缺氧诱导因子和促红细胞生成素及其受体基因在绵羊各组织中表达量

【目的】研究缺氧诱导因子(HIF)及其下游靶基因促红细胞生成素(EPO)及其受体(EPOR)在绵羊正常生理状况下各组织的表达,为靶向调控或缓解绵羊缺氧应激的研究提供组织学依据。【方法】采用实时荧光定量PCR方法,检测4只新疆细毛羊14种组织中HIF、EPO和EPOR基因的相对表达量。【结果】HIF-1α和HIF-2α基因均在绵羊肺组织的相对表达量最高,且极显著高于其它组织(P<0.01);在肺脏HIF-2α基因的表达量约为HIF-1α表达量的5.2倍。EPO基因在绵羊肾脏的相对表达量最高且显著高于垂体、结肠、脾脏、盲肠、肝脏、肾上腺、瘤胃、下丘脑以及心脏(P<0.05)。EPOR基因在肺脏的表达量最高,肺脏和睾丸的相对表达量显著高于脾脏、下丘脑、肾脏、心脏等组织(P<0.05)。【结论】HIF-1α、HIF-2α和EPO及其受体基因在绵羊的肺部或肾脏的高表达,可能是绵羊缺氧应激感受及其调控的重要器官。

大蒜醇提液对小鼠离体小肠平滑肌运动的影响

【目的】研究大蒜醇提液对胃肠运动的影响,了解其可能的作用机制。【方法】用生物信号处理系统监测大蒜醇提液对小鼠离体小肠平滑肌运动的影响。【结果】2倍浓度递增(0.025%-0.4%)的大蒜醇提液剂量依赖性抑制小肠收缩幅度(P<0.05),但对收缩张力无影响(P>0.05);大蒜醇提液抑制小肠收缩幅度的最效浓度为0.2%,小肠收缩幅度仅为用药前26%±7%(P<0.01);0.2%大蒜醇提液与M-受体激动剂氯贝胆碱或KCl联合用药对小肠收缩张力、收缩幅度、峰值和曲线下面积与这两种药物单独用药比差异均不显著(P>0.05)。【结论】大蒜醇提液对小鼠离体小肠平滑肌的运动具有抑制作用,且该抑制作用可能同抑制胆碱能M-受体和阻止细胞内钾离子外流减少无关。

胃泌素和胆囊收缩素及其受体氨基酸序列信息学比较分析

【目的】胃泌素(GAS)和胆囊收缩素(CCK)具有较多相似性,但两种激素与其受体(CCK-A和CCK-B)亲和力不同,研究利用生物信息学的方法,比对羊GAS和CCK及其受体氨基酸序列与其它动物序列的不同,为不同动物这两种多肽及其受体蛋白抗原设计和活性多肽筛选等提供参考。【方法】通过UniProt数据库检索各种动物GAS和CCK及其受体氨基酸序列进行比对,并进行全氨基酸序列进化树分析。【结果】除了鸡和鱼,其他动物GAS的C-端7个氨基酸完全相同;除了豚鼠外,CCK的C-端10个氨基酸序列完全相同;羊与牛的GAS-34及CCK-33氨基酸序列完全相同。羊与牛,大鼠与小鼠、狗与猫的CCK-A和CCK-B均分别在同一个分支上;从GAS和CCK及受体全氨基酸序列(包括信号肽和原肽)来看,禽类和鱼类序列同哺乳动物差距均较大;绵羊CCK-A与CCK-B氨基酸序列相似性仅为45.094%。【结论】GAS和CCK的C-端氨基酸序列在不同动物之间均具有高度的保守性,而N-端为变化区域。

胃泌素及其受体基因在绵羊部分组织中表达量的检测

为了探究胃泌素(GAS)及其特异性CCK-B受体(CCK-BR)在反刍动物各组织的分布量,本试验用实时荧光定量PCR的方法检测了4只新疆细毛羊各组织中GAS和CCK-BR基因的相对表达量,用2^-△△Ct法比较Ct值。试验结果显示,GAS基因在皱胃窦中表达量最高(1321±482),且极显著高于其他组织(P<0.01),而其他组织之间差异不显著(P>0.05);CCK-BR基因在皱胃底中表达量最高(62.5±11.5),且极显著高于其他组织(P<0.01),在垂体表达量极显著高于除皱胃底以外的其他组织(P<0.01),在空肠、瓣胃、睾丸和肺中的表达量显著高于肾上腺和肾(P<0.05),其他各组织之间差异不显著(P>0.05)。该试验结果表明,反刍动物GAS主要来源于皱胃窦,而且主要在皱胃底和垂体等部位发挥生物学作用。

饲喂荨麻干草对羊胃肠动力的影响

【目的】研究荨麻作为粗饲料对反刍动物胃肠动力的影响。【方法】以25%、50%和100%麻叶荨麻干草替代苜蓿干草饲喂新疆细毛羊,在饲喂试验的第1d、第7d、第14d、第21d和第28d监测其对胃肠动力的影响。【结果】第7d100%荨麻组饲喂后开始反刍时间显著晚于对照组(P<0.05);第21d50%荨麻组和100%荨麻组羊只一个食团咀嚼次数分别显著(P<0.05)和极显著(P<0.01)少于对照组;一个反刍过程持续时间各组之间差异不明显(P>0.05);随着荨麻饲喂天数和添加比例的增加,在饲喂后4h内不出现反刍羊只数量显著增加;瘤胃蠕动频率在第28d100%荨麻组显著少于对照组(P<0.05);荨麻饲喂天数与饲喂后排便延迟时间在50%荨麻组(R2=0.7546)和100%荨麻组(R2=0.7531)具有强相关性。【结论】绵羊采食一定比例荨麻干草,具有减弱胃肠动力的作用。提示荨麻或其提取物有望用于缓解反刍动物胃肠痉挛等消化道疾病。

荨麻皮刺水提液对小鼠离体肠平滑肌运动的影响

【目的】研究荨麻促进消化道平滑肌运动的植株主要部位,分析其可能的受体机制。【方法】用生物信号处理系统监测麻叶荨麻皮刺与内茎(不含皮刺)水提液对小鼠离体小肠平滑肌的影响。【结果】2倍浓度递增(0.1%~3.2%)的皮刺剂量依赖性增加小肠收缩幅度、收缩张力和收缩峰值(P<0.05),但对收缩频率无影响(P>0.05);而内茎浓度达0.4%后使小肠收缩频率减慢(P<0.05)。0.8%皮刺一次性用药后小肠收缩幅度、收缩张力、收缩峰值均显著升高(P<0.05),而同剂量内茎对小肠收缩无影响(P>0.05)。M-受体阻断剂ATr与0.8%皮刺联合用药可使收缩幅度显著减弱(P<0.05)。【结论】荨麻植株的皮刺对消化道平滑肌具有促进作用,且可能部分作用是通过激活M-受体而实现。

蛙皮素样肽家族及其受体氨基酸序列信息学比较分析

【目的】研究反刍动物蛙皮素样肽家族多肽及其受体的保守性。为不同动物,特别是反刍动物这2种蛙皮素样多肽及其受体蛋白抗原设计和活性多肽筛选等研究提供参考。【方法】采用生物信息分析学的方法,通过UniProt数据库比较牛的蛙皮素样肽家族胃泌素释放肽(Gastrin-releasing peptide, GRP)和神经介素B(Neuromedin B, NMB)2种多肽及其特异性受体GRP-R和NMB-R与其他动物氨基酸序列的差异性。【结果】13种动物成熟GRP多肽C-端的8个氨基酸序列完全相同,牛GRP氨基酸序列与绵羊、猪和豚鼠最高,分别为88.7%、77.8%和77.8%,与其他动物相似性低于74.1%。10种动物成熟NMB多肽C-端10个氨基酸序列完全相同。牛GRP-R与狗、马和猪等相似性最高,分别为96.1%、94.3%和94.0%,牛NMB-R与猪、人和马相似性最高,分别为92.3%、91.5%和91.0%;牛GRP-R与NMB-R相似性仅为62.2%。【结论】GRP和NMB的C-端氨基酸序列在不同动物之间均具有高度的保守性,而N-端为变化区域,且GRP-R和NMB-R氨基酸序列在动物之间保守性较高。

生长激素释放肽和胰岛素样生长因子Ⅰ系统基因在绵羊器官中表达水平的研究

为了探究生长激素释放肽(Ghrelin)和胰岛素样生长因子Ⅰ(IGF-Ⅰ)系统基因在绵羊各器官中的表达水平,试验以4只新疆细毛羊为研究对象,无菌采集心脏、肝脏、脾脏、肺脏、肾脏、结肠、空肠、十二直肠、回肠、盲肠、肾上腺、下丘脑、垂体、瘤胃、皱胃底、皱胃窦、瓣胃、睾丸、网胃和直肠,采用实时荧光定量PCR方法检测Ghrelin、CHS-R、GOAT、IGF-Ⅰ、IGF-ⅠR基因的相对表达量。结果表明:Ghrelin基因在绵羊皱胃底中的相对表达量最高,极显著高于其他器官(P<0.01);GHS-R基因主要表达于绵羊垂体和肾上腺,在垂体中的相对表达量最高,极显著高于其他器官(P<0.01),肾上腺中的相对表达量显著高于除垂体之外的其他器官(P<0.05);GOAT基因在绵羊皱胃底中的相对表达量最高,极显著高于其他器官(P<0.01);IGF-Ⅰ基因在绵羊肝脏中的相对表达量最高,显著高于除肺脏和肾上腺的其他器官(P<0.05);IGF-ⅠR基因在绵羊肾脏中的相对表达量最高,显著高于除肺脏、十二指肠和垂体外的其他器官(P<0.05)。说明在反刍动物中Ghrelin系统基因主要在垂体和皱胃底发挥作用,IGF-Ⅰ系统基因主要在肝脏和肾脏发挥作用。