更多
关键词 NGX6 基因转染 鼻咽癌细胞 基因表达谱 CDNA微阵列 细胞周期
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CSPG4基因在鼻咽癌中的表达分析 被引量:1
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作者 宋亚莉 李小玲 +13 位作者 黄丽丽 李俏 孙梦熙 张文玲 石磊 范松青 龚朝建 喻正源 彭淑平 熊炜 阳剑波 曾朝阳 李桂源 《中国肿瘤临床》 CAS CSCD 北大核心 2012年第24期1997-2000,共4页
目的:研究硫酸软骨素多糖蛋白4(CSPG4)基因在鼻咽癌及对照组织中的表达。方法:采用实时荧光定量PCR测定CSPG4基因在4例正常鼻咽上皮和18例鼻咽癌组织(其中Ⅱ期6例,Ⅲ期5例,Ⅳ期7例)中的表达情况;通过构建包含92例对照和187例鼻咽癌的组... 目的:研究硫酸软骨素多糖蛋白4(CSPG4)基因在鼻咽癌及对照组织中的表达。方法:采用实时荧光定量PCR测定CSPG4基因在4例正常鼻咽上皮和18例鼻咽癌组织(其中Ⅱ期6例,Ⅲ期5例,Ⅳ期7例)中的表达情况;通过构建包含92例对照和187例鼻咽癌的组织芯片,应用免疫组织化学检测CSPG4蛋白的表达和分布。结果:正常鼻咽上皮中CSPG4基因mRNA表达水平较低,在鼻咽癌中CSPG4表达上调且与临床分期呈正相关,差异具有统计学意义(P=0.017)。免疫组织化学结果表明鼻咽癌中CSPG4蛋白表达水平高于对照组,91.98%的鼻咽癌组织中CSPG4为强阳性表达,而对照组的强阳性率为76.09%(P=0.001)结论:CSPG4在鼻咽癌中随着临床进展表达逐渐上调,可能参与了鼻咽癌的发生发展,具体机制及临床应用前景值得进一步深入研究。 展开更多
关键词 鼻咽癌 硫酸软骨素多糖蛋白4 表达 组织芯片
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Detailed Deletion Mapping of Chromosome 9p21-22 in Nasopharyngeal Carcinoma
8
作者 阳剑波 张晓梅 +6 位作者 邓龙文 谭国林 周鸣 曾朝阳 曹莉 沈守荣 李桂源 《Chinese Journal of Cancer Research》 SCIE CAS CSCD 2000年第3期8-11,共4页
Objective: To further refine the extent of deletion on chromosome 9p21-22 in nasopharyngeal carcinoma (NPC) and provide evidence for discovering new tumor suppressor gene. Methods: Loss of heterozygosity (LOH) on chro... Objective: To further refine the extent of deletion on chromosome 9p21-22 in nasopharyngeal carcinoma (NPC) and provide evidence for discovering new tumor suppressor gene. Methods: Loss of heterozygosity (LOH) on chromosome 9p21-22 was analyzed in 25 paired blood and tumor samples by using 11 high-density microsatellite polymorphic markers. Results: 17 of 25 cases (68.0%) showed LOH at one or more loci. Higher frequencies of LOH were found at four loci: D9S161 (35.0%), D9S1678 (31.5%), D9S263 (33.3%) and D9S1853 (33.3%), where 6 cases had a contiguous stretch of allelic loss. Conclusion: The minimal common region of deletion might be defined between D9S161 and D9S1853 (estimated about 2.7 cM in extent) at 9p21.1, suggesting that inactivation of one or more tumor suppressor genes located in this region may be an important step in NPC. 展开更多
关键词 Nasopharyngeal carcinoma Chromosome 9p21-22 Loss of heterozygosity Tumor suppressor gene
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利妥昔及其生物类似药在生物样品中的定量分析技术进展
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作者 侯利平 颜钰阳 +2 位作者 李蠡 阳剑波 欧阳冬生 《中国临床药理学与治疗学》 CAS CSCD 2021年第1期98-104,共7页
利妥昔是当前主要的单抗靶向治疗药物,伴随着越来越多的相关生物类似药临床评价需求,对于开发快速有效的定量方法来分析生物基质中利妥昔及其生物类似药提出了更高要求。本文综述了配体结合法、液质联用技术以及新兴定量技术检测该品种... 利妥昔是当前主要的单抗靶向治疗药物,伴随着越来越多的相关生物类似药临床评价需求,对于开发快速有效的定量方法来分析生物基质中利妥昔及其生物类似药提出了更高要求。本文综述了配体结合法、液质联用技术以及新兴定量技术检测该品种血药浓度的应用,供分析测试人员在开发利妥昔等单抗药物定量方法时参考。 展开更多
关键词 利妥昔 生物类似药 配体结合法 液质联用 免疫原性
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鼻咽癌染色体9p21~22区域精细缺失图谱的构建 被引量:14
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作者 阳剑波 唐湘娜 +5 位作者 邓龙文 谭国林 周鸣 曾朝阳 曹莉 李桂源 《中华肿瘤杂志》 CAS CSCD 北大核心 1999年第6期419-421,共3页
目的 进一步精细限定鼻咽癌9p21 ~22 区域等位基因杂合性丢失的频率和范围,为发现和分离克隆该区域内的鼻咽癌抑瘤基因提供新线索和依据。方法 应用11 个定位于9p21 ~22 区域的高密度微卫星位点,检测25 例低分化鼻咽癌患者的杂合性... 目的 进一步精细限定鼻咽癌9p21 ~22 区域等位基因杂合性丢失的频率和范围,为发现和分离克隆该区域内的鼻咽癌抑瘤基因提供新线索和依据。方法 应用11 个定位于9p21 ~22 区域的高密度微卫星位点,检测25 例低分化鼻咽癌患者的杂合性丢失。结果 25 例患者中,有17 例存在一个或多个位点的杂合性丢失,占68-0 % 。其中D9S161(35 .0 % ) 、D9S1678(31 .6 % ) 、D9S263(33 .3 % ) 和D9S1853(33 .3 % )4 个紧邻位点的丢失频率相对较高,并发现有6 例患者在这些位点表现为连续性缺失。结论 鼻咽癌染色体9p21 ~22 区域D9S161 ~D9S1853 位点之间(2 .7 cM) 是鼻咽癌患者的一个较小共同缺失区,该区域内的抑瘤基因失活可能是鼻咽癌发生发展过程中的重要事件。 展开更多
关键词 鼻咽癌 染色体9p21-22 杂合性丢失
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鼻咽癌染色体7q32区域微缺失的研究 被引量:6
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作者 唐湘娜 阳剑波 +7 位作者 邓龙文 江宁 周鸣 曾朝阳 谢奕 谭国林 邱元正 李桂源 《中华医学遗传学杂志》 EI CAS CSCD 北大核心 2000年第3期153-156,共4页
目的 进一步明确鼻咽癌染色体 7q32的 D7S5 0 0 - D7S495附近区域高频率等位基因缺失的范围。方法 采用更高密度的微卫星标记位点 ,分析 30个鼻咽癌病例等位基因杂合性缺失的情况。结果30例患者中有 19例 (6 3.3% )存在杂合性缺失 ;D7... 目的 进一步明确鼻咽癌染色体 7q32的 D7S5 0 0 - D7S495附近区域高频率等位基因缺失的范围。方法 采用更高密度的微卫星标记位点 ,分析 30个鼻咽癌病例等位基因杂合性缺失的情况。结果30例患者中有 19例 (6 3.3% )存在杂合性缺失 ;D7S5 0 0 - D7S5 0 9- D7S495是高频率缺失集中的区域 ,共同缺失区在 D7S5 0 9附近。结论  D7S5 0 展开更多
关键词 鼻咽癌 染色体7q32 等位基因缺失 抑癌基因
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Molecular cloning and characterization of NAG-7: a novel gene downregulated in human nasopharyngeal carcinoma 被引量:2
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作者 谢奕 宾亮华 +5 位作者 阳剑波 李忠花 余鹰 张小慧 曹莉 李桂源 《Chinese Medical Journal》 SCIE CAS CSCD 2001年第5期82-86,110,共6页
Objective To identify novel tumor suppressor genes at chromosome 3p24-26 in human nasopharyngeal carcinoma (NPC).Methods Twenty epithelial-derived expressed sequence tags (EST) were selected from chromosome 3p24-26. R... Objective To identify novel tumor suppressor genes at chromosome 3p24-26 in human nasopharyngeal carcinoma (NPC).Methods Twenty epithelial-derived expressed sequence tags (EST) were selected from chromosome 3p24-26. RT-PCR and Northern blot were used to detect the expression of the ESTs in NPC cell line, HNE-1, and primary cultures of normal nasopharyngeal epithelial cells. One EST, which was substantially downregulated in the HNE-1 cell line, was detected in 19 NPC biopsy samples, cDNA library screening was used to get its full sequence and the sequence of this novel gene was analyzed.Results A novel gene located at chromosome 3p25.3 was obtained and named NAG-7. It was downregulated in 26.3% (5/19) of NPC biopsy samples. Its 1677 bp full length cDNA had a potential open reading frame predicting a 94 amino acid protein with a molecular weight of 11023.87 Dalton. Analysis of the NAG-7 gene showed that it was a transmembrane protein containing a protein kinase C phosphorylation site and a myristyl site. It has no significant homology to any reported genes in the database of GenBank. Conclusion NAG-7 is a novel gene downregulated in NPC, suggesting that it may be involved in the development of NPC. 展开更多
关键词 nasopharyngeal neoplasm · chromosome 3p · gene cloning
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