南疆部分地区绵羊捻转血矛线虫苯并咪唑抗性相关分子Ⅰ型β-微管蛋白基因的多态性分析

为了解南疆地区绵羊捻转血矛线虫对苯并咪唑类药物的抗性相关分子β-微管蛋白基因的多态性,本研究对克州及喀什的183条捻转血矛线虫成虫进行ITS-2基因特异性PCR鉴定后,对抗药相关的Ⅰ型β-微管蛋白基因进行了扩增和测序,并对该抗药基因的单核苷酸多态性(SNP)167、198和200位点进行了分析。结果:在2个地区种群中,198位点及200位点均发生不同程度突变,且以198位点突变为主,暂未在167位点发生突变;两地共发现了5种基因型,其中198位点纯合敏感型及200位点纯合抗药型(喀什12条占12.37%,克州2条占2.33%),198位点纯合抗药型及200位点纯合敏感型(喀什23条占23.71%,克州7条占8.14%)两地均存在,提示这2个种群都存在抗药性。本研究首次报道了南疆部分地区捻转血矛线虫种群Ⅰ型β-微管蛋白基因存在苯并咪唑类药物抗药性突变,为新疆地区捻转血矛线虫病的有效防控及抗药性研究提供理论依据。

中兽医学针灸实验课程混合式教学改革实践

中兽医学是动物医学专业的主干课程,亦是一门实践性很强的学科,针灸实验作为中兽医学实践教学的重要部分,是培养学生认知中兽医学基础理论与增强实验技能的重要途径。目前,该课程存在学时短、内容繁复,演示指导不全面、信息反馈渠道少,个人依赖团队、实践参与不够,评价标准单一、成绩客观度低等问题。基于此,课程组对中兽医学针灸实验课程进行混合式教学改革,借助超星学习通平台,构建课前-课中-课后三阶段教学模式,通过线上、线下混合方式与多种教学手段相结合,夯实理论基础;采取课前穴位讲解视频、知识引入吸引学生主动预习,课中实体穴位辨识、师生互动答疑增强学生实操能力,课后小组视频拍摄强化知识记忆;注重理论联系实际,将综合应用贯穿整个教学过程并创立独特的考核评价体系,为提升中兽医学针灸实践教学水平及提高学生的中兽医学针灸实操能力探索新的有效途径。

《中兽药学》实验课程现代化改革——以新疆特色药材引入为例

《中兽药学》为高等农业院校动物医学专业的一门重要的专业课程,不只是注重理论知识学习,更注重在实际生产中的应用。本文提出了在《中兽药学》实验课程中引入当地特色药材的现代化改革,并以新疆特色药材为例,从传承与发扬的角度出发,阐明了如何在实验课程中引入新疆特色药材。

案例式教学方法在兽医临床诊断学教学中的应用与探索

兽医临床诊断学是兽医学专业中的重要课程之一,对培养兽医学生的临床思维和实践能力具有重要意义。传统的教学方法在兽医临床诊断学中存在一些问题,如理论与实践脱节、学生被动接受知识及机械应用专业知识等。案例式教学是一种以实践为主的开放式教学方法,可以促进学生积极参与,加深学生对专业知识的理解。通过将案例式教学方法应用于兽医临床诊断学教学中,提高学生的学习兴趣和实践能力,促进临床思维的培养。

石榴花多糖通过抑制MyD88/NF-κB通路减轻脂多糖诱导小鼠RAW 264.7细胞炎症反应

目的:通过脂多糖(Lipopolysaccharide,LPS)诱导小鼠RAW 264.7巨噬细胞炎症模型,探讨了石榴花多糖对细胞的抗炎效果及机制。方法:通过CCK8法检测不同浓度的石榴花多糖对小鼠RAW 264.7细胞活性的影响。LPS刺激建立细胞炎症模型,加入250,125,31.25μg/mL石榴花多糖进行处理,24 h后Griess法检测细胞上清液NO水平,ELISA法检测细胞上清液TNF-α、IL-1β、IL-6、PGE_(2)水平,RT-qPCR法检测细胞iNOS、COX2、MyD88、NF-κB mRNA表达。结果:石榴花多糖的质量浓度在0.25 mg/mL时,细胞存活率下降,在0.125 mg/mL以下时RAW 264.7细胞活力上升。与模型组相比,石榴花多糖组细胞上清液NO、TNF-α、IL-1β、IL-6、PGE_(2)水平均降低,RAW 264.7细胞的iNOS、COX2、MyD88、NF-κB mRNA表达降低(P<0.05)。结论:石榴花多糖可以抑制MyD88/NF-κB信号通路,降低NO释放和炎症因子水平,进而减轻LPS诱导的小鼠巨噬细胞炎症反应。

若羌枣多糖结构特性及对雏鸡免疫活性的研究

本次实验以若羌枣为原材料,检测若羌枣多糖(Ruoqiang Jujube Polysaccharide,RJP)对雏鸡免疫增强剂活性。采用醇沉法提取若羌枣多糖(RJP),采用苯酚硫酸法、BCA蛋白检测法、红外光谱法和扫描电镜法,检测RJP的糖含量、蛋白含量,多糖特征官能团及多糖表征结构;采用ELISA法、免疫器官指数检测法和HE染色法检测RJP对雏鸡淋巴细胞细胞因子分泌、免疫器官指数以及免疫器官形态变化的影响。结果显示,RJP糖含量为61%,醛酸含量为17%,蛋白含量为7%,红外光谱显示RJP在1740.54 cm^(-1)处有较强的吸收峰,为酸性多糖;RJP可促进淋巴细胞IFN-γ、TNF-α、IL-6和IL-4等细胞因子的分泌,能够促进鸡脾脏、胸腺和法氏囊免疫器官指数的表达,并对雏鸡具有良好的免疫增强作用。

响应面法优化骆驼刺多糖的提取工艺

本次实验使用骆驼刺根部为原材料,为探究酸性骆驼刺多糖(Alhagi Sparsifoliashap Polysaccharide,ASP)的最佳提取工艺,提高骆驼刺多糖提取率。通过热水提取法研究提取次数、提取温度、料水比及提取时间等单因素对多糖提取率的影响,并在单因素试验基础上,采用响应面法以提取温度、提取时间和水料比等三因素为自变量,考察三因素对多糖提取率的影响,并确立最佳条件。结果显示,提取次数固定为2次,骆驼刺多糖最佳提取条件为:提取温度95℃、提取时间2.1 h、骆驼刺与水比1∶26 g/mL,多糖得率为(1.626±0.025)%。结果表明,经过优化后的骆驼刺多糖得率值与响应面法所得方程的预测值符合良好,此条件为获得骆驼刺多糖的最佳提取条件。

石榴花提取物体外抑菌及体内抗炎作用效果的研究

为探究石榴花(Pomegranate flower)活性成分的体外抑菌效果及体内抗炎作用。本研究采用溶剂提取、超声辅助提取等方式对石榴花中的多糖、多酚、生物碱、黄酮类活性物质进行提取和含量测定,通过打孔法和微量肉汤法对提取物的体外抑菌效果进行检测,通过建立急性炎症模型,对其抗二甲苯所致小鼠耳肿胀效果进行研究。结果显示石榴花中含有多糖、多酚、生物碱、黄酮等活性成分,提取物中相应活性物质含量分别为35.59%±0.27%、43.15%±0.90%、34.87%±0.42%、28.18%±0.19%。体外抑菌结果显示,石榴花多糖、多酚、黄酮提取物均能抑制金黄色葡萄球菌的生长,相同浓度下抑菌效果为:多酚提取物>黄酮提取物>多糖提取物。小鼠耳廓肿胀度模型结果显示,石榴花多糖中剂量、多糖高剂量、多酚高剂量、黄酮高剂量组均对二甲苯所致的耳肿胀有显著抑制作用(P<0.05),作用效果与地塞米松相比无显著差异(P>0.05)。结果表明:石榴花中含有多糖、多酚、生物碱、黄酮等多种活性成分,其中多酚和黄酮提取物的抑菌效果较弱,仅对金黄色葡萄球菌有抑制作用;但多糖、黄酮、多酚提取物具有良好的抗炎活性,对二甲苯所致的小鼠急性耳肿胀具有良好的作用效果。可为我国优质饲料添加剂研发与应用提供新的选择。

探讨奶牛乳房炎的发病原因与中西药治疗

奶牛乳房炎是奶牛常见的疾病之一,其病源比较复杂,目前还没有治疗奶牛乳房炎的特效药物。因此,“预防为主、防治结合”原则是治疗奶牛乳房炎的基本思路。为了完善用药方式和治疗方法,我们需要从发病原因入手,深入研究奶牛乳房炎的病因和发病机理。本文结合实际工作经验,探讨了奶牛乳房炎的发病原因,并分析了中西医结合治疗奶牛乳房炎的方案,希望通过研究对降低奶牛乳房炎的发生几率,确保奶牛场的养殖效益有一定帮助。

雪白睡莲花活性成分对奶牛乳腺炎主要致病菌抑菌和抗炎作用研究

为了研究雪白睡莲花多糖、黄酮对奶牛乳腺炎主要致病菌的抑菌和抗炎作用,采用超声提取法提取雪白睡莲花活性成分(多糖、黄酮),然后采用牛津杯法结合倍比稀释法测定其抑菌圈、最低抑菌浓度(MIC)及最低杀菌浓度(MBC),研究其对奶牛乳腺炎主要致病菌(大肠埃希氏菌、金黄色葡萄球菌、链球菌)的抑制效果;同时,通过二甲苯致小鼠耳廓肿胀试验,观察其抗炎作用。结果显示,超声波提取雪白睡莲花多糖、黄酮的提取率分别为51.78%和12.00%;体外抑菌试验可知,金黄色葡萄球菌对多糖高敏,抑菌圈直径为23.01 mm±0.43 mm;雪白睡莲花黄酮对3种致病菌均有抑制作用,且可达高敏或中敏,抑菌圈直径为(13.30±0.27)mm~(24.07±0.72)mm;抗炎试验表明,与空白对照组相比,雪白睡莲花多糖、黄酮均能极显著降低二甲苯引起的小鼠耳廓肿胀(P<0.01),肿胀抑制率分别为83.11%和65.15%。结果表明,雪白睡莲花多糖和黄酮均具有较好的抑菌抗炎作用,研究结果可为雪白睡莲花活性成分的开发利用奠定一定的理论基础。

PLGA纳米疫苗佐剂的研究进展

聚乳酸-羟基乙酸共聚物[poly(D,L-lactic-co-glycolic acid),PLGA]也称聚乙丙交酯,是由单体乳酸(LA)和羟基乙酸(GA)在催化剂的作用下化学合成的具有生物相容性及生物可降解性的高分子聚合物。PLGA具有药物控释和缓释、低细胞毒性、组织和细胞生物相容性及靶向递送等一系列特性。本文从PLGA纳米粒的制备方法、检测技术、纳米佐剂作用及存在的问题和解决策略等方面对PLGA纳米粒的相关问题进行了综述。重点介绍了PLGA纳米粒作为疫苗佐剂方面的应用,并提出了PLGA疫苗佐剂存在的问题及解决策略。

骆驼刺酸性多糖对小鼠脾脏淋巴细胞免疫增强作用的研究

[目的]本文旨在探讨骆驼刺酸性多糖(acidic Alhagi sparsifolia Shap polysaccharide,aASP)对小鼠脾淋巴细胞的免疫增强作用。[方法]采用醇沉法提取骆驼刺多糖,采用柱层析法对骆驼刺多糖进行分离及纯化,采用苯酚硫酸法、硫酸-咔唑法和BCA微孔酶标仪法,检测糖、糖醛酸和蛋白含量,采用红外光谱法鉴别多糖性质。采用MTT法确定aASP对小鼠脾脏淋巴细胞的安全浓度,在安全浓度范围内500、125和31.25μg·mL^(-1)3个浓度下检测单独、协同脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)和植物血凝素(phytoheamagglutinin,PHA)对脾淋巴细胞的增殖效果;流式细胞术检测aASP对淋巴细胞亚群分化的影响;ELISA法检测aASP对淋巴细胞细胞因子分泌的影响。[结果]骆驼刺多糖提取物中多糖含量为(81.8±1.2)%,糖醛酸含量为(17.34±0.75)%,蛋白含量为(0.54±0.08)%;红外光谱显示aASP在1746.53 cm^(-1)处有较强的吸收峰,结合糖醛酸含量判定aASP为酸性多糖。高、中、低浓度的aASP均可促进脾脏淋巴细胞增殖,协同LPS和PHA能够更显著促进B细胞和T淋巴细胞的增殖(P<0.05)。流式细胞术和ELISA检测结果显示aASP能够促进CD4^(+)和CD8a^(+)T细胞的分化,并促进脾淋巴细胞分泌IFN-γ、TNF-α、IL-6和IL-4。[结论]aASP可以增强小鼠脾脏淋巴细胞的增殖,诱导小鼠脾脏T淋巴细胞产生Th1(helper T lymphocyte 1)及Th2(helper T lymphocyte 2)混合型免疫应答,免疫细胞偏向CD4^(+)T细胞分化。

中兽药学试验课程中地方特色药材的引入——以新疆特色药材引入为例

为了使不同地区学生更好地了解当地特色药用植物,提出了将地方特色药材引入中兽药试验课程的思路,并以新疆特色药材为例,阐明了如何从生药鉴别、特色炮制和有效成分提取、鉴定及活性检测3方面入手将地方特色药材引入中兽药学试验课程中。

骆驼蓬子活性成分的筛选及小鼠乳腺炎治疗效果评价

为探明骆驼蓬(Peganum harmala L.)种子的抑菌作用及小鼠乳腺炎的治疗效果。本研究采用溶剂提取和超声辅助提取等方式对骆驼蓬子中的多糖、多酚、生物碱、黄酮类活性成分进行提取;通过琼脂平板扩散法(打孔法)和微量肉汤法对各提取物的抑菌效果进行检测;通过急性毒性预试验和最大耐受量试验对抑菌效果显著的提取物进行安全性检测;最后用于小鼠乳腺炎模型,对其治疗效果进行评价。结果表明,骆驼蓬子中含有多糖、多酚、生物碱、黄酮类活性物质,相应提取物的含量分别为36.90%±0.27%、23.18%±0.36%、22.24%±0.08%、20.46%±0.14%。抑菌试验结果显示,骆驼蓬子多酚和黄酮的抑菌效果较为显著,对大肠杆菌(E.coli)、金黄色葡萄球菌(S.aureus)、无乳链球菌(S.agalactiae)的最小抑菌浓度(MIC)和最小杀菌浓度(MBC)分别在0.7813~1.5625 mg/mL和0.7813~12.5000 mg/mL。安全性试验结果显示,骆驼蓬子多酚和黄酮对小鼠的半数致死量(LD_(50))值均大于1200 mg/kg,其最大耐受量是4.5 g/kg。小鼠乳腺炎治疗结果显示,骆驼蓬子多酚和黄酮能够显著降低乳腺组织中的TNF-α、IL-6含量及菌落数量(P<0.05),减少血管扩张和炎性细胞浸润程度,加快腺泡结构和功能的恢复。其中,骆驼蓬子多酚的作用效果更为显著(P<0.05)。骆驼蓬子多酚不但对引发奶牛乳腺炎的大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、无乳链球菌具有较强的抑制效果,而且能够降低金黄色葡萄球所致的乳腺炎小鼠乳腺组织中的菌落数量、IL-6和TNF-α含量,增强乳腺组织修复能力。

石榴花水提物的体内外抗炎作用

为检测石榴花水提物(PEW)的抗炎功效,首先测定PEW对巨噬细胞的体外安全浓度,并在安全浓度下检测PEW对脂多糖(LPS)诱导炎症模型巨噬细胞一氧化氮(NO)、白介素6(IL-6)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)分泌水平的影响,最后通过测定PEW对二甲苯所致的小鼠耳郭肿胀的抑制作用,观察PEW的抗炎作用。结果显示,PEW在10~100μg/mL均能够显著抑制LPS诱导炎症模型巨噬细胞NO的分泌(P<0.05),其中100μg/mL浓度时的抑制作用最强。经LPS诱导后炎症模型巨噬细胞能够分泌大量IL-6及TNF-α,PEW能够有效抑制炎症模型巨噬细胞IL-6及TNF-α的分泌。PEW对二甲苯致小鼠耳郭肿胀的影响试验结果显示,高剂量(500μg/mL)PEW对二甲苯致小鼠耳郭肿胀的抑制效果最佳,抑制率可高达60%,耳肿胀度和阳性药物地塞米松组无显著性差异(P>0.05)。由体内外试验可知,PEW体内外均具有良好的抗炎活性,其中高浓度PEW(500μg/mL)的活性最强。本试验为石榴花进一步开发利用提供试验依据。

无花果叶多糖对肉鸡的免疫增强作用研究

为了研究无花果叶多糖(Ficus carica Linn. leaf poly,FLP)对鸡的免疫增强佐剂效果,本试验将72只1日龄的三黄肉鸡随机分为FLP/H9N2组、Alum/H9N2组、H9N2组及空白组。于7日龄时颈部皮下注射0.3 ml FLP/H9N2、Alum/H9N2、H9N2以及生理盐水,两周后进行二免。二免后第7 d、14 d和28 d,各组任意选择4只鸡进行心脏采血,测定其血凝抑制效价,收集免疫器官计算免疫器官指数;二免后第28 d采用ELISA方法检测血清细胞因子水平及血清IgG水平,收集十二指肠肠液进行IgA水平的测定,采集胸腺、脾脏、法氏囊,观察其病理变化。试验结果显示,FLP诱导机体产生高HI滴度和免疫器官指数,FLP/H9N2组诱导机体产生的HI滴度、脾脏、胸腺及法氏囊指数均显著高于H9N2组(P<0.05);二免后28 d,FLP/H9N2组血清中IL-4、IL-5、IL-6、IL-12、TNF-α和INF-γ的浓度显著高于H9N2组及空白组(P<0.05);血清IgG水平显著高于H9N2组及空白组(P<0.05),肠液IgA浓度和对照组无显著性差异(P>0.05);FLP/H9N2组相比Alum/H9N2组和H9N2组胸腺皮质部分增厚,胸腺小体数量增加,脾小体体积变大,数量增加,法氏囊淋巴滤泡恢复正常。上述结果表明,将FLP作为H9N2疫苗抗原的免疫佐剂,可以提高机体的免疫功能。

细粒棘球蚴感染对小鼠肝纤维化的影响

采用门静脉注射法建立细粒棘球蚴BALB/c小鼠高、低剂量(2000、500原头蚴)肝脏模型,1、3及8个月后采集小鼠肝脏标本,Masson染色鉴定纤维化程度,免疫组化法检测α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)和Ⅲ型胶原蛋白(CollagenⅢ)的表达。Masson染色结果显示,病灶边缘带肝脏组织的胶原染色比正常肝脏组织明显增多并形成了致密的环状结构,在囊壁周围广泛分布,且与对照组相比,试验组纤维化程度具有统计学差异(P<0.01);免疫组化(α-SMA)染色显示,试验组小鼠肝脏中α-SMA主要表达在炎症浸润及肉芽组织增生区域,与对照组相比,试验组α-SMA的表达量具有统计学差异(P<0.01);免疫组化(CollagenⅢ)染色结果显示,正常肝脏组织中CollagenⅢ主要表达在血管周围,而在低剂量和高剂量细粒棘球蚴感染组小鼠肝脏中主要表达在病灶周围,且与对照组相比,不同时间点高剂量组和低剂量组具有统计学差异(P<0.001)。综上细粒棘球蚴感染小鼠可导致肝纤维化,且不同时间点不同剂量细粒棘球蚴感染小鼠肝脏中α-SMA、CollagenⅢ的表达水平随着胶原面积的增加而升高。

若羌红枣多糖铜螯合物的制备及生物活性检测

采用柠檬酸钠-硫酸铜方法制备若羌红枣多糖铜螯合物(RJP-Cu),并对其含量、表征、安全性、补铜效果及免疫增强活性进行综合检测分析,其中安全性试验选择36只SPF级昆明(KM)小鼠,随机分为空白对照组(生理盐水)和灌胃2300、1150、575、288、144 mg/kg RJP-Cu试验组。结果显示:RJP-Cu与若羌红枣多糖(RJP)相比,多糖含量、蛋白含量未发生明显变化,糖醛酸含量下降,铜含量从2 mg/kg提升至583 mg/kg,RJP-Cu电镜结构发生明显变化,RJP-Cu同时具有多糖和铜螯合吸收峰;安全性评价结果显示,RJP-Cu的安全使用浓度为575 mg/kg,该浓度下小鼠血常规各项指标与空白对照组无显著性差异(P>0.05),肝脏、肾脏和肠道无病理变化。RJP-Cu补铜效果呈浓度依赖性,随着RJP-Cu浓度提高,血清、肝脏和肌肉中铜浓度提升;RJP-Cu低剂量(144 mg/kg)组相对空白对照组能够显著促进小鼠免疫球蛋白(Ig)A、IgG、白细胞介素(IL)-2、IL-6、肿瘤坏死因子α(TNF-α)的分泌(P<0.05),表现出良好的免疫增强活性。结论:RJP-Cu螯合成功,144 mg/kg低剂量的RJP-Cu具有良好的免疫增强作用。

石榴花水提物活性成分检测及抗炎作用

为检测石榴花水提物(pomegranate flower water extract,PFW)中的主要活性成分及抗炎功效,采用显色法通过紫外分光光度仪对PFW中多糖、黄酮、生物碱、皂苷、多酚、蛋白等活性成分含量进行了检测,通过急性毒性试验确定了PFW的安全性,最后通过测定PFW对二甲苯所致的小鼠耳廓肿胀的抑制作用、血清细胞因子分泌及HE染色切片检测,确定PFW的抗炎作用。结果显示,PFW中主要活性成分为多糖和多酚,含量分别为(43.84±1.94)%和(22.44±1.62)%,其余活性成分含量均低于10%。急性毒性试验判断PFW为无严重急性毒性的物质。PFW对二甲苯致小鼠耳廓肿胀的影响试验。结果显示,中、高剂量PFW对二甲苯致小鼠耳廓肿胀具有良好的抑制作用,同时相对模型组和地塞米松药物组能够显著降低血清IL-6、TNF-α的分泌量(P<0.05),能够减少炎性细胞的浸润,具有良好的抗炎效果。结果表明,PFW具有良好的抗炎活性,其中高、中剂量浓度PFW的活性较好。为石榴花进一步开发利用提供了依据。

小檗果提取物对奶牛乳房炎常见致病菌体外抑菌和抗炎作用

为探索小檗果提取物的体外抑菌和抗炎功效，本试验以乙醇和水为溶媒提取了小檗果粗体物，进行体外抑菌试验，检测对奶牛乳房炎常见致病菌即大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌及链球菌的抑菌活性，并采用二甲苯致小鼠耳廓肿胀法观察抗炎作用。结果显示，小檗果水提物和醇提物对3种致病菌均有抑菌作用，达到高敏或中敏，抑菌圈直径为（10．69±0．16）～（16．89±0．67）mm。与模型组相比，小檗果水提物和醇提物低剂量组明显抑制二甲苯所致小鼠耳廓肿胀（P〈0.01），抑制率均高于58％。本试验为小檗果进一步开发利用提供试验依据。