目的探讨程序性死亡配体-1(programmed death ligand-1,PD-L1)在坏死性小肠结肠炎(necrotizing enterocolitis,NEC)小鼠模型中的表达和作用。方法采用野生型C57BL/6J小鼠20只,随机分入对照组与造模组,对照组母乳喂养,造模组采用脂多糖+...目的探讨程序性死亡配体-1(programmed death ligand-1,PD-L1)在坏死性小肠结肠炎(necrotizing enterocolitis,NEC)小鼠模型中的表达和作用。方法采用野生型C57BL/6J小鼠20只,随机分入对照组与造模组,对照组母乳喂养,造模组采用脂多糖+配方奶喂养+缺氧+冷刺激的方法进行NEC诱导,随后取小鼠肠道进行HE染色评估病理改变、免疫荧光共定位检测PD-L1表达定位、Western blot检测肠道PD-L1表达量,并取外周血进行流式分析检测白细胞亚群及其PD-L1表达;取PD-L1(+/+)与PD-L1(-/-)小鼠各14只,随机分入各自基因型对照组与造模组,诱导方法同前,取小鼠肠道进行HE染色评估病理改变,取外周血检测炎症因子表达。结果成功构建NEC小鼠模型,PD-L1在小鼠肠道中表达于肠上皮细胞及炎症细胞,在外周血中表达于T细胞、单核细胞、中性粒细胞;NEC小鼠肠道PD-L1表达较对照组增加,NEC小鼠外周血中T细胞、单核细胞比例及其PD-L1表达较对照组无明显变化,中性粒细胞比例及其PD-L1表达较对照组分别增加约140%和150%(P<0.05);PD-L1基因小鼠实验结果显示,对照组PD-L1(+/+)小鼠与PD-L1(-/-)小鼠肠道情况及血清炎症因子水平无明显差异;PD-L1(-/-)NEC小鼠较PD-L1(+/+)NEC小鼠肠道病理改变加重,平均病理评分增加(P<0.05),同时PD-L1(-/-)NEC小鼠较PD-L1(+/+)NEC小鼠血清白细胞介素(interleukin,IL)-10下降约44%、趋化因子配体1/IL-6/IL-1β均有25%以上的上升(P均<0.05)。结论PD-L1在小鼠中广泛表达于炎症细胞和肠上皮细胞,敲除PD-L1加重了NEC小鼠的炎症反应与肠道病变程度,PD-L1在NEC发病中发挥减轻炎症反应的保护作用,其机制可能与调控中性粒细胞/肠上皮细胞有关。展开更多
文摘目的探讨程序性死亡配体-1(programmed death ligand-1,PD-L1)在坏死性小肠结肠炎(necrotizing enterocolitis,NEC)小鼠模型中的表达和作用。方法采用野生型C57BL/6J小鼠20只,随机分入对照组与造模组,对照组母乳喂养,造模组采用脂多糖+配方奶喂养+缺氧+冷刺激的方法进行NEC诱导,随后取小鼠肠道进行HE染色评估病理改变、免疫荧光共定位检测PD-L1表达定位、Western blot检测肠道PD-L1表达量,并取外周血进行流式分析检测白细胞亚群及其PD-L1表达;取PD-L1(+/+)与PD-L1(-/-)小鼠各14只,随机分入各自基因型对照组与造模组,诱导方法同前,取小鼠肠道进行HE染色评估病理改变,取外周血检测炎症因子表达。结果成功构建NEC小鼠模型,PD-L1在小鼠肠道中表达于肠上皮细胞及炎症细胞,在外周血中表达于T细胞、单核细胞、中性粒细胞;NEC小鼠肠道PD-L1表达较对照组增加,NEC小鼠外周血中T细胞、单核细胞比例及其PD-L1表达较对照组无明显变化,中性粒细胞比例及其PD-L1表达较对照组分别增加约140%和150%(P<0.05);PD-L1基因小鼠实验结果显示,对照组PD-L1(+/+)小鼠与PD-L1(-/-)小鼠肠道情况及血清炎症因子水平无明显差异;PD-L1(-/-)NEC小鼠较PD-L1(+/+)NEC小鼠肠道病理改变加重,平均病理评分增加(P<0.05),同时PD-L1(-/-)NEC小鼠较PD-L1(+/+)NEC小鼠血清白细胞介素(interleukin,IL)-10下降约44%、趋化因子配体1/IL-6/IL-1β均有25%以上的上升(P均<0.05)。结论PD-L1在小鼠中广泛表达于炎症细胞和肠上皮细胞,敲除PD-L1加重了NEC小鼠的炎症反应与肠道病变程度,PD-L1在NEC发病中发挥减轻炎症反应的保护作用,其机制可能与调控中性粒细胞/肠上皮细胞有关。
