【目的】克隆灰枣扩展蛋白基因ZjEXPA8,分析其序列特征,为研究该基因在灰枣果实发育过程中的作用和功能奠定基础。【方法】以不同发育形态的灰枣花和幼果为试材,根据灰枣ZjEXPA8基因(LOC107414006)序列,应用Primer Premier 5.0软件设计...【目的】克隆灰枣扩展蛋白基因ZjEXPA8,分析其序列特征,为研究该基因在灰枣果实发育过程中的作用和功能奠定基础。【方法】以不同发育形态的灰枣花和幼果为试材,根据灰枣ZjEXPA8基因(LOC107414006)序列,应用Primer Premier 5.0软件设计引物,RT-PCR技术克隆ZjEXPA8基因,利用生物信息学方法分析ZjEXPA8核苷酸序列。【结果】ZjEXPA8基因的开放阅读框为762 bp(基因登录号为NP_001310794.1),编码253个氨基酸,预测蛋白分子量为26.91 kDa,等电点为8.32,不稳定系数为30.09,脂肪指数为66.72,总亲水性平均数为-0.107,属于稳定亲水蛋白。ZjEXPA8蛋白主要含有无规则卷曲。ZjEXPA8蛋白的不具有跨膜结构域,含有DPBB_1和Pollen_allerg_1两个保守结构域。ZjEXPA8蛋白与大豆(Glycine max,XP_003523276.1,GmEXPA8)的相似性最高,为93.13%。ZjEXPA8基因与橡胶(Hevea brasiliensis,XP_021684783.1,HbEXPA8)和拟南芥(Arabidopsis thaliana,NP_181593.1,AtEXPA8)的亲缘关系最近。灰枣ZjEXPA8基因在枣花发育不同时期均有表达,蕾黄期表达量最高,萼片展平期次之,该基因可能主要在蕾黄期和萼片展平期发挥作用。【结论】ZjEXPA8基因编码的蛋白与大豆的同源性最高。系统进化树分析发现灰枣ZjEXPA8与橡胶HbEXPA8和拟南芥AtEXPA8亲缘关系较近。ZjEXPA8基因在灰枣花蕾黄期表达量最高。展开更多