重组α-Klotho蛋白对环磷酰胺诱导的卵巢早衰小鼠卵巢功能的保护作用

目的探究重组α-Klotho蛋白对化疗药物环磷酰胺(CTX)诱导的卵巢早衰(POF)小鼠卵巢功能的保护作用。方法将55只雌性C57BL/6小鼠随机分为对照组(Control组,n=10)、CTX诱导的卵巢早衰组(POF组,n=15)、重组α-Klotho蛋白治疗组(POF+α-Klotho组,n=15)和雌二醇治疗组(POF+Estradiol组,n=15),其中POF+Estradiol组为阳性对照组。采用酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测各组小鼠血清中卵巢激素[卵泡刺激素(FSH)、黄体生成素(LH)、雌二醇(E2)和孕酮(P)]浓度;取小鼠新鲜卵巢组织,采用试剂盒检测卵巢组织中氧化应激因子活性氧(ROS)、超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)和过氧化氢酶(CAT)的表达水平;采用Western blot法检测卵巢组织中凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax、caspase-3与氧化应激信号通路Nrf2/HO-1中Keap1、Nrf2和HO-1的蛋白表达水平。结果与Control组相比,POF组、POF+α-Klotho组和POF+Estradiol组卵巢组织中ROS、MDA水平和Bax、caspase-3、Keap1蛋白表达水平升高(P<0.05);SOD、CAT水平和Bcl-2、Nrf2和HO-1蛋白表达水平降低(P<0.05);血清中FSH、LH的表达水平升高(P<0.05),E2、P的表达水平降低(P<0.05)。与POF组相比,POF+α-Klotho组和POF+Estradiol组小鼠卵巢组织中ROS、MDA水平和Bax、caspase-3、Keap1蛋白表达水平降低(P<0.05);SOD、CAT水平和Bcl-2、Nrf2和HO-1蛋白表达水平升高(P<0.05);血清中FSH、LH的表达水平降低(P<0.05),E2、P的表达水平升高(P<0.05)。结论重组α-Klotho蛋白可能通过抑制氧化应激水平和颗粒细胞凋亡来保护CTX诱导的POF小鼠的卵巢功能,这可能与Nrf2/HO-1信号通路的激活有关。

心理应激对小鼠脂肪组织黄嘌呤氧化酶表达、活性及相关指标的影响

目的:探讨心理应激对小鼠脂肪组织黄嘌呤氧化酶表达、活性及相关指标的作用。方法:雄性无特定病原体(SPF)级20只昆明小鼠随机分2组(每组10只),即慢性束缚应激(Stress)组和正常对照(Control)组。Stress组小鼠每天在自制式束缚器中限制活动2 h,其余时间两组小鼠在相同环境中自由饮水摄食,实验持续14 d,取血和白色脂肪组织(WAT);观察脂肪组织病理学改变,检测WAT中黄嘌呤氧化酶(XO)和烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸氧化酶4(Nox-4)的蛋白水平,检测WAT组织中XO、Nox-4、超氧化物歧化酶(Mn SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、过氧化氢酶(CAT)、脂联素(ADPN)、单核细胞趋化蛋白1(MCP-1)、白介素6(IL-6)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、胰岛素受体底物1(IRS-1)、葡萄糖转运蛋白4(GLUT-4)、组织因子(TF)、纤溶酶原激活物抑制物1(PAI-1)的mRNA表达,检测血清和WAT组织中XO酶活性以及血清甘油三酯(TG)、总胆固醇(T-Cho)、游离脂肪酸(FFA)、尿酸(UA)的含量。结果:与control组比较,stress小鼠腹股沟WAT组织中XO免疫染色阳性着色细胞黄褐色沉淀深且丰富,WAT中出现大量的单核细胞、中性粒细胞、嗜酸性粒细胞及浆细胞浸润反应和炎症性的改变;血清XO浓度、WAT组织中XO mRNA水平和XO的酶活性显著升高(P<0.01),血清游离脂肪酸(FFA)和尿酸(UA)的含量显著增高(P<0.01),WAT组织中Nox-4蛋白、MCP-1、IL-6、TNF-α、TF、PAI-1mRNA的表达水平显著增高(P<0.01),而Mn-SOD、GSH-Px、CAT、ADPN、IRS-1和GLUT-4的mRNA水平则显著降低(P<0.01)。结论:心理应激可诱发脂肪XO过量表达及其活性增高,进而引起脂肪炎症、糖代谢及凝血酶原异常等反应。

心理应激诱导ROS产生在食管上皮细胞间隙增宽发生中的作用机制

目的建立小鼠慢性束缚应激(Stress)模型,探讨心理应激诱导活性氧(ROS)介导的食管紧密连接(TJ)蛋白表达以及在细胞间隙增宽(DIS)发生中的影响。方法20只雄性SPF级昆明小鼠随机分两组(每组10只),即慢性束缚应激(Stress)组和正常对照(Control)组。Stress组小鼠每天在自制式束缚器中限制活动2h,其余时间两组小鼠在相同环境中自由饮水摄食,实验持续14天。通过HE染色在光学显微镜下观察食管上皮组织病理学改变并进行间距测量。采用免疫组化方法检测还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸氧化酶4(Nox-4)在小鼠食管中的表达,进一步通过酶联免疫吸附(ELISA)、蛋白质印迹(WB)法检测Nox-4蛋白表达量,并通过实时定量RT-PCR法检测食管组织中ROS指标(Nox-4、8-OHdG、MDA)、抗氧化蛋白(Nrf-2、HO-1)及TJ蛋白重要指标(Claudin-1、Claudin-4、Occludin、ZO-1)mRNA的表达量。结果与Control组小鼠比较,Stress组小鼠体质量增加量低于Control组(7.95±2.45 vs 11.32±2.23),差异有统计学意义(t=3.78,P<0.01)。两组小鼠光镜下测量的平均细胞间隙分别为Control组0.71±0.18μm、Stress组1.18±0.12μm,与Control组比较,Stress组小鼠上皮细胞间距明显增宽,差异有统计学意义(P=0.000)。免疫组化结果显示,Nox-4主要表达于食管固有层、黏膜及黏膜下层,Stress组Nox-4阳性表达显著高于Control组。Stress组小鼠食管黏膜中Nox-4 mRNA相对表达水平是Control组的2.36±0.34倍,而Stress组血清Nox-4的释放浓度是Control组的2.25±0.27倍以上,差异有统计学意义(t=-11.56,P=0.000)。ELISA实验结果显示,Stress组小鼠8-OHdG(3.95±0.25 vs 1.65±0.38)和MDA(0.95±0.01 vs 2.48±0.20)的血清表达水平显著高于Control组,差异有统计学意义(t=-23.45,P=0.000)。抗氧化蛋白的RT-PCR实验结果显示,Stress组Nrf-2,HO-1的mRNA转录水平明显低于Control组的1.82±0.35倍,差异有统计学意义(t=-8.25,P=0.000);蛋白质印迹法检测显示,Stress组小鼠食管组织中Nrf-2、HO-1蛋白表达水平显著低于Control组。食管上皮组织TJ蛋白重要指标的RT-PCR实验结果显示,Stress组TJ蛋白Claudin-1、Claudin-4、Occludin及ZO-1的mRNA转录水平显著降低,分别是Control组的1.67±0.28、1.54±0.22、1.85±0.35、1.74±0.42倍,差异有统计学意义(t=-8.34、-14.78、-17.63、-12.27,P=0.000)。结论心理应激可能直接通过破坏食管氧化/抗氧化系统平衡,引起TJ蛋白的表达异常以及DIS的产生。

慢性应激诱导DPP-4表达及对脂肪炎症和代谢的影响

目的分析慢性应激诱导脂肪二肽基肽酶-4(DPP-4)表达及对脂肪炎症和糖代谢的影响。方法雄性SPF级小鼠20只随机分慢性应激(Stress)组和正常对照(Control)组。Stress组小鼠每天在自制式束缚器中限制活动2 h,实验持续14 d。采用免疫组化方法检测巨噬细胞表面标志物(CD11b)在脂肪中的表达,实时定量PCR法检测脂肪组织中DPP-4、细胞因子(Adiponectin、MCP-1、IL-6、TNF-α)及糖代谢(IRS-1、GLUT-4)等指标的mRNA的相对表达量;ELISA法检测DPP-4酶活性及GLP-1浓度。结果Stress小鼠腹部白色脂肪组织(WAT)与Control组相比显著的退缩及其重量显著降低(P<0.001)。Stress组WAT出现大量的单核细胞、中性粒细胞浸润反应和炎症性改变;Stress显著降低Adiponectin的表达,并显著增高MCP-1、IL-6、TNF-α的mRNA表达及其血液中的浓度(P<0.001);Stress组WAT组织中DPP-4 mRNA表达及其血液中的活性显著增高,而GLP-1血液中的浓度显著降低(P<0.001);Stress组WAT组织中IRS-1及GLUT-4的mRNA水平显著低于Control组(P<0.001)。结论慢性应激诱导脂肪DPP-4异常表达,进而引起脂肪炎症和糖代谢异常等反应。

炎症反应介导胃食管反流病诱发心房颤动的机制研究

目的探讨炎性因子在胃食管反流病(GERD)和心房颤动(AF)患者食管黏膜中的表达及其在AF发生中的意义.方法按照纳入、排除标准选取2017年1月至2018年6月间在新疆维吾尔自治区人民医院住院收治的50例患者设为研究组.同期完成体检的15名健康受试者设为健康对照组.研究组均行GERDQ评分、24 h动态心电图、24 h pH监测、高分辨率食管测压监测并内镜下取食管齿状线上3 cm处的局部黏膜作为标本,后续采用HE染色、免疫组化、RT-PCR、ELISA等方法分析组织炎症程度、炎性因子(IL-6、IL-8、IL-1β、TNF-α及hs-CRP)的表达及血液中的释放浓度.结果根据患者的临床表现,GERDQ评分、内镜等检查,分为GERD合并AF组(AF组)、GERD不合并AF组(非AF组)和对照组.GERDQ评分在AF组3~7分、8~10分、11~14分及15~18分等评分范围均明显高于非AF组,差异具有统计学意义(P<0.01).食管24 h pH监测发现,AF组弱酸反流(4<pH<7)次数、酸反流(pH≤ 4)次数、食管近端酸反流(%)及DeMeester评分等指标明显高于非AF组,两组间差异具有统计学意义(P<0.05).内镜检查发现,AF组胃食管连接处的食管黏膜组织大规模的糜烂、炎性渗出、水肿以及溃疡等病变.组织炎症(损伤)评分显示,AF组评分明显高于非AF组和对照组,AF组炎症评分达到高峰,并显著高于非AF组,差异具有统计学意义(P<0.01).免疫组化显示,IL-6、IL-8、IL-1β及TNF-α主要表达在食管上皮层,黏膜及黏膜下层,而AF组这些指标的表达几乎覆盖全层食管黏膜上,表示严重的组织炎症性改变.RT-PCR和ELISA结果表示,AF组显著增高炎性因子(IL-6、IL-8、IL-1β、TNF-α及hs-CRP)的mRNA相对表达量及其血液中的释放浓度,与非AF组和对照组相比,差异具有统计学意义(P<0.001).结论炎性因子在AF患者食管黏膜以及在血液中显著增高,可能是酸反流诱发AF产生的机制之一.

混合式教学法在妇科实习带教中的实施效果探究

当医学临床专业的学生完成学校的理论学习任务后,需通过临床实习将所掌握的理论知识应用到临床实践当中,这是每一位实习生都必须经历的学习阶段,该阶段的带教情况如何,直接影响到实习生能否成为一个合格的医务工作人员,独立完成临床诊疗工作。在实习带教过程中,教学方法与实习生学习效率,带教质量有着极大的关联性,本次就从妇科实习带教教学方面进行了深入探究。方法 本院妇科近些年招纳了大量的实习生,以研究内容筛选部分作为本次研究主体,共有22名,以此次带教教学方式对实习生进行小组划分,第一组为对照组,第二组是观察组,前一组给实习生开展传统带教模式教学,后一组为线上线下混合式教学法,带教老师在规定的时间内指导学生进行临床上各项内容的学习,带教结束后,需对所有实习生进行考核考评,分别进行理论考试和情景模拟考核,根据研究内容设定问卷表,对本次教学方法效果进行整体调研。结果 给所有实习生运用了一样的试卷,对他们的理论知识进行考核,经统计成绩显示,理论成绩均较为接近;实行情景模拟考核,观察组的实习生的成绩明显更为突出,通过与他们进行交谈,观察组的实习生表示,混合式教学法能够调动学习主观能动性,利于养成自主学习习惯,护患之间能够更好的沟通、交流,对知识方面的掌握和理解更扎实,而且临床思维能力、应变能力等明显提升,有比较性(P<0.05)。结论 此次针对妇科实习带教方面,运用混合式教学法进行授课,不仅能够让实习生专业水平、综合素养得到同步发展,也能保证带教质量。

心理应激对雌性小鼠胃黏膜炎症和卵巢功能早衰的影响

目的探讨心理应激对雌性小鼠胃黏膜炎症和卵巢功能的影响,以及芬吗通对其改善的作用。方法8周龄,雌性SPF级昆明小鼠随机分为正常对照(Control)组,心理应激(Stress)组和芬吗通干预(Femoston)组(每组6只);Stress组和Femoston干预组雌鼠每天在自制式束缚器中限制活动2 h,持续14 d。通过H&E染色在光镜下观察胃黏膜和卵巢组织病理学改变,采用免疫组化方法观察NADPH氧化酶-4(Nox-4)在雌鼠胃黏膜和卵巢组织中的表达,进一步通过实时定量RT-PCR和酶联免疫吸附法分别检测雌鼠卵巢组织及血液中Nox-4、抗氧化酶[锰超氧化物歧化酶(Mn-SOD)、胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、Catalase]及炎性因子[白细胞介素-1β(IL-1β)、IL-6、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)]等指标的mRNA表达及其在血液释放浓度。结果Stress雌鼠胃黏膜出现中性粒细胞和淋巴细胞等免疫细胞浸润现象和炎症改变;stress组胃黏膜炎症评分显著高于Control组(P<0.01)。Stress雌鼠胃黏膜组织中Nox-4大量表达,同时其mRNA表达水平显著上升(P<0.01)。Stress显著上升胃黏膜炎性因子(IL1-β、IL-6、TNF-α)的mRNA表达水平(P<0.01)。Stress组雌鼠卵巢组织出现原始卵泡(pr)、初级卵泡(prm)、次级卵泡(sf)、炎症(ii)及卵泡结构的变形(fd)等卵泡微结构明显的改变,而芬吗通干预显著改善此卵泡结构的异常。Stress雌鼠卵巢组织中Nox-4主要表达于卵泡细胞中;其mRNA表达水平显著上升(P<0.001);同时,stress雌鼠血液中Nox-4的含量显著上升(P<0.001)。芬吗通干预能够有效降低心理应激雌鼠卵巢组织和血液中Nox-4的高表达(P<0.01)。Stress雌鼠显著增高血液中的促卵泡激素(FSH)及黄体生成素(LH)水平;并降低雌二醇(E2)和孕酮(Prog)的水平(P<0.001)。芬吗通干预显著改善E2的水平(P<0.01)。Stress雌鼠显著降低卵巢组织抗氧化酶(Mn-SOD、GSH-Px、Catalase)的mRNA水平(P<0.001);芬吗通干预显著增高抗氧化酶的表达水平(P<0.01)。Stress雌鼠显著增高血液中以及卵巢组织中IL-1β、IL-6及TNF-α的含量及其mRNA表达水平(P<0.001),芬吗通有效抑制雌鼠卵巢组织和血液中炎性因子的高表达(P<0.01)。Pearson相关性分析结果显示,Stress组Nox-4血清含量与性激素(FSH、LH、E2、Prog)的含量之间存在正相关关系(P<0.01),相关系数分别为r=0.94、0.97、0.93、0.96。同时,血清Nox-4与炎症因子IL-1β、IL-6、TNF-α释放浓度之间存在正相关关系(P<0.01),相关系数分别为r=0.95、0.97、0.98。结论心理应激诱导雌鼠胃黏膜炎症和卵巢功能异常是局部组织和血液中Nox-4高表达有关,芬吗通有效改善卵巢组织结构及功能的异常,其深入的机制有待进一步探索。

小组式教学培训在医学专业型研究生提高科研能力带教中的应用及作用

目的探讨小组式教学培训在医学专业型研究生提高科研能力带教中的应用及作用。方法选取2017年9月至2021年7月在新疆维吾尔自治区人民医院进行规范化培训的微创外科专业研究生23名,采用数字表法随机分为对照组(12名)和研究组(11名);对照组采用传统教学,研究组采用小组式教学授课。通过理论考试、实操应用(包括文献检索、统计软件)和问卷调查对比分析2组教学效果。结果研究组学生的理论考试和实操能力方面优秀和合格率均高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);相较于对照组,研究组学生对小组式教学科研提升能力课程的感兴趣程度、对科研思维的启发程度及对教学方式的满意程度更高,差异有统计学意义(P<0.05),提示学生对科学研究的兴趣更加浓厚,且可有效地提高学生的科研创新思维。结论相较于传统教学,小组式教学方式可提高学生的科研兴趣,更好的培养学生的科研创新能力。

结合胃食管反流病特征建立实验动物模型在培养医学研究生科研能力教学中的应用

目的探讨结合胃食管反流病特征建立实验动物模型及相关基础实验技术在提高医学研究生科研能力教学中的应用。方法选取2017年9月至2021年7月在新疆维吾尔自治区人民医院进行规范化培训的医学专业硕士研究生23名和博士研究生3名纳入为培养对象。所有学生在教师的指导下进行培训,培训课程包括实验动物模型的建立、常规麻醉、采血解剖取组织,标本处理、苏木精-伊红染色及实时定量RT-PCR等实验技术和SPSS统计软件的理论原理和应用操作。通过采用理论及操作能力考试和教学满意度问卷调查等方法分析教学效果。结果经过实验理论知识和实操技能培训后,学生的优秀率和合格率,与培训前相比,显著提高,差异均有统计学意义(P<0.05)。培训后所有研究生对上述实验技术的应用能力大大提升。培训后学生对实验理论和操作培训课程的感兴趣程度、对统计软件、实验操作步骤的掌握及应用程度、对科研思维的启发程度以及对教学方式的满意度得分值明显提高,与培训前相比,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论动物模型建立和基本实验技术的掌握和应用有效帮助专业硕士研究生的实验动手能力,同时更好的培养学生的科研创新能力。

地屈孕酮联合醋酸曲普瑞林用于子宫内膜异位症术后的临床效果

目的:研究地屈孕酮联合醋酸曲普瑞林用于子宫内膜异位症术后的临床效果。方法:选择2015年1月-2017年12月在我院接受腹腔镜手术治疗的398例子宫内膜异位症患者,根据患者入院的顺序编号,采用奇偶数法将其分为两组,每组各199例。对照组术后单纯口服地屈孕酮治疗,每次月经后的第2 d服用,1片/次,2次/d,共服用药6个月。观察组术后采用地屈孕酮联合醋酸曲普瑞林治疗,即肌肉注射醋酸曲普瑞林,3.75 mg/次,1次/月,共连续给药6次。比较两组的疗效、治疗前后血清学指标、痛经、盆腔痛及性交痛程度的变化。结果:治疗后,观察组的总有效率明显高于对照组(P<0.05);两组的血清黄体生成激素(Luteinizing hormone,LH)和促卵泡生成素(Follicle-stimulating hormone,FSH)水平均未明显改变(P>0.05),而血清雌二醇(Estradiol,E2)、糖类抗原125(Carbohydrate antigen,CA125)和血管内皮生长因子(Vascular endothelial growth factor,VEGF)水平均较治疗前明显降低(P<0.05),且观察组以上指标均明显低于对照组(P<0.05)。两组治疗后痛经、盆腔痛及性交痛积分均较治疗前明显降低(P<0.05),且观察组明显低于对照组(P<0.05)。结论:子宫内膜异位症术后采取地屈孕酮联合醋酸曲普瑞林具有显著的治疗效果,能有效缓解患者的疼痛症状,并改善血清学相关指标,从而有效改善子宫内膜异位症术后的临床效果。

妊娠期胃食管反流病的症状特征研究

目的探讨妊娠期胃食管反流病(GERD)症状的发生率及严重程度。方法选取2018年1月至2019年1月,新疆维吾尔自治区人民医院住院就诊的120例孕妇设定为研究组,进行了一项前瞻性纵向队列研究,通过GerdQ问卷调查妊娠期GERD的患病率。同期选取健康体检者40例非怀孕妇女作为对照组。2组每3个月均记录反流症状的频率和严重程度。结果妊娠(早、中、晚期)和非孕妇GERD问卷调查结果表示,妊娠晚期的评分范围(3~7分、8~10分、11~14分及15~18分)均明显高于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。在孕妇中,5.0%的患者在怀孕前3个月(早期)至少每周有1次反流。在妊娠晚期,15.0%的孕妇每周至少有1次反流,2.50%的非孕妇每周发生1次以上的反流,各组间比较具有统计学意义(P<0.05)。在孕妇中,5.0%的妊娠早期至少每周有1次烧心。妊娠中期为10.0%,晚期为17.5%,2.5%的非孕妇每周至少有1次烧心,在妊娠晚期,发生烧心的妇女占17.5%,各组间比较具有统计学意义(P<0.05)。从妊娠早期到妊娠中、晚期,个别症状(反流,烧灼感)的频率与非孕妇组比较均明显增加,在妊娠晚期症状出现的频率达到高峰,与非孕妇组以及妊娠早期比较,具有明显的统计学意义(P<0.05)。根据症状诊断及发生情况,GERD在妊娠早期发病率为24.5%,在中期为37.5%,在妊娠晚期为52.5%,非孕妇(对照组)GERD患病率为7.5%。结论妊娠晚期GERD症状发生率明显高于非孕妇,且在妊娠过程中发生率逐渐增高。

心理应激对雌性小鼠胃泌素、雌激素及其胃食管炎症因子的影响

目的探讨心理应激对雌性小鼠胃泌素、雌二激素及其食管炎症因子的影响。方法20只8周龄,雌性SPF级昆明小鼠随机分为心理应激组和正常对照组,每组各10只。两组小鼠单只饲养在自由进食水的鼠笼内,心理应激组小鼠每天在自制式束缚器中限制活动2 h,持续14 d;对照组小鼠不进行束缚。实验14 d后,行H&E染色并在光镜下观察食管粘膜组织病理学改变,进一步通过实时定量PCR和酶联免疫吸附法检测血液中和食管粘膜组织中氧化应激(Nox-4)及炎症因子(IL-1β、IL-8、TNF-α)等指标的mRNA表达量;酶联免疫吸附法检测两组胃泌素和雌二醇激素在血液中的水平。结果心理应激小鼠血液中胃泌素和雌二醇激素水平较对照组更低,两者比较的差异有统计学意义(t=4.265,5.622;P<0.05);心理应激组小鼠食管粘膜层可见基底细胞增生,中性粒细胞、嗜酸性粒细胞及浆细胞浸润反应和炎症性改变。心理应激组小鼠食管粘膜炎症细胞评分较对照组更高,两者比较的差异有统计学意义(t=7.512,P<0.05)。心理应激组小鼠食管粘膜组织氧化应激指标(Nox-4)的mRNA表达量以及血液中的水平较对照组更高,两者比较的差异有统计学意义(t=5.546,6.013;P<0.05)。心理应激组食管粘膜组织炎症因子(IL-1β、IL-8及TNF-α)的mRNA表达量以及血液中的水平较对照组更高,两者比较的差异有统计学意义(t=7.124,5.876,6.832,2.317,4.681,8.105;P<0.05)。结论心理应激引起胃泌素和雌二醇水平降低,促进食管粘膜炎症性损伤。

Nox-4在慢性束缚应激致小鼠胃黏膜炎症损伤发生中的作用

目的探讨NADPH氧化酶Nox-4在慢性束缚应激诱导胃黏膜炎症损伤发生中的作用。方法雄性SPF级昆明小鼠随机分2组(每组10只),即慢性束缚应激(Stress)组和正常对照(Control)组。Stress组小鼠每天在自制式束缚器中限制活动2 h,其余时间两组小鼠在相同环境中自由饮水摄食,实验持续14 d。通过HE染色在光镜下观察胃黏膜组织病理学改变,采用免疫组化方法观察Nox-4在小鼠胃黏膜中的表达,实时定量RT-PCR和Elisa法检测胃黏膜组织中Nox-4、抗氧化蛋白(Mn-SOD、GSH、Catalase)及炎性因子(IL-8、IL-1β、TNF-α)等指标的mRNA相对表达量及其在血液释放浓度。结果Stress组小鼠胃黏膜固有层和腺体上皮内出现基底细胞增生,中性粒细胞、嗜酸性粒细胞及浆细胞浸润反应和炎性改变,而Control组小鼠胃黏膜未发现明显异常。Nox-4免疫染色阳性细胞在Stress组小鼠胃黏膜中表达较Control组染色深且丰富,主要表达于黏膜固有层及腺体上皮内。Stress组小鼠胃黏膜组织中Nox-4 mRNA表达水平是Control组的(2.42±0.51)倍,其血清释放浓度为Control组的(2.23±0.67)倍,差异有统计学意义(t=-46.32,P<0.001)。两组小鼠胃黏膜抗氧化蛋白的RT-PCR实验结果显示,Stress组Mn-SOD、GSH、Catalase的mRNA转录水平明显低于Control组的分别为[Mn-SOD:(0.59±0.10),GSH:(0.58±0.11),Catalase:(0.57±0.09)倍],差异有统计学意义(t=13.51,11.67,15.01,P<0.01)。两组小鼠胃黏膜炎性因子的RT-PCR实验结果显示,Stress组IL-8、IL-1β、TNF-α的mRNA转录水平显著高于Control组的分别为(IL-8:1.47±0.34,IL-1β:1.48±0.42,TNF-α:1.51±0.37)倍,差异有统计学意义(t=-18.45,-19.14,-20.85,P<0.001)。两组炎性因子(IL-8、IL-1β、TNF-α)的Elisa结果显示;Stress组炎性因子血清中释放水平明显上升,分别是Control组的(2.25±0.37)、(3.59±0.45)、(3.41±0.34)倍,均差异具有统计学意义(t=-47.11,-79.36,-96.32,P<0.01)。Pearson相关性分析结果显示,Stress组Nox-4血清浓度与炎性因子(IL-8、IL-1β、TNF-α)血清浓度之间存在正相关(r=0.97,0.99,0.98,均P<0.01)。Spearman等级相关分析胃黏膜炎症分级与血清Nox-4及炎性因子指标(IL-8、IL-1β、TNF-α)浓度呈正相关(r=0.96,0.92,0.91,0.94,均P<0.01)。结论慢性束缚应激引起Nox-4高水平表达,进而导致胃黏膜炎症性损伤。

芬吗通联合艾司奥美拉唑治疗对围绝经期妇女胃食管反流病的疗效

目的探讨围绝经期妇女胃食管反流病(GERD)的临床特征及芬吗通联合艾司奥美拉唑治疗围绝经期合并GERD的临床效果。方法回顾性分析自2020年3月至2021年3月于新疆维吾尔自治区人民医院妇科门诊及微创外科就诊的80例围绝经期GERD患者。依照治疗方式的不同分为对照组和观察组,各40例。对照组给予艾司奥美拉唑抑酸治疗;观察组在对照组的基础上联合给予雌二醇/雌二醇地屈孕酮(芬吗通),2组均连续治疗6个月。采用Kupperman问卷调查(围绝经期症状评分)、GERD问卷调查、胃酸24 h pH监测、高分辨率食管动力监测以及激素水平检测等方法来分析2组治疗前后抑酸和改善绝经期症状的效果。结果观察组围绝经期症状Kupperman评分及GERD症状评分的降低程度显著低于对照组(P<0.05)。2组治疗前与治疗后食管近端弱酸反流比值、食管近端酸反流比值及DeMeester评分等,均显著降低(P<0.05)。2组治疗前与治疗后食管下段括约肌(LES)静息压以及食管远端收缩积分(DCI),均显著上升(P<0.05),提示2组抑酸治疗对酸反流及食管功能的疗效相当。观察组治疗后显著降低促黄体生成素(LH)和促卵泡生成激素(FSH)水平(P<0.05);同时雌二醇(E2)的水平显著上升(P<0.05)。观察组治疗后疗效明显高于对照组(P<0.05);而其无效率显著低于对照组(P<0.05)。观察组用药后出现的头疼、恶心、呕吐以及乳房胀痛等药物不良反应发生情况均明显低于对照组(P<0.05)。结论该联合治疗对围绝经期GERD的疗效较好,可显著改善围绝经期及GERD症状的发生,值得临床诊治中进一步推广应用。

围绝经期症状与胃食管反流病症状的相关性分析

目的探讨围绝经期妇女症状发生与胃食管反流病(GERD)的临床特征的相互关系。方法选取自2020年1月至2021年1月在新疆维吾尔自治区人民医院妇科门诊就诊的GERD患者90例,根据月经情况进一步分为围绝经期组(45例)和非围绝经期组(45例)。2组均采用围绝经期症状评分(Kupperman)和GERD症状评分等问卷调查方式以及胃酸检测来分析其症状发生之间的相互关系。结果围绝经期组平均年龄高于非绝经期组(P<0.05);围绝经期组的围绝经期症状(Kupperman评分),GERD症状(GERD评分)及DeMester评分高于非围绝经期组(P<0.05);Pearson相关性分析显示,围绝经期潮热出汗、失眠、焦躁等症状与GERD症状的严重程度呈正相关(r=0.261、0.280、0.375,P<0.05)。结论女性围绝经期症状与GERD症状发生密切相关,需临床医生提高其临床特点的认识,防止误诊漏诊。

慢性束缚应激诱导脂肪Nox-4表达及其在脂肪炎症发生中的作用

目的探讨慢性束缚应激诱导脂肪组织NADPH氧化酶4(Nox-4)表达及其在脂肪炎症发生中的作用。方法雄性SPF级20只昆明小鼠随机分2组(每组10只),即束缚应激组和正常对照组。束缚应激小鼠每天在自制式束缚器中限制活动2h,持续14天。采用HE染色、免疫组化、RT-PCR及ELISA等试验方法检测脂肪组织和血液中Nox-4,巨噬细胞表面标志物(CD11b、CD68、F4/80),抗氧化蛋白(Mn-SOD、GSH-Px、Catalase),脂肪细胞因子(脂联素、MCP-1、IL-6、TNF-α)等指标的表达。结果应激小鼠腹股沟脂肪垫白色脂肪组织(WAT)与对照组相比显著缩小。应激组WAT出现大量的单核细胞、中性粒细胞浸润反应和炎症性改变。应激组WAT组织中CD11b阳性细胞的比例及F4/80、CD68的mRNA表达水平显著升高。应激组FFA释放的浓度显著增高,约对照组的2倍(P<0.01)。Nox-4主要表达于脂肪细胞中,应激组Nox-4的mRNA表达和血清浓度显著高于对照组(P<0.01);应激组WAT组织中脂联素的mRNA表达与对照组相比显著降低(P<0.01);应激组WAT组织中MCP-1、IL-6及TNF-α的mRNA表达与对照组相比显著增高(P<0.01)。结论心理应激导致脂肪氧化、抗氧化系统破坏,使得脂肪细胞因子表达异常,进而引起脂肪组织炎症。

探讨围绝经期妇女胃食管反流病症状和胃酸反流的特征

目的探讨围绝经期妇女胃食管反流病(GERD)临床症状以及胃酸反流的特征。方法回顾性分析2017年3月至2018年6月在新疆维吾尔自治区人民医院就诊的93例GERD患者作为研究对象,根据月经情况进一步分为围绝经期组(43例)和非围绝经期组(50例)。采用GERD问卷调查,食管24 h pH监测以及高分辨率食管动力监测等诊断手段来分析2组患者胃食管反流病相关临床症状、酸反流及胃食管动力的特征。结果围绝经期组女性平均年龄范围高于非绝经期组女性(P<0.05);围绝经期组烧心及反酸等GERD典型症状评分比例高于非围绝经期组(P<0.05);在非典型症状比较中发现,围绝经期组嗳气和睡眠障碍等症状比例高于非围绝经期组(P<0.05);24 h食管酸反流监测显示,围绝经期组弱酸反流(4<pH<7)次数和食管近端弱酸反流(%)显著高于非围绝经期组(P<0.05);围绝经期组食管下段括约肌(LES)静息压低于非围绝经期组(P<0.05),食管上段括约肌(UES)静息压高于非围绝经期组(P<0.05)。结论围绝经期女性胃食管反流病主要以弱酸反流以及LES、UES静息压异常为主,其主要症状为嗳气和睡眠障碍。

丙二醛在胃食管反流病食管黏膜炎症发生中的表达及作用机制

目的探讨丙二醛(MDA)在不同类型胃食管反流病(GERD)患者食管黏膜中的表达及其在食管炎症发生中的意义。方法按照纳入、排除标准选取2017年12月至2018年10月间在新疆维吾尔自治区人民医院住院治疗的42例GERD患者设为研究组,同期完成体检的8例健康受试者设为健康对照组。GERD组行GERDQ评分、24 h pH监测、高分辨率食管测压监测并内镜下取食管齿状线上3 cm处的局部黏膜作为标本,研究组根据检查结果分为非糜烂性反流病(NERD)组(17例)和糜烂性反流病(RE)组(25例),后续采用HE染色、免疫组化、qRT-PCR、ELISA等方法检测组织炎症程度、MDA、抗氧化酶[锰超氧化物歧化酶(Mn SOD)、谷胱甘肽(GSH)、过氧化氢酶(CAT)]以及促炎因子[单核细胞趋化蛋白1(MCP-1)、白介素-8(IL-8)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)]的相对表达量。结果三组之间BMI差异无统计学意义(P> 0. 05)。食管24 h pH监测比较得知,RE组患者弱酸反流(4 0. 05)。RE组食管黏膜组织出现不同程度的免疫细胞(中性粒细胞,嗜酸性粒细胞)的浸润、乳头延长、水肿等炎症性改变;RE组炎症评分达到高峰,并高于NERD组,差异有统计学意义(P <0. 001)。NERD、RE两组MDA阳性表达的细胞数多于对照组,其中RE组MDA表达几乎覆盖全层食管;NERD组和RE组中血清MDA浓度明显高于对照组,差异有统计学意义(P <0. 001),而RE组血清MDA浓度达到高峰,与NERD组比较差异有统计学意义(P <0. 01)。抗氧化酶(Mn SOD、GSH、CAT)的mRNA相对表达量在NERD组、RE组中明显降低,三组之间差异有统计学意义(P <0. 001)。与NERD组比较,RE组Mn SOD和CAT mRNA表达水平明显降低(P <0. 01)。促炎因子(MCP-1、IL-8、TNF-α)的mRNA相对表达量在NERD、RE两组中明显升高,三组之间差异有统计学意义(P <0. 001)。与NERD组比较,RE组促炎因子的表达显著升高(P <0. 01)。结论 MDA在不同类型GERD患者中表达量明显升高,可能与酸反流引起食管炎症的发生密切相关。

产后不同程度的抑郁症状与胃食管反流病的相关性

目的探讨产后不同程度的抑郁症状与胃食管反流病的相关性。方法自2018年8月至2019年3月在新疆维吾尔自治区人民医院妇产科门诊行产前检查,经住院分娩的初产妇82例设定为研究组。要求所有孕产妇均于产后2~8周进行焦虑自评量表(SAS)、抑郁自评量表(SDS)、爱丁堡产后抑郁自测量表(EPDS)以及GERD量表来调查分析产妇抑郁患病率及GERD相关症状的发生频率和严重程度。结果孕期至产后2~8周的随访调查发现,孕期SDS和SAS问卷调查中出现的轻中重度抑郁焦虑者中,产后抑郁[EPDS(+)]患病率有所增加,这说明孕期有抑郁、焦虑等不良情绪的产妇产后抑郁症发病率相对较高。经SDS评分显示的EPDS(+)总例数21例产妇和EPDS(-)总例数61例产妇进行GERD症状评分分析,发现EPDS(+)组产妇GERD相关症状(反酸、烧心、胸骨后疼及睡眠障碍)的患病率均显著高于EPDS(-)组(P<0.01);产后抑郁(EPDS)评分相关性分析发现,反酸、烧心、胸骨后疼及睡眠障碍等GERD相关症状的发生频率与抑郁的严重程度呈正相关(P<0.01)。结论产后抑郁症患者GERD患病率较高,且随着抑郁严重程度其患病率逐渐增高。

心理应激诱导NADPH氧化酶Nox-4在食管炎症发生中的作用

目的探讨心理应激诱导还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸氧化酶4(NADPH oxidase 4,Nox-4)介导的炎症因子表达及其在食管炎症发生中的作用。方法雄性SPF级20只昆明小鼠随机分为慢性束缚应激(Stress)组和正常对照(Control)组,每组10只。Stress组小鼠每天在自制式束缚器中限制活动2 h,其余时间两组小鼠在相同环境中自由饮水摄食,实验持续14 d。HE染色在光镜下观察食管黏膜组织病理学改变,免疫组化法和蛋白质印迹(WB)法检测小鼠食管中氧化应激指标Nox-4蛋白的表达,实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)法检测食管黏膜组织中Nox-4、抗氧化蛋白[核因子E2相关因子2(Nrf-2)、Ⅰ型血红素氧合酶(HO-1)]及炎症因子[单核细胞趋化蛋白1(MCP-1)、白介素(IL)-6、IL-8、肿瘤坏死因子(TNF)-α]等mRNA的相对表达量。结果 HE染色光镜下发现,Stress组小鼠食管黏膜层出现基底细胞增生,中性粒细胞、嗜酸性粒细胞及浆细胞等免疫细胞出现浸润反应和炎症性改变,而Control组小鼠食管全层未发现明显异常。食管黏膜组织损伤评分结果显示,Stress组小鼠食管黏膜损伤及黏膜下炎症细胞评分明显高于Control组(P<0.01)。免疫组化结果显示,Nox-4主要表达于食管固有层、黏膜及黏膜下层,Nox-4免疫染色阳性着色细胞在Stress组小鼠组织中较Control组染色深且丰富。Stress组小鼠食管黏膜中Nox-4 mRNA水平是Control组的(2.45±0.58)倍,其蛋白表达水平为Control组的(2.39±0.43)倍(P均<0.01)。Control组Nrf-2 mRNA表达水平为Stress组的(1.75±0.24)倍,HO-1的mRNA水平为Stress组的(1.81±0.31)倍(P均<0.01)。Real-time PCR实验结果显示,Stress组食管组织炎症因子MCP-1、IL-6、IL-8、TNF-α等mRNA表达水平明显上升,分别是Control组的(1.68±0.33)、(2.42±0.41)、(2.39±0.28)和(2.47±0.52)倍(P均<0.01)。结论心理应激可能直接导致食管氧化/抗氧化系统的平衡失调,使得促炎因子过量表达,进而引起食管炎症反应。