溶脲脲原体感染与男性不育

感染引起的男性不育已受到越来越多的关注。1972年Gnarpe和Friberg首次提出溶脲脲原体(Ureaplasmaurealyticum,UU)感染与男性不育有关,但迄今未能证实有关UU导致男性不育的机制更未阐明。本课题从微生物学和生殖生物学两个方面进行了深入系统的研究。

T细胞亚群分类与临床的联系

Ｔ细胞亚群分类与临床的联系陆德源上海第二医科大学（２０００２５）１免疫系统概述人体有一个完善的免疫系统，对入侵的外源性抗原物质（细菌、病毒等）和体内出现的异常细胞（肿瘤细胞、胞内微生物感染细胞等），能及时产生免疫应答予以杀灭，不致造成损伤。但当其结构...

衰老与自身免疫性疾病

人体随着衰老，体内免疫系统与其他系统一样也进行着生理性衰退，故老年人不仅易患感染性疾病和肿瘤。而且自身免疫性疾病的患病率也明显增高．

苦参总碱对小鼠脾细胞产生干扰素的影响

作者为了解苦参是否通过诱生干扰素而参与抗病毒作用,用微量细胞病变抑制法对苦参总碱在体外诱生小鼠脾细胞产生干扰素的作用进行了研究。结果表明苦参浓度在50～200μg/ml 能明显诱导脾细胞产生干扰素,且能明显对抗氢化考的松的抑制作用而促进干扰素产生增加,其作用与药物浓度(50～200μg/ml呈正相关。所以苦参可能通过诱导干扰素产生而发挥其抗病毒作用。

细胞凋亡荧光染色法检测肿瘤化疗药物敏感性并与MTT法的比较

本文根据化疗药物诱导肿瘤细胞产生凋亡的机制,采用细胞凋亡荧光染色法(AFS)分别检测了卵巢癌细胞株(3AO)、部分肺癌患者分离的癌细胞药物敏感性,并和传统的ATT法进行比较.用不同浓度的顺铂诱导3AO凋亡、两种方法学之间没有显著性差别(P>0.05);但用于肺癌患者分离的肿瘤细胞进行药物的筛选时,有显著性差别(P<O.05);AFS避免了MTT多种影响因素,比MTT快速、准确、敏感、重复性好,同时能观察凋亡、坏死及活细胞,有可能成为一种新的用于肿瘤化疗药物的筛选方法.

一种高活力分离肿瘤浸润淋巴细胞方法的建立

肿瘤浸润淋巴细胞（ＴＩＬ）的增殖力、活力、杀伤力是ＴＩＬ临床治疗的基本问题。由于Ｒｏｓｅｎｂｅｒｇ方法存在着许多不足之处。本实验室对其一些重要步骤进行了改进：①用单一冷胶原酶消化肿瘤组织块；②省去影响ＴＩＬ活力的离心操作；③ＴＩＬ培养４８ｈ内除去掺杂在ＴＩＬ中的肿瘤细胞等。由于除去了影响ＴＩＬ活力的抑制因素，ＴＩＬ的增殖率、生存率、活力、杀伤力明显增加。有８０％肿瘤组织的ＴＩＬ经扩增可超过１×１０￣９细胞数，生长周期曲线反映了冷酶法的增殖率超过Ｒｏｓｅｎｂｅｒｇ方法。本方法的建立，为ＴＩＬ克隆、建株打下了基础，显示了ＴＩＬ临床治疗潜能的提高。

苦参抗柯萨基B组病毒的初步研究

本文报道了苦参在体外及体内抗柯萨基B组病毒(CVB)的作用。在体外,自1:4稀释度向上,苦参粗提液对HeLa细胞的毒性作用已丧失,在1:32稀释度时,苦参仍能对抗CVB(CVB_1除外)对细胞的致病变作用。在体内,Balb/C小鼠经腹腔感染CVB_3m,12只对照组小鼠平均存活时间为126小时,而经苦参治疗的试验组12只小鼠,2只完全康复,其余10只平均存活时间为161小时,两者有显著差异,P<0.01。

苦参总碱抗柯萨奇B病毒作用机理的研究

在证实苦参具有抗柯萨奇Ｂ病毒（ＣＶＢ）作用的实验基础上，作者以纯化ＣＶＢ３作为病毒蛋白质对照，通过空斑测定及病毒蛋白质Ｌ－３５Ｓ－甲硫氨酸标记等方法，了解到纯化苦参总碱抗ＣＶＢ的作用机理是不影响病毒吸附、穿入，但它能进入细胞内影响病毒的生物合成，主要表现为抑制病毒蛋白质的合成。

病毒性心肌炎致病机理的实验研究——组织病理和心电图观察

BALB/C小鼠注射柯萨奇B3病毒(CVB3m)后,第2天出现病毒血症,并从心肝肾脑等脏器分离出病毒,肝组织呈肝炎或重症肝炎病理图象,第5天抗体产生,病毒血症终止,除心脏外,其它脏器中病毒消失。病理检查可见心肌坏死,第8,9天,心肌坏死达高峰,心肌内病毒、循环抗体消失。心肌超微结构显示线粒体、心肌纤维、心肌组织等进行性病变。89%(54/63)的小鼠种毒后第3天开始出现心电图改变,主要表现在P波倒置,QRS时间延长,房室传导阻滞和出现异常Q波。心电图检测的成功,对利用动物模型进行致病机理、免疫,药物治疗等研究提供了方便。

卵巢癌肿瘤浸润淋巴细胞某些细胞因子基因表达的研究

目的:研究卵巢癌肿瘤浸润淋巴细胞在体外扩增后某些细胞因子的表达.方法:利用RT-PCR和免疫学方法,分离5例刚分离的上皮性卵巢癌肿瘤浸润淋巴细胞(TIL)和其中3例腹水标本中肿瘤相关淋巴细胞(TAL),检测其在体外扩增后,IL-2,IL-2R,TNF-α,IFN-γ,IL-6等细胞因子基因的表达的水平与变化;测定细胞培养上清液中细胞因子的活性,分析TIL或TAL扩增前后杀伤肿瘤细胞的能力和免疫学特性的变化.结果:TIL在扩增前后的4周时间内,仅TNF-α mRNA基因表达是持续的,并可维持相当长一段时间;IFN-γmRNA基因的表达缺乏;IL-2mRNA基因表达只是一过性.体外加入抗CD3单抗或PHA(合适浓度)刺激TIL或TAL,IL-2,TNF-α,IhN-γmRNA表达明显增强.和TIL细胞因子基因表达不尽相同的是,TAL表达IL-6 mR-NA.结果还发现,体外IL-2的浓度对TIL的免疫学特性有很大的影响.结论:TIL在体外经rIL-2扩增后,免疫活性有明显提高.TIL的抗肿瘤活性在很大程度上依靠其分泌的多种细胞因子.

超抗原SEB和D-氨基半乳糖对小鼠肝细胞的作用观察

用超抗原葡萄球菌Ｂ型肠毒素（ＳＥＢ）、Ｄ－氨基半乳糖（Ｄ－ＧａｌＮ）及两者合用腹腔注射ＢＡＬＢ／ｃ小鼠，于２、６、１２、２４ｈ取肝脏和血标本，从形态学和生化指标来研究肝细胞的死亡模式；同时还检测了小鼠２４ｈ死亡率。结果发现单用ＳＥＢ可诱导肝细胞凋亡，其机制可能与ＴＮＦ、ＩＦＮ－γ等细胞因子的产生和作用有关。单用Ｄ－ＧａｌＮ可同时引起肝细胞凋亡和变性，ＳＥＢ和Ｄ－ＧａｌＮ合用２、６ｈ见肝细胞凋亡，１２ｈ后以肝细胞坏死为主，小鼠２４ｈ死亡率达５０％。因而，推测凋亡与坏死间存在一定的联系。

上海地区育龄期妇女、孕妇及其新生儿巨细胞病毒感染的调查

为调查上海地区人巨细胞病毒(HCMV)的感染情况,作者用间接酶联免疫吸附法(ELISA)检测1048份育龄期妇女、289对孕妇及其胎儿血清标本中HCMV特异性抗体。育龄期妇女HCMV-IgG阳性率为93.5％,<18岁、20～29岁和30～45岁组分别为54.9％、89.7％及95.4％,感染率随年龄增长而增加。HCMV感染与社会经济情况及婚姻状况有关。273份母血和266份脐血HCMV-IgG阳性,阳性率分别为94.46％和92.04％。HCMV-IgM阳性者母血13份,脐血10份,阳性率分别为4.49％和3.46％,表明产妇与其新生儿HCMV-IgM检出情况是密切相关的,胎儿可以从其HCMV-IgM阳性的母亲获得先天性感染。

溶脲脲原体与人精子共同抗原的研究

Shepard首先从非淋球菌性尿道炎患者分离到类似肺炎支原体样的微生物,因培养所形成的菌落微小被称为T株和T支原体。近年来按其能溶解尿素的特性被命名为解脲脲原体或溶脲脲原体(Ureaplasma urealyticum)。随着研究的深入,越来越多的证据表明该支原体对成人泌尿生殖道及对新生儿和胎儿具致病作用,并认为与某些不孕症有关。现将溶脲脲原体的一般特性、分离鉴定和致病作用做一简述。

幽门弯曲菌超微结构及其与胃粘膜上皮的关系

33例CP有关的慢性胃炎胃粘膜活检标本和31株CP菌株用透射和扫描电镜进行了研究。发现CP与弯曲菌属的其他菌种之间有明显不同,特别是菌体末端的形态和鞭毛的超微结构,提示CP究竟应否属弯曲菌属值得重新讨论。另外,CP对胃壁不溶性粘液层及胃粘膜上皮细胞表面有高度的亲和性,CP菌体粘附于上皮细胞表面有两种方式。一种是通过细丝状网状结构相粘。但菌体与上皮细胞表面之间相隔一定距离;另一种是细菌部分细胞壁与上皮细胞部分细胞膜之间直接相贴,中间几乎无间隔。这些展现了CP定居于胃壁表面的超微结构上的证据,为进一步研究CP的致病机理提供了线索。

柯萨奇B组病毒3型VPI基因疫苗免疫效果的研究

目的为研制防治病毒性心肌炎的基因疫苗打下基础。方法以带有CVB。P1、P2区核酸序列的pGEM质粒为模板，用PCR方法克隆CVB3VP1基因cDNA，插入真核表达载体pcDNA3中的HindⅢ和XbaⅠ位点之间，构建成重组质粒。经大量扩增纯化后，肌肉注射免疫BALB／c小鼠3次，用CVB3毒株攻击小鼠，取血及脾细胞检测其免疫效果。结果小鼠经3次免疫后，虽未测出明显免疫应答指标，但诱导了T、B细胞的免疫记忆反应，免疫组鼠在CVB3毒株攻击后，迅速诱导产生了强烈的二次免疫应答。结论CVB3VP1基因疫苗对CVB3毒株的攻击有一定程度的保护作用。

主要组织相容性复合体

主要组织相容性复合体陆德源上海第二医科大学（２０００２５）【编者按】由于分子生物学的介入，基础医学各学科都有不同程度的较大发展，疾病的发病机制研究、诊断手段亦大多深入到分子和基因水平。目前，免疫学比微生物学进展更快更广，但一些新型微生物可与临床学科结...

解脲支原体感染与男性不育

用高度纯化的人解脲支原体免疫家兔,获得兔抗人解脲支原体抗血清,以此抗血清(一抗)及羊抗兔 IgG 荧光抗体(二抗),分别处理20例正常生育男性和20例精液解脲支原体培养阳性的不明原因不育男性的精子,并在荧光显微镜下观察。结果显示:在不育男性部分精子的头部和(或)尾部有特异性的较强荧光结合,表明有解脲支原体吸附,并有大量畸形精子,多数为卷尾畸形。此外,用比浊法检测了正常生育男性与上述不育男性精液中快速运动相精子的百分含量(FRM)及平均速度(VRM)。不育男性组比生育组的 FRM 及 VRM 都显著降低(分别为 P<0.01和 P<0.001)。本研究首次用特异性方法证实解脲支原体吸附于不育男性精子表面,提示解脲支原体感染可能通过影响精子的形态、精子的运动和精卵识别过程而导致男性不育。

DHBV诱发鸭急性肝坏死动物模型的建立

本文首次报道了应用鸭乙型肝炎病毒(DHBV)加大肠杆菌内毒素诱导方法,建立了鸭急性肝坏死动物模型。结果发现:先肝内注射大肠杆菌内毒素,24h后再静脉内激发性注射DHBV者,易造成一叶或二叶肝坏死。而第一次肝内注射内毒素,24h后静脉内注入生理盐水,或二次均注入生理盐水者均未发现肝坏死病理变化。若第一次肝内注入DHBV,第二次静脉内注入内毒素,病理变化则明显轻于第一种方法,仅出现轻微散在斑点状坏死。

酶消化对肿瘤浸润淋巴细胞活力影响的研究

本文系统地研究了酶消化（胶原酶Ⅳ、胶原酶Ⅱ、透明质酸酶和胰蛋白酶）对肿瘤浸润淋巴细胞（ＴＩＬ）活力、增殖力等影响，并用单个酶消化法与Ｒｏｓｅｎｂｅｒｇ法比较。结果提示：胶原酶Ⅳ或胶原酶Ⅱ消化肿瘤组织块时对ＴＩＬ细胞活力、增殖力损伤小；透明质酸与胰蛋白酶消化对ＴＩＬ细胞活力、增殖力损伤大。在３７℃，１ｈ消化组与４℃，２４ｈ消化组对同一来源肿瘤组织酶消化配对比较中，结果提示同一酶４℃。

卵巢癌浸润淋巴细胞的生物学特性研究

目的 :研究卵巢癌浸润淋巴细胞 (TIL)在体外扩增后生物学特性 ,评估TIL用于晚期卵巢癌治疗的前景。方法 :利用流式细胞仪分析TIL的细胞表型 ,使用分子生物学和免疫学方法研究TIL分泌细胞因子的能力和杀伤肿瘤细胞的活性。结果 :TIL细胞表型的差异可能与肿瘤的种类、性质、取材部位有关 ,结缔组织、基质中来源的TIL以CD3+ CD4+ 为主 ,肿瘤组织和小血管周围以CD3+ CD8+ 为主 ,体外IL 2的浓度对TIL的免疫学特性有很大的影响。经rIL 2扩增后 ,TIL分泌产生IL 2、TNF α、IFN γ等多种细胞因子能力及杀伤肿瘤细胞的活性均有明显提高。再加入抗CD3单抗或PHA(合适浓度 ) ,TIL细胞因子表达可进一步增强。TIL联合磷酰胺或IL 2治疗晚期卵巢癌患者 ,可显著改善患者外周血细胞表型 ,具有一定的疗效。结论 :TIL在体外经rIL 2扩增后 ,免疫活性有明显提高。体内肿瘤细胞的消退可能主要并不是通过输入的TIL直接杀伤肿瘤细胞 ,而是在很大程度上依靠其分泌多种细胞因子增强了机体细胞免疫活性和免疫调节能力。TIL辅助其它疗法可成为晚期卵巢癌患者的一种有效治疗手段。