响应面法优化阿魏菇多糖的超声辅助提取工艺及抗氧化活性研究

为研究阿魏菇多糖(Pleurotus ferulae polysaccharides,PfP)的超声提取工艺及体外抗氧化活性,在单因素试验的基础上,采用中心组合设计(box-behnken design,BBD)和响应面方法(response surface methodology,RSM),研究超声时间、超声温度、液料比及提取次数对PfP提取率的影响,优化PfP的超声辅助提取工艺;通过测定对Fe3+还原能力和对DPPH自由基、羟基自由基(·OH)的清除能力,对PfP的体外抗氧化活性进行研究。结果显示,超声温度、超声时间以及液料比均对PfP的提取率有显著影响,其中料液比影响最大,超声时间影响最小;最佳工艺条件为:超声温度66℃、超声时间27min、液料比29∶1(mL/g)、提取2次,在此条件下PfP提取率达到14.69%。体外抗氧化试验结果表明,PfP使Fe^3+还原产生的最大吸光值为0.54,对DPPH和·OH的最大清除率分别为85.61%和56.1%,其抗氧化活性均在一定浓度范围呈剂量正相关效应。

阿里红多糖通过激活Nrf2/ARE通路改善阿尔茨海默病大鼠海马及脑皮层的氧化应激损伤

探讨阿里红多糖(Fomes officinalis Ames polysaccharides,FOPS)抗氧化应激的作用,并从Nrf2/ARE信号通路研究其作用机制。72只健康雄性SD大鼠称体质量并按随机原则分为空白组、模型组、盐酸多奈哌齐组(0.5 mg/kg)、阿里红多糖高、中、低剂量组(100、50、25 mg/kg),每组12只。采用大鼠双侧海马CA1区注射(5μL/侧)Aβ1-42建立AD大鼠模型,给药30天,Morris水迷宫检测行为学变化,荧光定量RT-qPCR和蛋白免疫印迹法(Western blotting)检测各组大鼠脑皮层和海马组织中结构蛋白Keap1、Nrf2及下游抗氧化蛋白HO-1、NQO1 mRNA及蛋白含量。结果发现,干预30天后,与空白组比较,AD模型组大鼠学习记忆能力显著下降(P<0.01),大鼠海马区及脑皮层Nrf2、NQO1、HO-1的mRNA含量及蛋白表达量显著下降(P<0.01),而Keap1 mRNA含量及蛋白表达量显著升高(P<0.01);与模型组比较,盐酸多奈哌齐和阿里红多糖高、中剂量组大鼠的学习记忆能力显著升高(P<0.01),大鼠海马区及脑皮层Nrf2、NQO1、HO-1 mRNA含量及蛋白表达量显著升高(P<0.05,P<0.01),Keap1 mRNA含量及蛋白表达量显著降低(P<0.05,P<0.01)。研究表明阿里红多糖通过调节Keap1的表达,促进Nrf2激活,诱导NQO1、HO-1的表达,发挥提高机体抗氧化损伤作用,从而改善AD大鼠学习记忆能力。

阿里红多糖组分对APP/PS1双转基因模型小鼠海马区AKT/GSK3β/Tau/P-tau蛋白表达的影响

探究阿里红多糖组分(FOPS-a和FOPS-b)对阿尔茨海默症模型小鼠海马区AKT/GSK3β/Tau/P-tau蛋白表达的影响。实验选用64只3月龄雄性APP/PS1双转基因AD模型小鼠,随机分为模型组、多奈哌齐组(0.65 mg/kg)、阿里红多糖a组分(FOPS-a)与阿里红多糖b组分(FOPS-b)高、中、低(60、30、15 mg/kg),同月龄野生型C57BL/6J小鼠为正常组,每组8只,各组分别给与药物和生理盐水灌胃给药90天。6月龄时通过跳台、旷场实验检测小鼠行为学的变化,采用尼氏染色观察各组小鼠海马区神经元形态变化,应用RT-PCR法检测小鼠海马区AKT、GSK3β、Tau mRNA转录水平,Western-blot法检测AKT、GSK3β、Tau、P-tau蛋白的表达。结果发现阿里红多糖组分(FOPS-a和FOPS-b)均能明显改善小鼠学习与记忆功能并保护海马区神经元的损伤,上调AKT mRNA转录水平和蛋白表达,下调GSK3β、Tau mRNA转录水平和GSK3β、Tau、P-tau蛋白表达。研究表明阿里红多糖组分(FOPS-a和FOPS-b)通过减少海马区神经元纤维缠结从而保护神经元的损伤,发挥拮抗AD的作用。

高校科研产出与学科竞争力分析——以新疆医科大学临床学科为例

目的 分析新疆医科大学临床医学论文的发表情况,为高校制定学科发展战略提供参考。方法 采用Web of Science^(TM)、ESI和Incite数据库对新疆医科大学2016—2018年论文产出力和影响力等文献计量学各指标体系进行系统的分析。结果 共发表论文1 641篇,期刊论文占85.25%,集中发表在影响因子为1~5的期刊上;总体引文影响力4.55,被引频次7 413次,h指数为24,总体学科规范化引文影响力和期刊规范化引文影响力均低于全球水平,而相对于全球平均水平的影响力已达到了全球水平。高被引论文为9篇;进入ESI前1%的唯一学科为Clinical Medicine。结论 应要注重WOS论文在数量和质量上的同步发展,定位发展潜力学科、优化学科布局;建议加强与有强大科研实力团队的合作,还需要引导广大师生规范署名和填写机构名称。

阿里红多糖减弱β淀粉样蛋白25-35(Aβ25-35)致BV-2细胞的神经炎症反应

目的探讨阿里红多糖(Fomes officinals Ames polysaccharide,FOPS)及多糖纯化组分(FOP-a)对小胶质细胞(BV-2)炎症反应的抑制作用。方法采用声淀粉样蛋内毒性片段(amyloid-β25-35,Aβ25-35)(40μg/mL)诱导小胶质细胞BV-2活化,建立炎症反应模型,利用四甲基偶氮唑蓝法检测细胞存活率,并用酶联免疫法考察FOPS及FOP-a对Aβ25-35诱导的BV-2细胞产生的IL-1及TNF-α炎症因子的影响;LDH试剂盒检测BV-2细胞中乳酸脱氢酶活性表达变化;采用QPCR方法检测FOPS及FOP-a对BV-2细胞中EL-6、TNF-a、MCP-1、iNOS、COX-2及NF-κB等基因mRNA表达的影响;采用蛋白印迹方法检测FOPS及FOP-a对BV-2细胞中iNOS及COX-2蛋甶表达的影响。结果 FOPS及FOP-a可抑制Aβ25-35诱导的BV-2细胞IL-1及TNF-α炎症因子的释放和LDH活性表达(P<0.05)。FOPS及FOP-a显著抑制EL-6、TNF-a、MCP-1、iNOS、COX-2及NF-κB等基因mRNA表达(P<0.05)。FOPS及FOP-a抑制促炎因子iNOS、COX-2的蛋白表达(P<0.05)。结论阿里红多糖及纯化组分可明显减轻Aβ25-35诱导下产生的小胶质细胞BV-2的神经炎症反应。

阿里红多糖及其组分对RAW264.7巨噬细胞中MAPK信号途径的影响

目的研究阿里红粗多糖(FOPS)及其纯化组分(FOPS-a)对RAW264.7巨噬细胞MAPK(mitogen-activated protein kinases)信号途径的影响。方法不同浓度(50、100、200μg/ml)的FOPS及FOPS-a干预RAW264.7巨噬细胞24 h,采用RT-qPCR法和Western blot法检测MAPK信号通路中p38丝裂原激活蛋白激酶(p38 mitogen-activated protein kinases,p38 MAPK)、胞外信号调节激酶(extracellular signal-regulated kinase,ERK)和c-Jun氨基末端激酶(c-Jun NH2-terminal kinase,JNK)的mRNA表达和相应磷酸化蛋白质含量;加入MAPK特异性抑制剂(PD98059、SP600125、SB203580)后,Western blot法检测上述蛋白质的磷酸化水平,ELISA法检测巨噬细胞的TNF-α分泌量。结果与空白对照组相比,不同浓度的FOPS及FOPS-a可以显著提高p38、ERK mRNA表达量及其磷酸化蛋白质的含量(P<0.05);3种抑制剂均能显著降低FOPS及FOPS-a诱导的ERK1/2、p38蛋白磷酸化以及TNF-α分泌量的增加(P<0.05)。结论FOPS及FOPS-a可以活化ERK1/2、p38 MAPK信号转导通路而参与RAW264.7巨噬细胞的免疫调节作用。

阿里红多糖对APP/PS1双转基因小鼠神经损伤的保护作用

目的:探讨阿里红多糖对APP/PS1双转基因阿尔茨海默病小鼠的神经保护作用。方法:将SPF级40只3月龄APP/PS1双转基因雄性小鼠随机分成5组,分别为模型组、盐酸多奈哌齐0.65 mg/kg组,阿里红多糖50 mg/kg、100 mg/kg、200 mg/kg组;8只C57小鼠作为正常对照组。连续灌胃给药90 d。采用Morris水迷宫法测定小鼠空间学习记忆能力,通过比色法测定小鼠脑组织中SOD、GSH-Px、AchE活性和MDA含量的变化;采用HE染色观察小鼠脑神经元形态和脑组织病理学变化;刚果红染色法和免疫印迹法检测各组小鼠脑组织中与神经元损伤相关的APP、Aβ1-40,以及TrkA的含量变化。结果:在水迷宫实验中,相比正常组小鼠,模型组小鼠的学习记忆能力均有所下降,海马组织内SOD、GSH-Px、AchE酶活性明显下降,MDA含量明显升高;与模型组相比,阿里红多糖各组小鼠活动量均增加,学习记忆能力得到不同程度的恢复,SOD、GSH-Px、AchE活性升高, MDA含量降低。在免疫组化染色和免疫印迹实验中,相比正常对照组小鼠,模型组小鼠(0.5%CMC)的脑组织中明显可见坏死的神经元,APP、Aβ1-40蛋白沉积数量增多,TrkA含量下降;而阿里红多糖给药各组神经元数量不同程度增多,体积变大,坏死情况得以不同程度改善,APP、Aβ1-40含量降低,TrkA含量升高。结论:天然药物阿里红多糖能明显改善阿尔茨海默病AD小鼠的学习记忆能力,促进神经元生长,对AD小鼠具有神经保护作用。

阿里红多糖对阿尔茨海默症小鼠认知功能的作用机制研究

目的考察阿里红多糖(FOPS)改善淀粉样前体/早老素(APP/PS1)阿尔茨海默症小鼠的认知功能及潜在机制。方法C57BL/6J雄性小鼠作正常组;根据体重将APP/PS1双转基因雄性小鼠随机分为4组:模型组、对照组、FOPS-a实验组和FOPS-b实验组,每组8只。模型组正常饲养,对照组给予0.65 mg·kg^(-1)盐酸多哌奈齐,FOPS-a实验组给予60 mg·kg^(-1) FOPS-a,FOPS-b实验组给予60 mg·kg^(-1) FOPS-b,灌胃给药;qd,连续给药3个月。用Morris水迷宫实验检测小鼠学习记忆能力,实时荧光定量-聚合酶链反应法测定海马区糖原合成酶激酶-3(GSK3α)、淀粉样前体蛋白(APP)、β淀粉样蛋白(Aβ)基因转录情况,蛋白质印迹法检测GSK3Α、APP、Aβ_(1-42)、早老素(PS-1)蛋白的表达。结果模型组、正常组、对照组、FOPS-a组、FOPS-b剂量组第4天逃避潜伏期分别为(48.29±10.49),(27.36±17.25)(28.91±20.31),(23.21±17.60)和(24.25±16.40)s;这5组的GSK3αmRNA转录水平分别为7.17±0.46,1.03±0.27,3.11±0.45,4.15±0.67和4.41±0.43;这5组APP mRNA转录水平分别为1.12±0.04,0.36±0.02,0.40±0.04,0.45±0.07和0.50±0.08;AβmRNA转录水平分别为1.12±0.04,0.24±0.10,0.44±0.06,0.45±0.07和0.50±0.08;蛋白结果的趋势与基因一致。上述指标,模型组与正常组比较、实验组与模型组相比,差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论阿里红多糖组分能够改善APP/PS-1转基因小鼠学习记忆障碍,其机制可能与抑制GSK3α,APP,Aβ_(1-42),PS-1蛋白表达和降低海马区Aβ_(1-42)沉积有关。