不同生境蚊类生态学研究

目的对云南省西双版纳州勐腊县最南端不同生境的蚊类群落特征进行研究,探讨开发区和未开发区蚊类群落的变化及几种主要媒介蚊虫在不同生境中的季节性分布。方法用CDC诱蚊灯在人、牛房通宵捕蚊,对所获数据进行群落学特征分析。结果捕获蚊虫2亚科7属12亚属,开发点人房捕蚊24种2286只,牛房捕蚊28种3689只;未开发点人房捕蚊30种1364只,牛房捕蚊35种4312只。开发点人房优势蚊种为微小按蚊,优势度61.69,未开发点优势蚊种为吉普按蚊,优势度31.65;牛房开发点优势蚊种为微小按蚊、中华按蚊、三带喙库蚊和伪杂鳞库蚊,优势度分别为47.07、33.61、35.03和30.71;未开发点优势蚊种为吉普按蚊、乌头按蚊、中华按蚊、微小按蚊、三带喙库蚊、伪杂鳞库蚊和棕头库蚊,优势度分别为75.48、63.23、50.86、36.96、59.65、54.57和50.71。结论两地群落蚊虫均为丰富,群落组成及结构均较复杂,两地各优势蚊种数量分布牛房基本均匀,人房不尽相同。

云南省中华按蚊、杰普尔按蚊种群与环境因素关系的地理信息系统分析

目的研究云南省南部地区中华按蚊(Anopheles sinensis)和杰普尔按蚊(An.jeyporiensis)与地理环境因素的关系,探讨在云南省南部地区西部开发新村镇建设中对疟疾媒介蚊虫种群的可能影响。方法应用地理信息系统对云南省南部勐腊县的龙塘村及东方红村的中华按蚊和杰普尔按蚊种群与环境因素之间的关系进行分析。结果各样点中华按蚊优势度可以用线性模型拟合,线性模型为d=0.3621-3.26×10-4×DTF-8.0854×10-7×KFA(R2=0.642,F检验,P=0.000);DTF与样点中华按蚊优势度呈负相关(Person=-0.683,P=0.002),而KFA与样点中华按蚊优势度也呈负相关关系(Person=-0.735,P=0.001)。各样点杰普尔按蚊种群密度可以用线性模型拟合,线性模型为Ni=263-0.0541×KRL(R2=0.633,F检验,P=0.000),KRL与样点杰普尔按蚊种群密度呈负相关关系(Person=-0.825,P=0.000)。各样点杰普尔按蚊优势度可以用线性模型拟合,线性模型为d=7.9204×10-4×DTF-0.0232(R2=0.267,F检验,P=0.023),DTF与样点杰普尔按蚊优势度呈正相关关系(Person=0.562,P=0.012)。结论在云南省南部地区西部开发的新村镇建设中,相关环境因素的变化有可能会引起中华按蚊和杰普尔按蚊2种媒介蚊虫种群的变化。

我国蚊虫体内感染的Wolbachia的wsp基因序列测定与分析

测定了我国尖音库蚊复合组和白纹伊蚊蚊虫体内感染的Wolbachia株的wsp基因序列。核苷酸和氨基酸的同源性及系统关系分析表明 ,我国尖音库蚊复合组和白纹伊蚊中Wolbachia株的wsp基因序列与Pip组其它株的核苷酸及氨基酸同源性分别为 98%～ 10 0 %和 97%～ 10 0 % ,属B大组Wolbachia中的Pip组。

蚊虫群落与环境因素关系的地理信息系统分析

目的研究云南省南部地区的新移民村建设对蚊虫群落动态的影响。方法应用地理信息系统(GIS)分析云南省南部地区2个自然村中蚊虫群落与相关环境因子的关系。结果水稻田面积对于样点蚊虫群落最具有影响力,水稻田面积与蚊虫群落的种类数量、个体数、多样性、优势度均有统计学上的相关关系;居民点距离水稻田的距离也与居民点中蚊虫群落的均匀度呈正相关,而居民点距离河流距离与居民点中蚊虫群落的种类数量则呈负相关。结论在云南省南部地区进行的新村镇建设过程中,相关开发措施带来的环境因素的改变,会引起原来环境中的蚊虫群落的相应变化。

白纹伊蚊经滞育卵传递登革Ⅱ型病毒的实验研究

目的 证明登革Ⅱ型病毒能否在白纹伊蚊滞育卵内存活并传至子代。方法 采用逆转录 -聚合酶链反应检测病毒 ,C6 36细胞培养分离病毒。结果 能在白纹伊蚊滞育卵内检测到病毒 ,且滞育卵解除滞育后 ,子 1代幼虫和成蚊中均检测到病毒 ,总的批阳性率为 9.6 % ,子代最低感染率为 1∶2 94.3 ;第一个生殖营养周环子代未分离到病毒 ;第二、三生殖营养周环子代间最低感染率差异无显著性 ( χ2 =0 .0 1,P >0 .0 5 )。结论 试验证明登革Ⅱ型病毒能在白纹伊蚊滞育卵内存活并传至子代。

登革Ⅱ型病毒经白纹伊蚊滞育卵的传递

采用C6 36细胞培养分离病毒的方法检测感染登革Ⅱ型病毒的白纹伊蚊Aedesalbopictus滞育卵孵化的F1 代蚊虫感染率 ,从第一个生殖营养周期子代蚊虫中未分离到病毒 ,第二与第三生殖营养周期子代蚊虫最低感染率没有显著性差异 (χ2 =0 0 1,P >0 0 5 ) ,感染子代的批阳性率为 9.1% ,最低感染率为 1∶330 ;间接免疫荧光检测结果表明感染登革Ⅱ型病毒的白纹伊蚊滞育卵孵化的子代成蚊能通过叮咬将登革病毒传播给敏感乳鼠。这些研究结果表明登革病毒能在媒介滞育卵内存活并传至子代 。

几种蚊虫线粒体DNA-16S rRNA序列及其相互关系的研究

测定我国尖音库蚊复合组 4亚种 (尖音库蚊、淡色库蚊、致倦库蚊和骚扰库蚊 )、三带喙库蚊、白纹伊蚊和中华按蚊的线粒体DNA 16SrRNA基因 (mtDNA 16SrRNA)序列 ,发现我国尖音库蚊复合组 4亚种mtDNA 16SrRNA序列基本一致 ,长度为 5 5 5bp(5 5 4bp) ,GC含量为 2 5 4 1%。该序列与其他 3种蚊虫在种间存在差异 ,与三带喙库蚊的种间差异为 0 5 4% ;与白纹伊蚊的种间差异为 5 77% ;与中华按蚊的种间差异为 9 6 2 %。

微小按蚊复合体rDNA-ITS2序列差异及遗传多态性研究

本研究对我国微小按蚊广西、云南、海南 6个地理株和越南Caonguen株rDNA ITS2PCR扩增片段和序列差异作分析 ,获得基因片段总长为 5 6 1bp～ 5 6 3bp ,发现地理株间ITS2序列差异程度不同 ,分析表明元江株为微小按蚊C型 ;其余 6个地理株为A型。应用限制性内切酶Sau96Ⅰ对微小按蚊复合体rDNA ITS2PCR扩增片段作酶切分型 ,结果同样显示两型差异 。

中华硬蜱、越原血蜱和青海血蜱经期传播莱姆病螺旋体的实验研究

以实验室培育的非感染中华硬蜱、越原血蜱和青海血蜱刺叮人工感染 2 1天的阳性KM鼠 ,利用分离培养和PCR方法检测蜱对莱姆病螺旋体Borreliagarinii的保持能力以及体内螺旋体对敏感动物的感染能力。中华硬蜱、越原血蜱和青海血蜱非感染幼蜱均可以通过吸血获得莱姆病螺旋体 ,然而 ,它们在饱血、消化、蜕皮和再次吸血过程中对莱姆病螺旋体的保持能力差异很大。只有中华硬蜱可以保持活的莱姆病螺旋体直至蜕化为下一发育阶段 ,蜕化后仍携带莱姆病螺旋体并对敏感KM鼠有感染能力。而越原血蜱和青海血蜱对莱姆病螺旋体的保持能力不能跨越消化、蜕皮阶段 ,蜕化后这两种血蜱不再携带莱姆病螺旋体 ,因此 ,这两种血蜱不具备经期传播能力 ,作为莱姆病媒介的可能性不大。中华硬蜱于幼蜱到若蜱以及若蜱到成蜱两个阶段均具备经期传播莱姆病螺旋体的能力 。

登革Ⅱ型病毒在白纹伊蚊体内分布的研究

利用蚊虫连续石蜡切片免疫组织化学技术 ,对登革Ⅱ型病毒 (DEN 2 )感染白纹伊蚊Aedesalbopictus后的散播时间、程度及组织器官的感染顺序进行监测 ,以了解DEN 2在媒介白纹伊蚊体内的分布规律。结果表明 :大剂量感染登革Ⅱ型病毒后 ,在蚊虫消化道的主要部位以及大多数组织器官包括神经及内分泌系统在内 ,如涎腺、脑、神经节等亦检测到病毒抗原。登革Ⅱ型病毒一旦感染并逸出中肠会迅速侵染其它组织。从各组织感染率的高低推断 ,病毒逸出中肠后通过血淋巴传播到其它组织的顺序通常为 :前肠、涎腺、咽部神经节、脑及食管下神经节。

云南南部地区三带喙库蚊与伪杂鳞库蚊种群与环境因素关系的地理信息系统分析

三带喙库蚊是云南地区主要乙脑媒介,而伪杂鳞库蚊也被怀疑在云南地区能起到传播乙脑的作用,它们的种群动态与特定地区的环境因素密切相关,也关系到当地乙脑的流行态势。本研究选择云南省南部边境地区孟腊县2个村:龙塘村和东方红村,在2村内设置16个诱蚊采样点,并应用地理信息系统对2村的三带喙库蚊和伪杂鳞库蚊种群与环境因素之间的关系进行分析。研究结果表明,灯点离水稻田最近空间水平距离(DTF)与灯点平方公里缓冲区间水稻田面积(KFA)、样点伪杂鳞库蚊种群优势度呈正相关关系;样点三带喙库蚊的优势度与灯点离河流最近空间水平距离(DTR)存在负相关关系;KFA与样点三带喙库蚊种群密度呈正相关关系。文章还在此基础上对西部开发中环境改变对这两种蚊虫乃至乙脑流行的可能影响进行了进一步探讨。

我国蚊虫中昆虫共生微生物Wolbachia感染的研究

目的 :研究我国蚊虫中昆虫共生微生物Wolbachia的感染情况。方法 :采用依据Wolbachia的wsp基因序列建立的PCR分组检测方法 ,对我国蚊科中库蚊属、伊蚊属和按蚊属中一些蚊虫种类进行了检测。结果 :库蚊属中尖音库蚊复合组 4个亚种的实验室种群和伊蚊属中的白纹伊蚊的 4个地理株种群均有感染 ;感染的Wolbachia株属B组中的 pip组 ;同时在白纹伊蚊种群中还发现了有A组和B组Wolbachia的双重感染 ;而同时检测的三带喙库蚊、刺扰伊蚊、埃及伊蚊的 2个地理株、中华按蚊和斯氏按蚊没有发现Wolbachia的感染。结论 :本研究应用该方法 ,成功地对我国蚊虫体内感染的Wolbachia株进行了检测与分组。

02Ⅰ型摩托车载超低容量喷雾系统的研制及对蚊虫的杀灭效果

目的研制02Ⅰ型摩托车载超低容量喷雾系统，用于蚊媒病暴发和自然灾害发生时媒介生物紧急控制。方法02Ⅰ型摩托车载超低容量喷雾系统由运载工具、超低容量喷雾器和控制系统3部分组成，效果评价试验在傍晚蚊虫活动高峰期进行，用帐诱法采样，以试验区密度下降率表示试验结果。结果02Ⅰ型摩托车载超低容量喷雾系统机械性能稳定、越野性能强、工作效率高、操作方便。喷洒1％富右旋苯氰菊酯超低容量制剂，用药剂量为5．25L／hm^2时，蚊虫密度即时下降率为84％～96％，当剂量增加到6．75L／hm^2时，蚊虫密度即时下降率可达100％。喷雾处理24h后，试验区内蚊虫密度即大幅度回升，密度下降率仅为11％～40％，有的试验区部分蚊种甚至恢复到处理前的水平，说明超低容量喷雾野外防治蚊虫没有持效，增加剂量亦不能提高持效作用。结论02Ⅰ型摩托车载超低容量喷雾系统对蚊虫速杀效果好，是蚊媒病暴发以及自然灾害发生时媒介生物紧急控制的有效工具。

云南南部新建村庄与现有村庄中三带喙库蚊与伪杂鳞库蚊种群动态的比较

对云南省南部新建移民东方红村和现有的龙塘村中三带喙库蚊与伪杂鳞库蚊种群动态情况进行了比较。结果表明:2个村庄中这2种媒介蚊虫的种群动态趋势不同;东方红村房屋内,除6月三带喙库蚊种群密度比伪杂鳞库蚊明显要高以外,其它月份二者种群密度差异不明显(P>0.05);整个诱集期间,伪杂鳞库蚊的种群密度(D)和种群优势度(d)在东方红村房屋(D=10只.灯-1,d=0.04)与牛舍(D=52只.灯-1,d=0.06)中都比龙塘村房屋(D=33只.灯-1,d=0.10)与牛舍(D=99只.灯-1,d=0.09)中的低。表明云南南部地区新移民村建设中,乙脑媒介种群随着环境开发产生变化。

我国尖音库蚊复合组蚊虫核糖体DNA第2内转录间隔区序列测定与分析

通过对我国尖音库蚊复合组蚊虫及三带喙库蚊核糖体DNA第二内转录间隔区 (rDNA ITS2 )的序列测定 ,表明rDNA ITS2序列在我国尖音库蚊复合组种内亚种间和亚种内的变异存在有重叠现象。分子系统关系分析没有发现与形态学亚种阶元分类地位的一致性 ,但在种间差异明显。

淡色库蚊氯菊酯抗性品系和敏感品系的生物学特性

目的 比较淡色库蚊氯菊酯抗性品系和敏感品系生物学特性的差异。 方法 在实验室观察淡色库蚊氯菊酯抗性品系及敏感品系的吸血、繁殖和发育等生物学特性 ,构建实验种群生命表。 结果 淡色库蚊氯菊酯抗性品系吸血率低于敏感品系 ,卵、幼虫和蛹的发育历期及成虫寿命均长于敏感品系 ,卵期死亡率高于敏感品系。以上各项 ,两种品系间差异均具有显著性意义 (P <0 0 1)。抗性品系相对于敏感品系的适合度为 0 5 8。 结论 淡色库蚊氯菊酯抗性品系表现出对生长发育和繁殖的不利性。

用随机扩增多态性DNA(RAPD)技术区分不同地理株白纹伊蚊

目的 对来自北京、广州、成都、上海和日本的冲绳及长乐寺 6个不同地理株的 12只雄蚊进行随机扩增多态性DNA(RAPD)分析。方法 RAPD -PCR。结果 UPGMA法构建的系统聚类图表明 ,12只白纹伊蚊可归为明显不同的两个组 ,不同地理株之间存在着显著的遗传分化。结论 用RAPD法可以区分不同地理株的白纹伊蚊。

Wolbachia在我国蚊虫体内感染组织定位的透射电镜观察和PCR检测

通过透射电镜的超微形态观察和分组织的PCR检测发现 ,在我国尖音库蚊复合组和白纹伊蚊体内感染的Wolbachia株不仅局限于生殖组织内。在淡色库蚊 (Cx .pipienspallens)和骚扰库蚊 (Cx .pipiensmolestus)雌蚊卵巢、中肠和胸部肌肉组织中都有B大组Pip组Wolbachia株的感染 ,而头部没有检测到感染。在白纹伊蚊雌蚊卵巢、中肠组织中存在A大组和B大组Pip组的Wolbachia株双重感染 ,胸部肌肉组织中仅发现B大组Pip组Wolbachia株的单独感染 。

埃及伊蚊抗凝血因子Xa基因片段的克隆测序

目的 :探讨我国登革热的重要媒介蚊种埃及伊蚊唾液中的抗凝血因子Xa基因。方法 :用兼并引物PCR方法从我国的埃及伊蚊基因组DNA扩增抗凝血因子Xa基因片段 ,克隆入测序T载体进行测序。结果 :扩增出抗凝血因子Xa基因片段长度约 30 0bp ,测序后发现与报道的埃及伊蚊的cDNA基因相应序列多了一段 6 3bp内含子 ,并有几个碱基和氨基酸序列变化。结论 :我国海南岛的埃及伊蚊抗凝血因子Xa基因有一定差异 ,可能对应的是一个新的基因型。