淋巴细胞连接蛋白调控JAK-STAT信号通路在高血压血管重构中的作用

目的:探讨淋巴细胞连接蛋白(LNK)调控Janus激酶(JAK)/信号转导与转录激活子(STAT)信号通路在高血压血管重构中的作用。方法:选取大鼠胸主动脉平滑肌细胞,构建高血压细胞模型。实验分组为对照组、血管紧张素(Ang)Ⅱ组、AngⅡ+空载组、AngⅡ+LNK组。流式细胞仪检测血管平滑肌细胞(VSMC)的细胞周期、凋亡及增殖水平;实时荧光定量聚合酶链反应检测各组LNK、JAK2、STAT3的mRNA表达水平;Western blot检测各组LNK、STAT3、磷酸化STAT3(p-STAT3)、JAK2、磷酸化JAK2(p-JAK2)的蛋白表达水平。结果:(1)各组细胞周期、凋亡及增殖水平比较:与对照组比较,Ang组和AngⅡ+空载组处于细胞休眠期(G0期)/DNA合成前期(G1期)的细胞减少,处于DNA合成期(S期)和DNA合成后期(G2期)/分裂期(M期)的细胞增加;与AngⅡ+空载组比较,AngⅡ+LNK组处于G0/G1期的细胞增加,处于S期、G2/M期的细胞减少。AngⅡ组和AngⅡ+LNK组细胞增殖水平高于对照组,凋亡率明显低于对照组;AngⅡ+LNK组细胞增殖水平低于AngⅡ组和AngⅡ+空载组,凋亡率明显高于AngⅡ组和AngⅡ+空载组(P均<0.05)。(2)各组mRNA表达水平比较:AngⅡ组和AngⅡ+空载组中STAT3、JAK2的mRNA表达水平明显高于对照组;AngⅡ+LNK组中STAT3、JAK2的mRNA表达水平明显低于AngⅡ组和AngⅡ+空载组(P均<0.05)。(3)各组蛋白表达水平比较:AngⅡ组和AngⅡ+空载组p-STAT3、p-JAK2的蛋白表达水平明显高于对照组;AngⅡ+LNK组p-STAT3、p-JAK2的蛋白表达水平明显低于AngⅡ组和AngⅡ+空载组(P均<0.05)。结论:LNK可能通过负性调节JAK/STAT信号通路参与高血压的血管重构。

LNK在高血压血管重构中的作用研究

目的探讨LNK在高血压血管重构中的作用.方法选取大鼠胸主动脉平滑肌细胞,在一定条件下构建高血压细胞模型.根据不同处理方法分为空白对照组,AngⅡ+空白对照组,AngⅡ+空载组和AngⅡ+SH2B3重组载体组.流式细胞仪检测VSMC周期、凋亡及增殖的水平;ELISA检测IL-6、TNF-α、IFN-γ的表达水平.结果①各组大鼠血管平滑肌细胞周期、凋亡及增殖的水平:与空白对照组比较,AngⅡ+空白对照组和AngⅡ+空载组VSMC处于G0/G1期减少[(71.357±0.312)%比(67.480±0.613)%、(67.053±0.321)%],S期增加[(21.517±0.254)%比(24.003±0.748)%、(22.927±0.178)%],G2/M期增加[(7.137±0.159)%比(8.483±0.618)%、(10.020±0.364)%],差异有统计学意义(P<0.05).与AngⅡ+空载组比较,AngⅡ+SH2B3重组载体组VSMC处于G0/G1期增加[(67.053±0.321)%比(70.810±1.470)%],S期减少[(22.927±0.178)%比(21.867±0.676)%],G2/M期减少[(10.020±0.364)%比(7.320±1.002)%],差异有统计学意义(P<0.05).AngⅡ+SH2B3重组载体组VSMC细胞凋亡率高于AngⅡ+空白对照组和AngⅡ+空载组[(5.210±0.053)%比(4.503±0.223)%、(3.837±0.546)%](P<0.05).AngⅡ+SH2B3重组载体组VSMC细胞增殖水平低于AngⅡ+空白对照组和AngⅡ+空载组[(1.263±0.053)比(1.482±0.104)、(1.480±0.092)](P<0.05).②各组大鼠血管平滑肌细胞上炎性细胞因子水平:与空白对照组相比,AngⅡ+空白对照组和AngⅡ+空载组IL-6[(176.023±16.776)pg/ml比(264.560±12.368)pg/ml、(486.147±41.893)pg/ml]、TNF-α[(8.563±0.667)pg/ml比(15.738±0.995)pg/ml、(20.389±1.274)pg/ml]和IFN-γ[(631.117±26.551)pg/ml比(1097.271±32.303)pg/ml、(1207.185±38.949)pg/ml]水平均升高,AngⅡ+SH2B3重组载体组IL-6[(157.410±12.456)pg/ml]和IFN-γ[(723.270±15.317)pg/ml]表达降低,差异具有统计学意义(P<0.05).与AngⅡ+空白对照组和AngⅡ+空载组相比,AngⅡ+SH2B3重组载体组的IL-6[(264.560±12.368)pg/ml、(486.147±41.893)pg/ml比(157.410±12.456)pg/ml]、TNF-α[(15.738±0.995)pg/ml、(20.389±1.274)pg/ml比(8.394±0.190)pg/ml]和IFN-γ[(1097.271±32.303)pg/ml、(1207.185±38.949)pg/ml比(723.270±15.317)pg/ml]表达均降低,差异具有统计学意义(P<0.05).结论LNK通过介导炎症反应影响血管平滑肌的周期、凋亡及增殖,参与高血压血管重构.