TRIM5α抗HIV-1功能的研究

目的研究TRIM5α抗HIV-1功能。方法从vero细胞中提取总RNA,采用反转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)技术获得非洲绿猴TRIM5α全基因序列。用PCR技术从人、恒河猴和非洲绿猴TRIM5α全基因序列中扩增B30.2和coiled coil等功能片段。将测序鉴定过的目的基因克隆到真核表达载体pEGFP-C3上,与绿色荧光蛋白融合表达,荧光显微镜观察目标蛋白在细胞内的定位。利用VSV-G膜蛋白质粒和HIV-1骨架质粒包装假病毒,通过假病毒感染实验定量检测TRIM5α及其功能片段对HIV-1的抑制功能。结果成功地构建了带有绿色荧光蛋白标签的TRIM5α及其功能片段真核表达质粒。人、恒河猴和非洲绿猴TRIM5α及其功能片段蛋白均定位于细胞质,其中hTRIM5α、rhTRIM5α、AGMTRIM5α、rh-TRIM5αCC/B30.2、AGM-TRIM5αCC/B30.2融合蛋白以高聚状态存在于胞质内,而h-TRIM5αCC/B30.2和不同种属TRIM5αB30.2融合蛋白则均匀分布于胞质内。恒河猴和非洲绿猴TRIM5α及CC/B30.2对HIV-1假病毒的抑制率均达70%,而人TRIM5α及各种属B30.2对假病毒的抑制率低于20%。结论恒河猴和非洲绿猴TRIM5αCC/B30.2功能结构域对HIV-1有拮抗作用,为TRIM5α最小功能结构域的确定及结构的解析提供了可靠的实验依据。

长阳县鲟鱼产业链发展的现状及思考

鲟鱼为我县特色水产品,是最能代表长阳县水产实现新旧动能转换和高质量发展的产业。对国际国内鲟鱼养殖现状和我县发展潜力进行了分析,建议将我县鲟鱼产业作为水产产业链的重中之重,做大做强,打造为水产品金字招牌。一、国际国内鲟鱼产业形势分析鲟鱼产品主要包括商品鲟鱼和鲟鱼子酱两大类。1.商品鲟鱼。

福氏痢疾杆菌组氨酸合成中双功能焦磷酸水解酶和磷酸核糖环化水解酶双功能蛋白的初步研究

福志贺氏菌属是一类革兰氏阴性杆菌,是引起人类细菌性痢疾的主要致病源。以福志贺氏痢疾杆菌2a型301株全基因组为模板、以pET22b-(+)为载体、克隆了一个关键基因:组氨酸合成途径中双功能焦磷酸水解酶和磷酸核糖环化水解酶蛋白(简称:sf2088)。以BL21(DE3)为表达菌株,优化表达条件,获得了可溶表达的蛋白。经过亲和层析和分子筛层析获得目标蛋白。采用分析超速离心和动态光散射实验,对纯化后的蛋白进行稳定聚集状态的条件搜索,结果发现锌离子对稳定其聚合状态很重要。通过正交实验,获得蛋白保持稳定聚集态的条件。这对该酶的进一步研究奠定了基础。

美洲鲥工厂化循环水养殖技术

本文基于在美洲鲥工厂化循环水养殖技术方面的探索尝试,结合几年来的养殖管理经验,总结了美洲鲥工厂化循环水养殖过程中的关键技术要点,以期能为广大养殖同行提供参考借鉴。一、工厂化车间及养殖池养殖车间以钢结构大棚为宜,屋面为彩钢瓦夹芯板结合透明阳光板,顶部覆盖遮阳网。水泥池为圆形,面积10~20米2,深1.2米;池底部四周高、中间底,最低处设排污口;排水管出口处设置1米高的溢水管。