神经干细胞移植治疗帕金森病的实验研究

目的:神经干细胞的发现为神经系统退行性疾病的治疗,提供了新的方法。通过碱性成纤维细胞生长因子(basicfibroblastgrowthfactor,bFGF)反应性神经干细胞的移植,探讨神经干细胞在帕金森病(Parkinson'dis-ease,PD)治疗中的作用。方法:体外用bFGF作为丝裂原培养E16大鼠中脑神经干细胞,经BrdU标记后植入PD大鼠纹状体,了解PD大鼠旋转行为的改善情况。结果:神经干细胞移植组PD大鼠旋转行为改善明显。结论:bFGF反应神经干细胞移植对PD有明显的治疗作用。

外伤性癫痫的临床特征分析及手术治疗

目的 总结外伤性癫痫的临床特征及手术效果。方法 对病人进行神经学检查及EEG、CT、MRI及ECT检查,确定致痫灶后手术治疗,手术中行皮层及深部脑电监测。结果 外伤性癫痫病人32例,年龄10至45岁。临床主要表现有全身强直痉挛性发作、部分性发作、精神运动发作、失神发作。头皮脑电图显示32例病人中30例患者有与损伤部位或对冲部位相符的恒定局限性高波幅尖波、棘波和棘慢波。所有病人均在皮层及深部脑电监测下切除病灶。术后15例已完全停止发作,16例已明显好转,1例无明显改变。结论 外伤性癫痫的临床特点包括局灶性发作多见,癫痫发作形式多样和致痫灶在影像学改变附近。手术切除病灶能获良好效果。

侧脑室注射noggin对海人酸诱导癫痫大鼠学习记忆的影响

目的 观察侧脑室给予noggin对海人酸（kainie acid，KA）诱导的颞叶癫痫大鼠空间学习记忆的影响。方法 侧脑室注射KA诱导大鼠癫痫持续状态（status epileptieus，SE）发作后，连续7d侧脑室注射noggin，2月后大鼠自发性癫痫出现时，Morris水迷宫试验进行行为学检测，尼氏染色检测海马神经元丢失。结果KA诱导大鼠颞叶癫痫成功后，海马CA，、CA。区神经元丢失明显，Morris水迷宫实验中大鼠的逃逸潜伏期延长[（27．38±4．75）S]，穿过原平台位置次数[（5．35±1．45）次]和在原平台象限探索时间百分率[（28．73±3．10）％]下降。侧脑室注射noggin的大鼠，海马神经元丢失减少，Morris水迷宫试验中大鼠的逃逸潜伏期缩短[（18．45±2．32）S]，穿过原平台位置次数[（9．80±1．53）次]和在原平台象限探索时间百分率[（46．58±3．70）％]增加。结论 KA致颞叶癫痫大鼠侧脑室给予noggin可改善大鼠的空间学习记忆能力，可能与noggin能保护海马神经元有关。

bFGF cDNA重组逆转录病毒表达载体的构建及在哺乳动物细胞中的表达

目的 建立逆转录病毒介导的人bFGF体外表达体系。方法 应用DNA重组技术 ,将人bFGFcDNA片段重组到逆转录病毒质粒pLXSN中 ,经PA3 17细胞包装后 ,产生的重组逆转录病毒感染COS 7细胞 ,用RT PCR和WesternBlotting检测bFGFmRNA和蛋白表达。结果 重组pLXSN bFGF质粒 ,经酶切鉴定正确。重组逆转录病毒pLXSN bFGF滴度可达 2 3× 10 4CFU/ml,感染COS 7后能稳定表达。结论 逆转录病毒能介导人bFGF在哺乳动物细胞中的稳定表达 。

海人酸诱导大鼠海马nestin的表达

为了探讨海人酸(kainicacid,KA)侧脑室注射后大鼠海马内nestin的表达变化,本文选用成年雄性SD大鼠,并随机分成实验组和对照组。实验组大鼠侧脑室注射1μl(0.5μg/μl)KA,分别于术后1、3、7、14、30、60、90d处死动物,并应用免疫荧光方法观察神经前体细胞标记物nestin、神经元特异烯醇化酶(NSE)和胶质纤维酸性蛋白(GFAP)的表达。实验组大鼠海马的nestin阳性细胞在KA注射后3d开始出现于齿状回、CA3和CA1区,到7d达到高峰,然后逐渐减少。注射侧的nestin阳性细胞数均较非注射侧多(P<0.01);对照组仅有散在阳性细胞。本结果提示,海人酸可诱导和增强大鼠海马nestin的表达,而这些表达nestin的细胞主要为星形胶质细胞。

戊四氮点燃过程中大鼠海马BMP4表达与神经增殖关系

目的探讨戊四氮(PTZ)点燃过程中大鼠海马骨形成蛋白4(bone morphogenetic protein-4,BMP4)的表达变化与神经增殖的关系。方法将成年大鼠分为对照组与模型组,模型组大鼠又根据在点燃中的不同时相点分为9组。用免疫组织化学与原位杂交的方法检测海马齿状回BMP4mRNA与BrdU阳性细胞数的变化。结果正常成年大鼠BMP4阳性细胞主要分布于齿状回的门区、颗粒下层、CA3、CA1区。BrdU阳性细胞主要分布在齿状回颗粒下层。BMP4阳性细胞与BrdU阳性细胞在点燃过程中均明显增加,呈明显正相关,点燃后2月降至基线水平。结论BMP4可能通过影响成年大鼠海马神经发生在PTZ点燃过程中起重要作用。

海人酸致癫痫大鼠海马结构中noggin表达变化

目的:研究海人酸(kainic acid,KA)侧脑室注射并诱发癫痫持续状态(status epilepticus,SE)后大鼠海马结构中noggin基因在大鼠海马的表达变化。方法:大鼠在侧脑室注射KA后1、3、7、14、30和60d等不同时间,采用RT-PCR研究noggin mRNA含量变化,采用免疫组化观察noggin蛋白表达变化。结果:在正常大鼠海马结构中noggin mRNA有少量表达。noggin阳性细胞主要位于齿状回及CA3、CA1区,数量较少。侧脑室注射KA诱发SE后,noggin表达持续升高,3d达到高峰;7d在脑内的表达开始降低;注射后2个月,noggin表达降至术前水平,仅见散在的阳性细胞。结论:侧脑室注射KA并诱发SE后,大鼠海马结构中noggin表达明显增加。

PBL教学法在神经外科临床见习中的应用

PBL（problem-based learning）教学法是基于现实世界的问题、以学生为中心的教育方式。神经外科是一门专业性、实践性很强的临床学科,课堂教学理论性较强,学生不容易理解,临床见习课不仅可以加深学生对课堂内容的理解，巩固已经学到的理论知识，而且能够培养学生的临床思维能力，

血管内治疗后循环动脉瘤(附24例分析)

目的总结后循环动脉瘤的血管内治疗经验。方法回顾性分析采用血管内栓塞治疗24例后循环动脉瘤的临床资料。入院时Hunt-Hess分级:0级3例,Ⅰ级8例,Ⅱ级6例,Ⅲ级5例,Ⅳ级2例。支架辅助弹簧圈栓塞4例,单纯弹簧圈栓塞20例。结果动脉瘤达致密栓塞(99%～100%)13例,大部分栓塞(90%～98%)8例,部分栓塞(<90%)3例。随访6～22个月,平均9.2个月;GOS5分16例,4分5例,3分2例,2分1例,无再出血发生。结论血管内栓塞是后循环动脉瘤安全而有效的治疗方法。

BMP4参与海人酸损伤后成年大鼠海马齿状回颗粒细胞增殖及胶质增生

目的探讨海人酸(KA)侧脑室注射致大鼠海马损伤后骨形成蛋白-4(BMP4)的表达变化及其与颗粒细胞增殖和胶质细胞增生的关系。方法将成年大鼠分为对照组与实验组。侧脑室注射KA7 d后,用尼氏染色检测海马神经元丢失,用免疫组织化学与原位杂交的方法检测海马齿状回BMP4 mRNA阳性细胞与BrdU标记细胞、GFAP阳性细胞数的变化。结果正常成年大鼠BMP4 mRNA阳性细胞主要分布于海马齿状回的门区、颗粒下层、CA3、CA1区。BrdU标记细胞主要分布在齿状回颗粒下层。GFAP阳性细胞主要分布在齿状回、CA3区。在KA侧脑室注射致海马损伤后7 d,海马CA3、CA4区神经元丢失明显,BMP4 mRNA阳性细胞与BrdU、GFAP阳性细胞均明显增加。结论 KA侧脑室注射致海马损伤后,成年大鼠海马齿状回颗粒细胞增殖增强和胶质增生可能与BMP4表达增加有关。

血管内栓塞治疗多发性颅内动脉瘤

目的评价血管内栓塞治疗多发性颅内动脉瘤的安全性与有效性。方法回顾性分析经血管内栓塞治疗16例多发性颅内动脉瘤(共38个动脉瘤)患者的临床资料。36个动脉瘤在前循环,2例病人分别有1个动脉瘤在后循环。根据Hunt-Hess评分,Ⅰ级5例,Ⅱ级6例,Ⅲ级3例,Ⅳ级2例。结果15例病人一次性将所有动脉瘤栓塞,1例仅栓塞责任动脉瘤,未能栓塞的动脉瘤二期手术夹闭。无死亡病例,临床随访6个月以上,所有病例无再出血;预后按GOS评分,良好11例,轻残3例,重残1例,植物生存1例。结论血管内栓塞治疗多发性颅内动脉瘤是安全有效的。诊断明确后应尽早治疗责任动脉瘤;然后再根据未破裂动脉瘤的处理原则,选择性栓塞其它未破裂动脉瘤。

PTZ点燃癫痫大鼠海马NSE和BMP4的表达

目的观察神经元特异性烯醇酶(neuron-specific enolase,NSE)和骨形成蛋白4(bone morphogenic protein4,BMP4)基因在戊四氮(pentylenetetrazol,PTZ)点燃癫痫大鼠海马中的表达,并探讨两者与癫痫发病机制和脑损伤的关系。方法将50只成年雄性SD大鼠分为对照组和实验组。实验组采用PTZ点燃癫痫大鼠,按点燃进程,又随机分为Ⅰ级组、Ⅲ级组、Ⅳ级组和Ⅴ级组。用免疫组化技术、地高辛标记特异性寡核苷酸探针原位杂交组织化学技术和图像分析技术,观察海马NSE和BMP4表达的变化。结果发现应用PTZ点燃后,随发作级别的增高,大鼠海马各区NSE和BMP4的表达亦增加。在Ⅲ和Ⅳ级大鼠海马CA3及DG的NSE和BMP4表达明显高于对照组(P<0·01);Ⅴ级大鼠在发作后海马CA3及DG的NSE和BMP4表达呈逐渐下降。结论PTZ点燃可诱导癫痫海马内神经元损伤和神经发生增加,这可能是癫痫海马内神经元丢失、神经元可塑性的病理基础;NSE其表达水平与神经元损伤程度和预后密切相关;BMP4可能在PTZ癫痫形成过程中起重要作用。

红藻氨酸快速点燃大鼠癫痫模型的建立及其海马神经发生

目的建立红藻氨酸(kainite acid,KA)快速点燃癫痫模型,观察行为学、脑电图(electroencephalogrom,EEG)、海马病理改变及其神经发生。方法立体定向连续注射KA于侧脑室致痫。视频监测、深部EEG、Nissl染色、BrdU免疫组化染色。结果大鼠行为学及深部EEG呈急性期、静止期和慢性期3个阶段性变化。根据Racine行为学分级法,Ⅴ级8只,Ⅳ级12只,Ⅲ级2只,Ⅱ级2只;深部电极描记出起始于海马并向杏仁核、额叶皮质等传导癫痫样波;病理变化提示长期癫痫发作会导致海马锥体细胞逐渐变性、坏死、丢失。BrdU标记细胞主要分布于海马齿状回,并在癫痫发作后显著增多(P<0.01)。结论KA快速点燃大鼠模型为模拟颞叶癫痫的理想动模型,癫痫发作后神经发生显著增高。

戊四氮点燃癫大鼠海马巢蛋白和骨形成蛋白-4的表达研究

目的观察巢蛋白(nestin)和骨形成蛋白4(BMP4)基因在戊四氮(PTZ)点燃癫大鼠海马中的表达,并探讨两者与癫发病机制的关系。方法将81只成年雄性SD大鼠随机分为实验组(n=54)和对照组(n=27)。实验组采用PTZ点燃癫大鼠,按点燃中的不同时相点,又随机分为9组。用免疫组化技术、地高辛标记特异性寡核苷酸探针原位杂交组织化学技术,观察海马nestin和BMP4表达的变化。结果nestin阳性细胞在PTZ注射后3d开始出现在齿状回、CA3区和CA1区,到7d达到高峰,以后逐渐减少。BMP4在PTZ注射后7d开始增多,在点燃后1d达到高峰,以后逐渐减少,主要分布在齿状回、CA3区和CA1区。结论PTZ点燃可引起海马内星形胶质细胞增生、活化和神经发生,这可能是癫海马组织胶质化、神经元可塑性的病理基础;BMP4可能在PTZ癫形成过程中起重要作用。

胎脑黑质移植治疗帕金森病的研究进展

随着我国社会逐步进入老龄化,帕金森病患者逐渐增多,传统的左旋多巴疗法由于长期应用疗效下降及一系列副作用,使其使用受到一定限制。运用外科手段恢复纹状体中多巴胺含量越来越引起人们的重视,其中胎脑黑质移植以其疗效确切、移植方法简便、免疫排斥低等特点,今后可能会成为理想的治疗帕金森病的方法。本文就胎脑黑质移植治疗帕金森的研究进展作一综述。

BMP-2对室管膜前下区神经干细胞向多巴胺能神经元分化及对DLX5表达的影响

目的探讨骨形成蛋白2(bone morphogenetic protein-2,BMP-2)对室管膜前下区(anterior subventricular zone,SVZa)神经干细胞(neural stem cells,NSCs)向多巴胺能神经元分化及对DLX5表达的影响。方法体外培养SVZa NSCs,分为对照组、BMP-2组、BMP-2+Noggin组和Noggin组,通过免疫荧光染色和流式细胞术,观察其分化为酪氨酸羟化酶阳性(TH+)神经元的情况;用RT-PCR检测DLX5 mRNA表达水平。结果BMP-2组SVZaNSCs向TH+神经元分化的比例和DLX5 mRNA表达水平均显著高于对照组(P<0.05),且这种效应能被其拮抗剂Noggin特异性抑制。结论BMP-2可能通过上调DLX5表达水平从而促进SVZa NSCs向多巴胺能神经元分化。

C17．2神经干细胞移植Aβ1-40损伤大鼠海马后的分化及对学习记忆的改善

目的探讨永生化神经干细胞株C17.2移植Aβ1-40损伤大鼠海马后的存活、分化以及细胞移植对AD大鼠的治疗作用。方法单侧海马齿回注射凝聚态Aβ1-40复制AD大鼠模型;C17.2神经干细胞移植到海马Aβ1-40注射处,免疫荧光观察移植细胞的存活、分化,Morris水迷宫检测干细胞移植对AD大鼠空间学习记忆障碍的改善情况。结果C17.2神经干细胞移植到AD大鼠海马后存活良好,DAPI核染显示移植细胞广泛迁移,Cy3荧光显示大部分移植细胞分化为GFAP阳性细胞,并可见一定数量的移植细胞分化为NF200阳性细胞,其中部分发出类似神经元的长突起。行为学检测表明干细胞移植对AD大鼠空间学习记忆能力有明显改善。结论永生化神经干细胞移植AD大鼠海马后能有效存活,移植细胞可分化为胶质细胞、神经元并能改善AD大鼠学习记忆功能障碍。

神经内镜下第三脑室造瘘及活检在小儿松果体区肿瘤诊治中的应用

目的 探讨神经内镜下第三脑室造瘘及活检在小儿松果体肿瘤诊治中的应用效果。方法 在去除松果体病变之前运用神经内镜第三脑室造瘘既可以达到永久解除梗阻性脑积水、治疗颅内压增高 ,同时在内镜下行活体组织检查以明确肿瘤的性质 ,为进一步治疗提供参考。结果 9例梗阻性脑积水儿童运用此方法均进行了第三脑室造瘘 ,后经MRI证实成功 ,所有病人没有发生严重并发症。结论 神经内镜第三脑室造瘘并取活检是松果体区肿瘤确实而有效的微侵袭诊疗手段。