基于活性物得率及抗氧化性和安全评价的罗勒蒲公英复方浸提工艺优化

采用单因素及Box-Behnken响应面设计,以总酚、总黄酮及固形物得率及三者总评“归一值”为评价指标,对罗勒、蒲公英、藿香、玫瑰、陈皮等药材浸提工艺进行优化,最佳提取工艺为:料液比1∶30g/mL,超声20 min,提取温度100℃,提取时间92 min,提取2次,在此条件下总酚、总黄酮、固形物得率为4.46%,7.12%,31.37%;平行验证试验(RSD <2%)表明该工艺稳定、可靠、具有一定的实际运用价值。体外抗氧化活性和安全性试验表明,该水提取物浓度在5 mg/mL时对DPPH、O_(2)-·、·OH等自由基清除率可达88.77%、62.03%、33.96%,对Fe^(3+)亦有一定的还原能力,且具量效关系;雌雄昆明小鼠最大耐受剂量(MTD)均大于10 g/kg,提取物为安全无毒品(MTD≥10g/kg)。本研究结果为开发利用罗勒蒲公英复方固体饮料提供了相应基础,并可为相应保健食品的研发提供参考。

黑果枸杞总黄酮对HepG-2细胞增殖与凋亡的影响

目的探究黑果枸杞总黄酮抗肝癌作用的可能机制。方法采用噻唑蓝比色法检测不同浓度黑果枸杞总黄酮对LO-2细胞存活率和HepG-2细胞抑制率的影响,确定最佳干预时间和浓度,再以确定的3个质量浓度黑果枸杞总黄酮(25、50和100μg/mL)和20μg/mL顺铂给药48 h,使用细胞仪检测细胞凋亡和周期变化,通过检测细胞凋亡相关酶的活性,初步考察黑果枸杞总黄酮抗肝癌的作用机制。结果黑果枸杞总黄酮对HepG-2细胞的增殖有一定的抑制作用,抑制率可达98.27%。黑果枸杞总黄酮诱导HepG-2肝癌细胞周期阻滞于S期,使细胞停止分裂和增殖,同时可通过上调Bcl-2相关X蛋白(Bcl-2 associated X protein,Bax)和半胱氨酸蛋白酶3(cysteine proteinase-3,Casp-3)及下调B细胞淋巴瘤因子2(B-cell leukemia-2,Bcl-2)的表达水平来诱导HepG-2肝癌细胞的凋亡。结论黑果枸杞总黄酮对肝癌细胞具有一定的抑制作用。本研究可为后期进一步研究黑果枸杞抗肝癌作用机制提供依据。

阿育魏实挥发性成分提取工艺参数筛选及其体外活性研究

非酒精性脂肪性肝病(Non-alcoholic fatty liver disease,NAFLD)是指肝细胞内以脂肪变性为主要特征的临床病理综合征,而资料显示阿育魏实具有一定的降脂活性,可以改善NAFLD。因此本研究采用Box-Benhnken响应面法筛选阿育魏实挥发性成分(Trachyspermum ammi(L.)Sprague volatile constituent,TSVC)提取参数并初步考察其体外活性研究。在单因素基础上,采用四因素三水平响应面法筛选阿育魏实挥发性成分的提取工艺参数,分别建立NAFLD和胰岛素抵抗细胞模型并进行干预,微量法检测细胞葡萄糖消耗量、TG、TC、AST、ALT,进行油红染色考察其改善非酒精性脂肪肝和胰岛素抵抗活性。当TSVC最佳提取条件为料液比9mL/g、浸泡时间12h、超声时间15min和提取时间6.5h,其提取率为2.12%;体外实验结果表明:与模型组相比,阿育魏实挥发性成分中、高剂量组降低细胞内的TG、TC、AST、ALT含量;增加胰岛素抵抗模型细胞的葡萄糖消耗量;油红染色结果中看出可以减少脂质沉积。总之,阿育魏实挥发性成分在一定浓度范围内可改善非酒精性脂肪肝和胰岛素抵抗,为其后期研究提供理论依据和实验基础。

基于生物信息学探讨黑果枸杞总黄酮治疗非酒精性脂肪肝的作用机制

本文旨基于生物信息分析揭示非酒精性脂肪肝的关键基因,并基于超高效液相色谱-质谱联用技术(UPLC/MS-MS)、生物信息及分子对接技术识别并探究黑果枸杞总黄酮成分及其治疗非酒精性脂肪肝(NAFLD)的作用机制,为其药效物质基础研究提供参考依据。本研究用GSE89632数据集,其中包括39名NAFLD患者和24名健康对照组。Limma包分析得到3375个差异基因,再通过WGCNA分析得到19个模块和95个最相关基因。黑枸杞总黄酮通过进行定性分析和靶点预测得到71个活性成分和375个相关基因。疾病基因和成分靶点基因交集得到24个基因,用CytoHubba筛选出10个Hub基因。通过DAVID数据库得到KEGG通路9条,GO分析条目33条。分子对接结果表明,大多数黑果枸杞总黄酮成分与关键靶点具有较好的结合力。生存分析结果中VEGF与HCC的生存分析密切相关。免疫细胞浸润相关性评估分析结果表明,Hub基因与幼稚B细胞、γδT细胞、单核细胞等8种免疫细胞相关。本研究揭示了非酒精性脂肪肝的关键基因、明确了黑果枸杞总黄酮成分、预测了黑枸杞总黄酮成分治疗非酒精性脂肪肝的作用机制并初步验证了其靶点,为深入阐明黑果枸杞总黄酮的药效物质基础及作用机制提供了实验及理论依据。

复合益生菌酸马奶的研制及其对肠道菌群的影响

以感官评分及酸度为评价指标,在单因素试验基础上进行正交试验确定复合益生菌酸马奶配方和工艺,考察其初步稳定性,初步探讨对肠道菌群的影响。结果说明添加2%量的菌粉和5种益生菌,温度42℃,发酵20 h复合益生菌酸马奶品质较好、在15 d之内酸度和乳酸菌数量均合格,初步稳定性良好。复合益生菌酸马奶低剂量组与正常对照组相比,Simpson指数具有统计学意义(P<0.05),与传统酸马奶组、复合益生菌酸马奶高、中剂量组相比,Shannon指数降低(P<0.05),低剂量的复合益生菌酸马奶提高肠道菌群的多样性。复合益生菌酸马奶高、中剂量组在门水平上,显著升高了拟杆菌门(Bacteroidetes)丰度,在属水平上显著升高了Duncaniella丰度;复合益生菌酸马奶高、中、低剂量组在属水平上显著降低了Turicibacter丰度。结果表明最优条件下制备的复合益生菌酸马奶有益生调节作用。