免疫调节方案通过调控外周血淋巴细胞亚群水平治疗原发性干燥综合征的临床研究

目的为进一步探讨调节性T细胞(Treg)在原发性干燥综合征(pSS)中的作用及调节Treg靶点对pSS的疗效,分析靶向Treg的免疫调节疗法治疗前后pSS患者的外周血淋巴细胞亚群计数、传统用药及疾病缓解情况的变化特征。方法收集2016年1月至2019年5月就诊于山西医科大学第二医院风湿科pSS患者80例,予针对性Treg细胞免疫调节疗法治疗。用流式细胞仪检测50名健康人及pSS患者治疗前和随访期内3个月、6个月、12个月时检测患者外周血中T细胞、B细胞、自然杀伤(NK)细胞及Th1、Th2、Th17和Treg细胞绝对计数,同时采用欧洲抗风湿病联盟干燥综合征疾病活动指数(ESSDAI)评价患者疾病活动情况。结果pSS患者的Treg细胞数目明显低于健康人(P<0.05),且以疾病活动高水平的患者Treg细胞数目减少最为明显(P<0.05)。经12个月的治疗,pSS患者ESSDAI评分明显降低(P<0.05)。免疫调节治疗后,患者的糖皮质激素及免疫抑制剂的人均用量明显减少(P<0.05)。未经治疗的pSS患者外周血NK细胞和Treg细胞绝对计数低于健康对照(P<0.05);免疫调节治疗3个月后,患者外周血中总T细胞、总B细胞、总淋巴细胞(TLC)、CD4^(+)T、CD8^(+)T、Th17细胞以及Treg细胞绝对计有所增加(P<0.05);治疗后12个月时pSS患者外周血中总T细胞、CD4^(+)T、CD8^(+)T、NK细胞、Th1细胞、Th17细胞以及Treg细胞绝对计数均显著升高(P<0.05)。结论以Treg细胞为代表的淋巴细胞亚群与pSS患者的疾病活动密切相关,免疫调节治疗方案可以有效上调Treg细胞水平,诱导和恢复患者的自身重建免疫耐受,在降低疾病活动的同时减少传统激素和免疫抑制剂的用量,有望成为pSS的治疗新思路。

类风湿关节炎患者肠道菌群分析与外周血细胞因子关系的研究

目的通过检测RA患者粪便中菌群种类及分布情况,揭示肠道菌群变化与RA发病的联系,为临床治疗提供新思路。方法基于16S rDNA高通量测序平台对111例RA患者粪便标本中的16S rDNA V3区进行分析,与100名健康成人粪便标本中菌群的多样性与丰度统计数据进行比较,使用mothur软件分析Alpha多样性,采用Mann-Whitney检验筛选差异菌群,同时分析肠道菌群和外周血细胞因子的关系。结果2组研究对象性别(χ^(2)=0.005,P=0.947)、年龄(t=0.728,P=0.467)比较差异均无统计学意义。RA组样品显示物种丰富度的Chao1指数(Z=-2.188,P=0.029)和ACE指数(Z=-2.078,P=0.038)以及多样性指数Shannon指数(Z=-2.064,P=0.039)和Simpsion指数(Z=-2.064,P=0.039)均低于健康对照组。在属的水平上,RA组中Bifidobacterium(Z=-2.388,P=0.017)、Lactobacillus(Z=-2.543,P=0.011)、Clostridium sensu stricto(Z=-3.842,P<0.01)、Blautia(Z=-2.064,P=0.039)、ClostridiumⅪ(Z=-2.682,P<0.01)、Turicibacter(Z=-2.437,P=0.015)、Phascolarctobacterium(Z=-3.524,P<0.01)、Megasphaera(Z=-2.870,P<0.01)、Veillonella(Z=-2.472,P=0.013)、Citrobacter(Z=-3.263,P<0.01)和Escherichia/Shigella(Z=-4.265,P<0.01)相对丰度较健康对照组明显增加,Butyricimonas(Z=-3.071,P<0.01)、Odorbacter(Z=-2.257,P=0.024)、Blautia(Z=-2.064,P=0.039)、ClostridiumⅩⅣb(Z=-2.901,P<0.01)、Lachnospiracea incertae sedis(Z=-2.159,P=0.031)、Acetivibrio(Z=-2.995,P<0.01)、Butyricicoccus(Z=-2.162,P=0.031)和Gemmiger(Z=-2.949,P<0.01)相对丰度较健康对照组有所减少。LEfSe分析示γ-变形菌纲(Gammaproteobacteria)和Lachnospiraceae在2组间差异最为显著(LDA值>±4)。同时,高水平IL-17和高水平TNF-α患者比低水平患者的Prevotella相对丰度增加。结论RA患者肠道微生态环境中细菌群落的多样性和丰富度与健康人群差异有统计学意义,高水平炎症细胞因子的患者Prevotella丰度增加,提示肠道菌群异常与RA中的炎症反应有关,肠道菌群失调可能参与RA的发生发展。

干燥综合征患者肠道微生物菌落的分析

目的通过检测干燥综合征(Sj9gren′s syndrome,SS)患者粪便标本的微生物种群分布及外周血Treg细胞绝对计数,分析SS患者肠道菌群变化状态及其与Treg细胞的相关性,为临床诊疗提供新思路。方法通过采用Illumina HiSeq 2500高通量测序平台对29例干燥综合征患者粪便标本中的16S rRNA V3区进行定性分析,与83例健康人粪便标本中菌群的多样性与丰富度统计数据进行比较,分析SS患者中差异性菌群丰富度及其与Treg细胞绝对计数的关系。结果两组研究对象性别、年龄比较差异均无统计学意义(P>0.05)。与健康人对比,SS患者粪便菌群中细菌多样性低于健康对照组(P<0.05),肠道菌群丰富度在门(Phylum)水平上厚壁菌门(Firmicutes)细菌数量较正常对照组减少(P<0.05),变形菌门(Proteobacteria)和放线菌门(Actinobacteria)较健康对照组明显增加(均P<0.05)。在科(Family)水平上链球菌科(Streptococcaceae)、肠杆菌科(Enterobacteriales)和乳杆菌科(Lactobacillaceae)细菌数量较正常对照组明显升高(均P<0.05),普雷沃菌科(Prevotellaceae)和Paraprevotellaceae较对照组明显减少(均P<0.05)。在属(Genus)水平上Blautia、颤螺旋菌属(Oscillospira)、链球菌属(Streptococcus)和韦荣球菌属(Veillonella)细菌数量较正常对照组明显升高(均P<0.05),而Roseburia、粪杆菌属(Faecalibacterium)和普氏菌属(Prevotella)较正常对照组明显减少(均P<0.05)。其中,SS患者粪便中韦荣球菌属的百分比与其外周血Treg细胞绝对计数呈显著负相关(P<0.05)。结论SS患者肠道微生态环境中细菌群落的多样性和均衡性与正常人群存在明显差异,且韦荣球菌属水平的升高与外周血Treg细胞绝对计数呈显著负相关,肠道菌群紊乱或许参与了SS的发病过程。

缺氧诱导因子-1α对调节性T细胞双向调控的研究进展

调节性T细胞是一类介导机体免疫耐受、维持免疫稳态功能的T细胞亚群,目前国内外许多研究发现调节性T细胞数量减少和(或)功能受损在自身免疫病中发挥重要作用。缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)是细胞适应缺氧环境产生的转录因子,在T细胞尤其是调节性T细胞的发育和功能中发挥重要作用。本文阐述了HIF-1α的生物学功能,调节性T细胞的特点,重点总结了HIF-1α双向调控调节性T细胞分化和功能的最新进展及可能机制。