维医异常黏液质型阳痿病证大鼠模型血脂水平与肝功能相关指标的改变及其生物学意义

目的研究维医异常黏液质型阳痿病证大鼠模型血脂水平和肝功能相关指标的改变及其生物学意义。方法选用50只性功能正常的雄性SD大鼠,随机抽取10只为正常组,其余40只为造模组,采用芫荽实+菠菜实+湿寒性环境的干预条件建立异常黏液质证候模型,造模20w后通过APO勃起实验和性行为学实验筛选出阳痿病证模型,随后从中取8只为病证模型组,从未成阳痿的证候模型中取8只为证候模型组。将所有大鼠禁食8h以后,用1%戊巴比妥钠腹腔注射(40mg/kg)麻醉,腹主动脉采血,检测各组大鼠血清甘油三酯(TG)、胆固醇(CHOL)、低密度脂蛋白(LDL-C)、高密度脂蛋白(HDL-C)及白蛋白(ALB)、球蛋白(GLB)、白球蛋白比例(ALB/GLB)、谷丙氨酸(ALT)和谷草氨酸(AST)指标的变化情况。结果病证模型组与证候模型组TG水平较正常组显著降低(P<0.05),病证模型组LDL-C水平较正常组显著升高(P<0.05)。病证模型组ALB、ALB/GLB水平较正常组显著降低(P<0.05),病证模型组AST水平较正常组显著升高(P<0.05)。结论在异常黏液质阳痿病证大鼠模型中,可能存在肝细胞损伤及脂代谢紊乱。

伊木萨克片对异常黏液质型阳痿病证大鼠模型性腺轴调节作用的形态学研究

目的研究伊木萨克片对异常黏液质阳痿病证大鼠性腺轴形态学的影响,探寻其对生殖激素调节作用的形态学基础。方法取90只性功能正常雄性SD大鼠,其中10只为正常对照组,余80只为造模组,采用芫荽实+菠菜实+湿寒性环境的干预条件建立异常黏液质证候模型,20w后从证候模型中筛出阳痿病证模型,并将其分为病证模型组、药物干预组,干预2w后,观察下丘脑、垂体和睾丸形态学变化。结果 (1)下丘脑:正常组组织结构与细胞形态完好。病证模型组基质疏松,呈网状结构,轻度水肿;超微结构可见,神经胶质细胞基质密度下降,核周隙增宽,线粒体水肿呈空泡样病变,内质网扩张,神经元核膜界线不清,线粒体基质密度下降,粗面内质网扩张。药物干预组得到一定程度修复。(2)垂体:正常组结构完好。病证模型组基质疏松,轻度水肿;超微结构可见,内质网明显扩张,线粒体普遍空泡样变。药物干预组细胞排列紧密,粗面内质网扩张减少,有一定修复。(3)睾丸:正常组结构完好。病证模型组可见生精小管明显变形,各级生精细胞数量明显减少,间质减少;超微结构显示,生精细胞数量减少且排列紊乱,可见有精原细胞、精母细胞核固缩,精子细胞界限模糊不清。药物干预组生精细胞数量明显增多,支持细胞增加,管腔内可见一定数量的精子。结论异常黏液质型阳痿病证大鼠性腺轴形态学可发生明显改变,维药伊木萨克片有促进其修复的作用。

异常黏液质证候大鼠甲状腺轴改变的研究

目的研究维医异常黏液质证候大鼠模型甲状腺轴形态与功能的改变,探讨该证候发生、发展的内分泌机制。方法选用100只正常雄性SD大鼠,选取其中10只为正常组,其余90只为造模组,在芫荽实+菠菜实+湿寒性环境的干预条件下建立异常黏液质证候模型,20w后筛选出阳痿病证模型,将其余证候模型分为证候模型组、药物反证组,反证2w后,对其外周血中甲状腺轴相关激素进行检测,并在光镜和电镜下观察甲状腺轴的形态学变化。结果 (1)证候模型组血清游离甲状腺素(free thyroxine,FT4)、四碘甲状腺原氨酸(thyroxine,T4)水平显著低于正常组(P<0.05),药物反证组FT4和游离三碘甲状腺原氨酸(free triiodothyronine,FT3)较证候模型组显著升高(P<0.05),其余各组间差异无统计学意义(P>0.05)。(2)下丘脑:正常组结构完好。证候模型组基质疏松,大部分细胞核深染均一;超微结构显示神经胶质细胞基质密度下降,内质网明显扩张,神经元核膜界线不清。药物反证组基质水肿明显减轻;超微结构可见神经胶质细胞基质密度均一,核型规则。(3)垂体:正常组结构完好。证候模型组基质疏松较轻,细胞轻度水肿;超微结构可见细胞排列紧密,胞质中有较多分泌颗粒,内质网扩张明显,线粒体空泡样变。药物反证组基质疏松明显改善;超微结构可见细胞排列紧密,核型规则,内质网扩张,少部分线粒体水肿。(4)甲状腺:正常组结构完好。证候模型组滤泡上皮细胞增生不明显,间质细胞增生;超微结构显示甲状腺滤泡上皮细胞呈立方形,游离面微绒毛较多且排列不整齐,细胞核形状不规则,基质密度下降,内质网扩有所扩张,线粒体数量减少。药物反证组间质细胞增生明显减轻;超微结构显示甲状腺滤泡上皮细胞呈扁平状或立方状,核呈椭圆形,基质密度升高,粗面内质网轻度扩张。结论维医异常黏液质证候大鼠模型甲状腺素水平降低,甲状腺轴形态学发生明显的改变,提示,甲状腺轴的功能改变在异常黏液质证的发生发展中发挥重要作用。

维医异常黏液质证候模型性腺轴形态学改变的研究

目的研究维医异常黏液质证候大鼠模型性腺轴形态学的改变。方法选用90只性功能正常的雄性SD大鼠,随机取10只为正常组,余80只为造模组,采用芫荽实+菠菜实+湿寒性环境的干预条件建立异常黏液质证候模型,20w后从证候组中筛出阳痿病证模型后,将其余证候模型分为证候模型组、自然反证组,反证2w后,观察下丘脑、垂体和睾丸的形态学变化。结果 (1)下丘脑:正常组结构完好。证候模型组基质疏松,轻度水肿;超微结构可见神经胶质细胞基质密度下降,线粒体水肿呈空泡样病变,内质网扩张,神经元核膜界线不清。自然反证组有轻度修复。(2)垂体:正常组结构完好。证候模型组基质疏松,轻度水肿;超微结构发现内质网明显扩张,线粒体普遍空泡样变。自然反证组有轻度修复。(3)睾丸:正常组结构完好。证候模型组可见生精小管明显变形,间质减少,生精细胞数量及层数明显减少;超微结构显示支持细胞核形不规则,细胞基质密度变深,内质网扩张呈囊泡状,精原细胞及精母细胞有坏死。自然反证组轻度恢复,但较正常组区别明显。结论维医异常黏液质证候大鼠模型性腺轴形态学可发生改变,提示性腺轴形态学改变可能是该证候引起的性腺轴神经内分泌改变的组织病理学基础。

基于iTRAQ标记结合IPA生物分析平台筛选异常黏液质型阳痿病证大鼠血清蛋白质组学研究

目的应用iTRAQ标记技术结合IPA生物分析平台,筛选异常黏液质型阳痿病证特异性差异表达蛋白候选标志物,并探讨其分子机制。方法建立异常黏液质证候模型,并筛选阳痿病证模型后,分为正常组(N)、证候组(B1)和病证组(A1)共3组(n=10),分离血清,进行iTRAQ标记结合LC-MS-MS蛋白质组学分析,应用IPA在线生物平台对异常黏液质型阳痿病证组大鼠血清差异表达蛋白进行蛋白质调控网络分析、生物功能分析、典型通路分析和生物标志物筛查分析。结果通过蛋白质组学技术获得61种异常黏液质型阳痿病证血清差异蛋白,IPA分析结果为,候选差异表达蛋白质中6种与血管内皮功能相关;3种与平滑肌活动相关;10种与炎症相关。参与的主要生物学过程为损伤反应、炎症反应和防御反应等,涉及的主要通路为LXR/RXR通路和FXR/RXR通路等,并获得与勃起功能障碍疾病相关的标志物4个,分别是C反应蛋白、血管紧张素原、T-激肽原1以及β-2-糖蛋白1。结论炎症和血管内皮功能改变可能在该病证发生发展中发挥着关键性作用,上述4种蛋白可能可以作为异常黏液质型阳痿病证大鼠与勃起功能障碍疾病相关的血清候选差异蛋白。