自然杀伤细胞及CD8^(+)T细胞缺失对泡球蚴感染小鼠肝功能的影响

目的观察自然杀伤(NK)细胞、CD8^(+)T细胞的缺失对泡球蚴感染小鼠肝功能的影响。方法选取6~8周龄,体重为18~20 g的SPF级雌性C57BL/6小鼠共30只,按随机数字表法将其分为对照组、泡球蚴感染组、NK细胞清除组、NK细胞清除对照组、CD8^(+)T细胞清除组、CD8^(+)T细胞清除对照组,每组5只。泡球蚴感染组、NK细胞清除组、NK细胞清除对照组、CD8^(+)T细胞清除组、CD8^(+)T细胞清除对照组均经门静脉注射多房棘球绦虫头节(10个头节/μl,200μl),对照组经门静脉注射等量生理盐水。实验第4周,NK细胞清除组腹腔注射NK细胞清除抗体,100μg/次,1次/周,同时NK细胞清除对照组腹腔注射等量IgG2a同型对照抗体;CD8^(+)T细胞清除组腹腔注射CD8^(+)T细胞清除抗体200μg/次,1次/周,同时CD8^(+)T细胞清除对照组腹腔注射等量IgG2b同型对照抗体。实验第12周采集六组外周血分离血浆并检测小鼠肝肾功能指标总蛋白(TP)、碱性磷酸酶、谷丙转氨酶(GPT)、谷草转氨酶(GOT)、血清白蛋白(ALB)、乳酸脱氢酶、尿酸、尿素、肌酐。结果泡球蚴感染组外周血GPT、GOT高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。NK细胞清除组外周血GPT、GOT高于NK细胞清除对照组,TP、ALB低于NK细胞清除对照组,差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。CD8^(+)T细胞清除组外周血TP低于CD8^(+)T细胞清除对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论泡球蚴感染会导致一定程度的肝功能损伤,尤其在NK细胞耗竭状态下肝功能损伤会进一步加重。

阻断NKG2A共抑制分子在抗肿瘤免疫效应中的研究进展

自然杀伤(NK)细胞在对病毒的先天防御以及控制肿瘤生长和转移中发挥着重要作用,NK细胞的免疫效应是由其表面的激活性和抑制性受体所调控的。NKG2A是一种在NK细胞和细胞毒性T淋巴细胞(CD8+T)表面均表达的抑制性受体。在多种肿瘤研究中均发现肿瘤浸润淋巴细胞表面NKG2A表达上调及肿瘤细胞表面其配体人类白细胞抗原E(HLA-E)表达上调。NKG2A与其配体HLA-E的表达上调与肿瘤的免疫逃逸、不良预后有关,且阻断NKG2A可有效缓解NK、CD8^(+)T细胞的免疫学效应,为阻断NKGA/HLA-E轴的单克隆抗体作为新的抗肿瘤免疫治疗的药物研究奠定基础。

肝胆外科教学中不同教学模式的运用探究

目的观察肝胆外科教学中采用不同教学模式的临床效果。方法选取2019年1月-6月期间在我院肝胆外科实习的60名实习生展开研究,随机将其划分为两组,对照组(n=30名)采用PBL教学模式,研究组(n=30名)给予PBL+CBL教学法展开教学,对比两组实习生理论知识、病理分析等指标情况。结果研究组与对照组病例分析成绩依次为(27.35±1.06)分、(21.19±0.94)分,且研究组基本技能及理论知识成绩高于对照组,差异存在统计学意义(P<0.05)。结论肝胆外科实习生接受PBL+CBL教学模式,有利于激发实习生的学习兴趣和热情,提升实习生理论知识及基本技能考核成绩,具有推广应用的价值。

肝泡型棘球蚴病病灶微环境摄取氟代脱氧葡萄糖的特征研究

目的:研究肝泡型棘球蚴病病灶微环境在正电子发射计算机断层显像(PET/CT)中摄取氟代脱氧葡萄糖(^(18)F-FDG)的特征。方法:采用前瞻性研究方法,收集2017年1月至2019年12月在新疆医科大学第一附属医院治疗并行PET/CT检查的39例肝泡型棘球蚴病患者临床资料,其中男性17例,女性22例,中位年龄34岁,年龄范围15-65岁。根据CT所示的钙化和液化程度将患者病灶分6组:A-无钙化+无液化(n=7);B-明显钙化+无液化(n=7);C-部分钙化+部分液化(n=10);D-明显钙化+部分液化(n=5);E-部分钙化+近全液化(n=5);F-明显钙化+近全液化(n=5)。基于PET/CT测量病灶微环境摄取比值(TBR)及宽度W值,应用Mann-Whitney检验对各组进行比较。进行相关分析。结果:A-F各组TBR值依次为[M(Q_(1),Q_(3))]4.40(3.66,7.03)、2.55(1.69,3.60)、3.73(3.37,5.21)、2.90(2.75,3.60)、3.80(3.49,6.36)、2.49(2.21,3.97),其中A>B、A>D、A>F、C>B、E>B(U=3.0、4.0、4.5、11.0、5.0,P<0.05),从各组病灶的钙化程度的角度分析发现钙化越轻,TBR值越大。A-F各组的W值依次为[M(Q1,Q3)]12.5(10.0,19.5)、11.2(10.5,12.5)、12.2(10.9,13.2)、7.8(7.3,9.3)、10.0(7.3,13.4)、7.3(6.8,7.6)mm,其中A>D、A>F、B>D、B>F、C>D、C>F(U均为0,均P<0.05)。从各组病灶的钙化和液化程度的角度分析发现,钙化越轻,W值越大;液化越重,W值越小。TBR值与W值呈线性相关关系(r=0.4136,P<0.05)。结论:可根据基于^(18)F-FDG摄取的不同肝泡型棘球蚴病灶类型进行个体化选择根治性手术切缘和取材。

肝泡型棘球蚴病病灶微环境中免疫细胞浸润范围指导研究取材的前瞻性研究

目的研究肝泡型棘球蚴病不同类型病灶的病灶微环境(LME)中免疫细胞浸润范围,为基础研究中实验组和对照组肝组织取材提供依据。方法采用前瞻性研究方法,2017年1月至2019年12月,收集在新疆医科大学第一附属医院确诊并经外科治疗满足多位点取材法(MSS法)取材的肝泡型棘球蚴病患者作为研究对象。共纳入26例,年龄为34(15,65)岁,男女性别比为12/14。根据增强计算机断层成像(CT)所示的钙化和液化程度将病灶分组:A组为无钙化+无液化;B组为明显钙化+无液化;C组为部分钙化+部分液化;D组为明显钙化+部分液化;E组为部分钙化+近全液化;F组为明显钙化+近全液化。在LME中由近及远每隔5 mm留取肝组织,进行CD3、CD19、CD68免疫组织化学染色以及纤维组织Masson染色,经病理学评估确定免疫细胞浸润丰度锐减的层面作为最大浸润范围(width,W值)。实验组保守估计最大取材范围为W值第1四分位数(Q_(1))整数位数值,对照组保守估计最小取材范围为W值第3四分位数(Q_(3))小数进位后整数位数值加5 mm。通过Kruskal-Wallis H检验和Mann-Whitney U检验对检测数据进行统计学分析。结果A~F组W值依次为20.0(12.5,22.5)、15.0(10.0,15.0)、10.0(10.0,15.0)、5.0(5.0,10.0)、12.5(6.3,15.0)、5.0(5.0,10.0)mm,其中A>D、A>F、C>D、C>F组(均P≤0.05);从钙化角度W值比较:A>C+E、A>B+D+F组(均P<0.05);从液化角度W值比较:A+B>C+D、A+B>E+F组(均P<0.05)。在A~F组中,实验组保守估计取材最大距离分别为12.0、10.0、10.0、5.0、6.0、5.0 mm,对照组保守估计取材最小距离分别为28.0、20.0、20.0、15.0、20.0、15.0 mm。结论肝泡型棘球蚴病病灶类型钙化越弱/液化越轻提示在LME中具有更宽的免疫细胞浸润范围;在为基础研究获取肝组织时,要根据不同类型病灶个体化取材以提高研究质量。

miR-1、miR-133b与肝泡型棘球蚴病患者肝纤维化的关系

目的探讨肝泡型棘球蚴病患者肝纤维化与微小核糖核酸(microRNA,miR)-1、miR-133b的相关性。方法选择2020年10月至2021年4月在新疆医科大学第一附属医院明确诊断为肝泡型棘球蚴病(9例)、肝硬化(9例)、肝细胞癌(5例)患者作为研究对象,并以同期健康志愿者为对照(10例),采集所有对象外周血样本制备血浆,经实时荧光定量PCR法检测外周血miR-1、miR-133b表达量;同时,自5例肝泡型棘球蚴病患者采集肝脏病灶周围组织(近端)、距病灶约5 cm处相应组织(远端),并采用免疫组织化学染色法检测肝泡型棘球蚴病患者肝脏病灶近、远端的细胞活化相关指标[细胞周期蛋白D1(CyclinD1)、细胞周期蛋白依赖性激酶1(CDK1)、α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)],纤维化指标[Ⅰ、Ⅲ型胶原蛋白(CollagenⅠ、CollagenⅢ)],转化生长因子β1(TGF-β1)信号通路相关基因[TGF-β1,Ⅰ、Ⅱ型转化生长因子β1受体(TGF-β1RⅠ、TGF-β1RⅡ)]及其下游相关蛋白(SMAD2、SMAD3)表达情况。结果实时荧光定量PCR结果显示,肝泡型棘球蚴病、肝硬化、肝细胞癌和对照组人群外周血miR-1、miR-133b表达水平比较,差异均有统计学意义(H=16.54、28.40,均P<0.001);其中,肝泡型棘球蚴病组miR-1、miR-133b表达水平均高于对照组、肝硬化组(均P<0.05)。肝泡型棘球蚴病患者病灶近端和远端CDK1(0.46±0.02、0.42±0.01),α-SMA(0.54±0.09、0.51±0.07),TGF-β1(0.55±0.15、0.51±0.13),TGF-β1RⅠ(0.58±0.09、0.57±0.08),TGF-β1RⅡ表达水平(0.40±0.05、0.39±0.05)比较,差异均有统计学意义(t=5.56、3.17、3.18、4.27、5.65,P=0.005、0.034、0.034、0.024、0.011);CyclinD1、CollagenⅠ、CollagenⅢ、SMAD2、SMAD3表达水平比较,差异均无统计学意义(t=3.06、3.06、2.86、1.43、1.50,P=0.055、0.055、0.064、0.247、0.230)。Pearson相关分析结果显示,肝泡型棘球蚴病患者外周血miR-1与肝脏病灶近端TGF-β1RⅠ表达水平呈正相关(P=0.001);miR-1、miR-133b与CDK1、α-SMA、TGF-β1、TGF-β1RⅡ表达水平均无相关性(均P>0.05)。结论肝泡型棘球蚴病患者肝脏病灶近端TGF-β1信号通路相关因子表达上调;外周血miR-1和miR-133b表达上调,且miR-1与肝脏病灶近端TGF-β1RⅠ表达水平呈正相关,提示miR-1可能促进肝泡型棘球蚴病肝纤维化发生。

快速康复在胆道系统疾病患者ERCP围手术期饮食中的应用

快速康复外科，又称加速康复外科（enhanced recovery after surgery，ERAS），是应用一系列经过循证医学证实有效的围手术期处理方法，最大限度的减少患者的应激反应和器官功能损害，尤其在腹部手术中。目前在ERCP术后饮食管理未见相关应用报道。

多学科协作诊治模式在难治性肝泡型包虫病个体化治疗中的应用

目的 探讨多学科协作诊治模式在难治性肝泡型包虫病个体化治疗中的应用及其优势.方法 回顾性分析新疆医科大学第一附属医院2005年1月至2013年12月开展多学科协作诊治模式以来收治的侵犯重要血管及胆道和（或）脑、肺转移的137例难治性肝泡型包虫病患者临床资料.根据是否在多学科诊治组会诊,将患者分为多学科协作诊疗组（MDT组）49例和专业诊疗组（非MDT组）88例.MDT组分为手术治疗组（A组）26例和非手术治疗组（B组）23例,B组中后期根治性手术切除13例.非MDT组分为手术治疗组（a组）61例和非手术治疗组（b组）27例,b组中后期根治性手术切除5例.比较A组与a组患者确诊时间、围手术期住院时间、手术时间、术中出血量、术后带管时间、术后住院时间、术后并发症发生率、手术根治率.比较B组与b组后期根治性手术切除率.随访时间1～8年.计量资料采用Mann-Whitney秩和检验,计数资料采用x2检验.结果 A组患者围手术期住院时间、术后住院时间、总住院时间明显短于a组（P＜0.05）,术后晚期并发症（再次出现黄疸、吻合口狭窄及复发）低于a组（P＜0.05）,手术根治率高于a组（P＜0.05）.入院到确诊时间、手术时间、术中出血量、术后带管时间、术后早期并发症（胆漏、胸腔及腹腔积液、吻合口漏）,A组与a组比较差异无统计学意义（P＞0.05）.B组单纯化疗或置管引流＋化疗等综合治疗后,后期根治性手术切除率明显高于b组（P＜0.05）.结论 多学科协作诊治模式综合药物、介入、手术治疗的优点,制定最佳个体化治疗方案,能够提高难治性肝泡型包虫病手术根治率,减少术后并发症,改善已失去根治手术机会患者的生活质量,甚至创造根治性手术切除机会.

多房棘球蚴虫体蛋白介导NK细胞表面受体NKG2A对NK细胞功能的影响

目的探讨多房棘球蚴虫体蛋白(Emp)介导自然杀伤(NK)细胞表面抑制性受体NK细胞凝集素样受体亚家族C成员A (NKG2A)对NK细胞功能的影响。方法采集健康志愿者外周血,纯化NK细胞,按0.3×10^(6)个/孔(重悬至100μl RPMI 1640培养基),加至96孔细胞培养板,空白对照组不作处理,阴性对照组加入1μg/ml白细胞介素-12 (IL-12)和IL-15各1μl,Emp组加入1μg/ml IL-12、IL-15各1μl和7 081μg/ml Emp 2.5μl,转化生长因子-β1 (TGF-β1)组(阳性对照组)加入1μg/ml IL-12、IL-15、TGF-β1各1μl,不足总量(104.5μl)的用RPMI 1640培养基调整,分别体外刺激培养24 h后,利用流式细胞术检测NK细胞表面受体NKG2A表达情况以及NK细胞和NKG2A^(+)NK细胞分泌细胞因子[γ干扰素(IFN-γ)、颗粒酶B、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、穿孔素]的功能变化。采用单因素方差分析法进行差异性分析,LSD或Dunnett检验法分析组间差异。结果 Emp组和TGF-β1组表达NKG2A的NK细胞百分比分别为(3.40±1.53)%、(3.00±1.07)%,均高于阴性对照组的(0.70±0.56)%(P<0.01)。Emp组分泌IFN-γ的NK细胞百分比为(42.38±15.94)%,与阴性对照组的(61.18±7.18)%比较差异无统计学意义(P>0.05);Emp组分泌IFN-γ的NKG2A^(+)NK细胞百分比为(25.25±11.57)%,低于阴性对照组的(48.88±12.78)%(P<0.05);两组分泌颗粒酶B、TNF-α、穿孔素的NK细胞和NKG2A^(+)NK细胞百分比差异均无统计学意义(P>0.05)。TGF-β1组分泌IFN-γ的NK细胞和NKG2A^(+)NK细胞百分比分别为(12.77±2.56)%、(15.17±6.34)%,均低于对应阴性对照组(P<0.01);两组分泌颗粒酶B、TNF-α、穿孔素的NK细胞和NKG2A^(+)NK细胞百分比之间差异均无统计学意义(P>0.05)。TGF-β1组NK细胞经TGF-β1刺激后分泌的IFN-γ百分比低于Emp组,但两者差异无统计学意义(P>0.05)。结论 Emp通过介导NK细胞表面受体NKG2A的表达上调而抑制NK细胞分泌IFN-γ的功能。

离体肝切除和自体肝移植术治疗终末期肝多房棘球蚴病的住院医疗费用分析

收集2010-2018年新疆医科大学第一附属医院因终末期肝多房棘球蚴病实施离体肝切除和自体肝移植术(ELRA)治疗的患者人口学信息和相关临床病历资料数据,根据ELRA术前是否接受相应的诊疗分为6个组,无相关病史(A组)、抗虫化疗史(B组)、抗虫化疗+药物保肝史(C组)、穿刺或内镜减黄+药物保肝史(D组)、肝血管介入治疗+抗虫化疗史(E组)、肝切除+抗虫化疗史(F组)。采用Mann-Whinty检验比较分析各组之间医疗费用差异。共82例患者接受ELRA手术,男、女性别比为39:43,平均年龄(36.1±11.8)岁,主要民族有藏族、哈萨克族和汉族,患者主要来自新疆、西藏和四川。肝多房棘球蚴病患者接受ELRA治疗的医疗费用主要包括西药费、检查类费、材料费、手术费和特殊材料费等。82例患者平均总费用为(241 155.0±119 746.5)元,其中西药费占比最高(41.1%),其次是检查费(15.7%)、材料费(13.4%)、手术费(9.6%)、特殊材料费(7.5%)。C、D组总费用高于其他4组(P<0.01);西药费、检查费、护理费和治疗费C、D组高于其他4组(P<0.05);特殊材料费、血费、抢救费和床位费C、D组高于A组(P<0.05)。术前无相关病史者总体费用和各项费用均比有其他相关病史者低;术前有黄疸/肝功能不全因素可增加总体费用及大部分子项费用。