地西他滨联合CAG方案治疗老年急性髓系白血病疗效观察

目的比较地西他滨联合CAG方案与标准IA方案治疗老年急性髓系白血病患者的临床疗效及安全性。方法回顾性分析20例接受地西他滨联合CAG方案、23例接受IA方案治疗的初发老年AML患者的临床资料,分别比较两组患者的总反应率（ORR）、总生存率（OS）及不良反应发生率。结果 43例患者的ORR为58.14%,地西他滨联合CAG组及IA组的ORR分别为65%、52.2%,两组比较差异无统计学意义（P〉0.05）。截至2015年8月31日,16例存活,25例死亡,2例失访,中位随访时间10（1-34）个月,2年OS率为11.63%,两组1年OS率分别为50%、39.13%,差异无统计学意义（P〉0.05）。39例患者出现感染,25例有出血,两组患者在感染发生率、出血发生率差异无统计学意义。两组的红细胞输注量分别为5.35 U、8.30 U,单采血小板输注量分别为1.85 U、3.48 U,差异有统计学意义（P〈0.05）。结论地西他滨联合CAG方案和IA方案治疗老年AML患者均有较好的疗效,地西他滨联合CAG方案CR率及OR率相对较高。两组治疗副反应相当,但地西他滨联合CAG组骨髓造血恢复较快。

FA方案巩固强化治疗急性髓系白血病的临床观察

目的探讨氟达拉滨联合中剂量阿糖胞苷即FA方案巩固强化治疗急性髓系白血病(acute myeloidleukemia,AML)的临床疗效及副作用。方法观察组28例AML患者采用FA方案进行巩固强化治疗,氟达拉滨30 mg/m2(1～3 d),静脉滴注,阿糖胞苷2 g/m2,(1～3 d),静脉滴注,阿糖胞苷在氟达拉滨结束后4 h应用。同期对照组10例AML患者采用大剂量阿糖胞苷进行巩固强化治疗,即Ara-C 3 g/m2,q12 h×3 d。结果 FA组28例AML患者CR时间为109～1 735 d,14例患者持续完全缓解(continuous complete remission,CCR)2年以上,(3年)生存率为21.4%,1 300 d(>3年)的生存率为14.3%,与大剂量阿糖胞苷组没有统计学差异。7例患者于CCR后3～47个月复发,复发患者均存在各种不良预后因素,至少处于中高危分级。不良反应主要为骨髓抑制和继发感染,但总体而言骨髓抑制时间较短,非血液毒性较轻,住院时间在3周左右。结论氟达拉滨能提升胞内Ara-CTP浓度,增强抗白血病作用。FA方案多疗程巩固治疗低中危AML,能减少AML复发,提高总体生存率和无病生存率,临床疗效肯定,不良反应较少,值得进一步深入研究。

利用siRNA靶向沉默Jeko-1细胞survivin mRNA基因的实验研究

本研究旨在探讨Survivin基因在淋巴瘤细胞中的生物学作用,为将来以Survivin为靶点治疗套细胞淋巴瘤提供实验室证据。体外化学合成针对survivin mRNA基因的siRNA片段,通过DMRIE-C转染Jeko-1细胞,以无关siRNA、未转染的细胞为对照,采用RT-PCR和Western blot方法检测siRNA的抑制效果,利用流式细胞术检测细胞的凋亡率,用CCK-8法检测转染24、48、72 h对细胞增殖的影响。结果表明,与未转染的空白组相比,siRNA转染Jeko-1细胞后24、48、72 h survivin mRNA的相对表达量分别为0.49±0.03、0.38±0.02和0.17±0.02;细胞增殖抑制率分别为(31.2±2.1)%、(43.3±3.4)%和(52.6±2.5)%;细胞凋亡率分别为(6.3±0.5)%、(13.5±1.1)%和(23.6±1.6)%;survivin蛋白表达水平逐步减低。结论:靶向survivin的siRNA能在体外特异性下调目的基因survivin mRNA和蛋白的表达,表现出抑制Jeko-1细胞增殖和促使其凋亡的生物学效应,survivin基因有望成为淋巴瘤治疗的一个药物靶点。

2种CCK-8试剂最佳实验条件比较

在细胞学实验中，MTT（噻唑蓝）比色法常用于细胞毒性、细胞活性和细胞增殖的检测。因MTT法具有简便、经济、安全等特点，而被广泛使用，但其操作较繁琐，需加入二甲基亚砜（DMSO）溶解甲腆颗粒，且往往因溶解不全而对实验结果造成影响，为克服MTT法的不足，近年来出现了另外一些检测试剂，如XTr试剂、MTS试剂，国外研发出了1种新型的检测方法CCK-8（cellcountingkit-8），其原理为活细胞线粒体脱氢酶转化的黄色结晶为高度水溶性，

卷曲螺旋结构域蛋白74B对纤毛生成和细胞周期调控作用研究

背景卷曲螺旋结构域蛋白(CCDC)参与基因转录、细胞凋亡及细胞周期过程,并调控恶性肿瘤细胞的侵袭和转移等多种生物学行为,然而多数CCDC的生物学功能目前尚未明确。目的探讨CCDC74B的细胞定位及对纤毛生成和细胞周期的影响。方法 2013年3—9月通过构建在人视网膜色素上皮(RPE1)中的Tet-On表达系统,实现CCDC74B在细胞内的蛋白表达,然后通过细胞免疫荧光染色观察CCDC74B的细胞定位,通过小干扰RNA(siRNA)转染敲除CCDC74B在RPE1细胞中的表达,分为对照组、siRNA#1组、siRNA#2组,采用反转录聚合酶链式反应(RT-PCR)法检测CCDC74B mRNA表达水平;采用细胞免疫荧光染色及流式细胞术观察下调CCDC74B表达后纤毛生成情况和对细胞周期分布的影响。结果在正常上皮细胞中,CCDC74B位于中心体,细胞免疫荧光染色示,下调CCDC74B表达后细胞初级纤毛生成。siRNA#1组及siRNA#2组转染后36 h及48 h纤毛生成率分别高于对照组(P<0.05)。RT-PCR法结果显示,siRNA#1组及siRNA#2组均有效抑制了CCDC74B mRNA表达。细胞免疫荧光染色示,下调CCDC74B表达后cyclin A表达减少,提示存在细胞周期停滞;流式细胞术检测示,下调CCDC74B表达后G_1期细胞比例增高,S期及G_2/M期细胞比例减少。结论中心体蛋白CCDC74B在细胞增殖过程中参与对纤毛生成和细胞周期的调控。

构建shRNA慢病毒载体抑制U937细胞株VEGFR-1基因的表达

目的构建针对血管内皮生长因子受体1(vascular endothelial growth factor receptor 1,VEGFR-1)基因的siRNA前体表达载体,鉴定其对U937细胞株VEGFR-1基因干扰效率。方法体外设计并合成针对VEGFR-1基因的慢病毒shRNA干扰载体,通过PCR及测序证实载体构建成功。将慢病毒颗粒以最适滴度转染人单核白血病细胞株U937,应用Real-Time PCR、Western印迹法检测抑制效率。结果构建的慢病毒载体的序列通过PCR、测序等鉴定,与设计序列相同。Real-Time PCR检测显示U937细胞干扰组VEGFR-1 mRNA表达率下降75.98%,Western印迹法显示U937细胞干扰组VEGFR-1蛋白表达量较空白载体对照组明显减少。结论构建的shRNA表达载体可在mRNA和蛋白水平上有效抑制U937细胞株VEGFR-1基因的表达。

白血病细胞株K562中HIF1-α的表达及其对下游基因的影响

目的探讨白血病细胞株K562中低氧诱导因子1-α(HIF-1α)表达的增加对下游靶基因的影响及意义。方法氯化钴(CoCl_2)做化学缺氧诱导剂,加入K562细胞培养基,分别培养0、4、8、16 h。Real-Time RT-PCR及Western印迹法分别检测HIF-1αmRNA和蛋白水平的表达。Real-Time RT-PCR检测不同时间HIF-1α下游靶基因VEGF、MDR1/MDR3、survivin、Bcl-2、Caspase-3、Bax等的表达。分析HIF-1α表达的变化对下游基因转录活性的影响和意义。结果随着CoCl_2作用时间的增加,K562细胞HIF-1αmRNA水平表达略有增加,但变化不大(P>0.05),蛋白水平增加明显。下游VEGF、MDR1/MDR3、survivin、Bcl-2转录活性增加(P<0.05),而Bax、Caspase-3表达先增加后减少。结论 CoCl_2主要增加K562细胞株HIF-1α蛋白的表达。HIF-1α蛋白使VEGF、MDR1/MDR3、survivin、Bcl-2等促肿瘤存活基因的转录活性增加,而最终减少了Caspase-3、Bax等促肿瘤细胞凋亡基因的表达。因此,HIF-1α可能是调控白血病进展的关键调节因子。

SOCS1与经典型慢性骨髓增殖性肿瘤关系的研究

目的探讨细胞因子信号转导抑制蛋白(suppressorofcytokinesignaling,SOCS)在经典型骨髓增殖性肿瘤(myeloproliferative neoplasms,MPNs)中的临床作用及其机制。方法采用实时定量PCR检测SOCS1的表达情况,DNA直接测序法检测SOCS1基因突变,甲基化特异性PCR检测SOCS1甲基化发生情况,旨在研究SOCS1在MPNs患者发病机制中的作用,以期为该疾病的诊断和治疗探索新的途径。结果 100例MPNs患者中有37例(37%)存在SOCS1基因甲基化,44例polycythemia vera(PV)有15例(34%)存在SOCS1基因甲基化,48例essential thrombocythemia(ET)有19例(38%)存在SOCS1基因甲基化,8例primary myelofibrosis(MF)有3例(37.5%)存在SOCS1基因甲基化;对照组病例共173例患者中有21例(12%)存在SOCS1基因甲基化:93例Chronic myelocytic leukemia(CML)有15例(16%)存在SOCS1基因甲基化,30例myelodysplastic syndrome(MDS)有4例(13.3%)存在SOCS1基因甲基化,30例acute myeloblastic leukemia(AML)有2例(6.7%)存在SOCS1基因甲基化,20例健康志愿者未发现有SOCS1基因甲基化;MPNs患者中SOCS1基因甲基化组与正常对照组相比,其SOCS1基因的表达量明显减少(P<0.05),表明SOCS1基因甲基化可导致SOCS1基因基因表达降低;SOCS1甲基化患者的白细胞计数高于非甲基化患者(P<0.05),SOCS1甲基化的MPNs患者较非甲基化患者更易进展为典型MPNs,无甲基化患者未见外周血计数、年龄的相关性;SOCS1基因全序列测序未发现突变。结论 MPNs患者中存在SOCS1基因甲基化,且甲基化导致其基因表达降低,提示SOCS1基因甲基化对疾病发展有提示作用;SOCS1基因甲基化与MPNs患者年龄、外周血细胞计数相关;SOCS1超甲基化可激活JAK-STAT信号通路或伴JAK2突变,这些改变可能代表了一种潜在的治疗方向。

同济96方案序贯治疗Ph染色体阴性成人急性淋巴细胞白血病疗效分析

目的探讨Ph染色体阴性成人急性淋巴细胞白血病（Ph-aALL）的系统序贯治疗方案（同济96方案）的疗效。方法回顾性分析2004年1月至2012年12月收治的95例初治Ph-aALL患者的临床资料，并随访生存期。结果95例Ph-aALL患者总的完全缓解（CR）率为92．6％，7年总体生存（OS）率为（39．3~5．9）％，7年无事件生存（EFS）率为（31．5~5．3）％，中位生存期28个月；多因素COX比例风险回归模型分析，预后差核型组患者的死亡风险是预后良好组的3．380倍（95％CI1．530～7．463，P=0．003），≥2个疗程获得CR者是单疗程获得CR者的3．005倍（95％C11．522～5．933，P=0．002）：Kaplan—Meier法及Log．rank检验分析，〈60岁患者的7年OS率和EFS率明显高于≥60岁患者；单疗程获得CR者的7年OS率和EFS率明显高于〉12个疗程获得CR者；正常核型组和超二倍体核型组患者的2年OS率和EFS率明显高于复杂核型组、t（4；11）组和其他核型组。结论年龄（60岁为界点）、获得CR的疗程数和细胞遗传学成为影响Ph-aALL患者生存的相关因素。同济96方案系统序贯治疗ph-aALL，CR率达到发达国家水平，远期疗效令人满意，可以实现部分Ph-aALL患者的长期生存，减少其复发，改善预后。

细胞信号转导抑制因子1基因超甲基化及去甲基化在经典型骨髓增殖性肿瘤中的作用

目的:探讨细胞信号转导抑制因子1(suppressor of cytokine signaling1,SOCS1)基因超甲基化在经典型慢性骨髓增殖性肿瘤(myelo-proliferative neoplasms,MPNs)中的临床作用及其机制。方法:采用甲基化特异性PCR法检测MPNs患者骨髓标本中SOCS1基因的超甲基化发生情况。应用粒细胞集落刺激因子(granulocyte colony stimulating factor,G-CSF)化学诱导MPNs细胞生长不同时间后,实时定量PCR和蛋白质印迹法检测SOCS1mRNA及其蛋白表达情况。另外,加入去甲基化试剂2-deoxyazacytidin培养MPNs细胞不同时间后,实时定量PCR法检测SOCS1mRNA表达情况。结果:100例经典型慢性MPNs患者中有27例(27.0%)存在SOCS1基因超甲基化。G-CSF化学诱导处理后的MPNs细胞中,SOCS1基因超甲基化组与未甲基化组相比,其SOCS1mRNA表达量均明显减少(均P<0.05);MPNs患者中SOCS1基因超甲基化组的SOCS1蛋白表达量也减少,但与健康对照组相比差异尚无统计学意义(P>0.05)。另外,相对于G-CSF处理后的超甲基化组,加入去甲基化试剂后SOCS1mRNA表达量明显升高(P<0.05)。结论:MPNs患者中存在SOCS1基因超甲基化,且CpG岛超甲基化导致其基因表达水平降低,去甲基化后,其基因表达水平升高。提示SOCS1基因超甲基化可能和MPNs发病有关,去甲基化可能是一种潜在的治疗MPNs的新策略。

低氧对Jurkat细胞低氧诱导因子-1α及其类泛素化的影响及意义

目的 探讨低氧条件下Jurkat细胞低氧诱导因子-1α（HIF-1α）类泛素化的变化对其基因转录活性和蛋白稳定性的影响,以及对下游靶基因转录活性调控的影响和意义.方法 氯化钴（CoCl2）化学缺氧法模拟肿瘤缺氧不同时间,分别用荧光定量PCR、Western blot法检测HIF-1α基因及蛋白稳定性的变化,类泛素-1（SUMO-1）、类泛素蛋酶-1（SENP-1）蛋白水平的表达,VEGF、mdr1、mdr3、Mcl-1和survivin等基因转录活性的变化.结果 在缺氧诱导4、8、16、48、72 h后,HIF-1α基因转录活性分别为缺氧诱导前的（0.79 ±0.19）、（2.65±2.05）、（4.19±4.72）、（2.77±3.37）、（0.09±0.05）、（0.69±0.55）倍（P〉0.01）,而蛋白稳定性逐渐增高后减低（P〈0.01）.SEN-1蛋白的表达与SUMO-1蛋白表达呈相反趋势,前者逐渐增高后减低,而后者逐渐减低后增高（P〈0.01）.除survivin 基因外,VEGF、mdr1、mdr3、Mcl-1基因转录水平与HIF-1α蛋白稳定性相平行.结论 缺氧引起SENP-1表达变化,通过减低HIF-1α蛋白类泛素化作用而影响HIF-1α稳定性,从而改变下游VEGF、mdr1、mdr3、Mcl-1等基因的转录活性而最终影响细胞牛物学过程.

YM155对滤泡淋巴瘤细胞的凋亡效应及机制初探

目的研究生存素（survivin）抑制剂YMl55对滤泡淋巴瘤细胞的凋亡效应及作用机制，为应用YMl55治疗淋巴瘤提供实验依据。方法培养滤泡淋巴瘤细胞株SUDHL-4至对数生长期，加入YMl55形成一系列浓度梯度：100、10…101、0rig／ml，培养24、48、72h后进行活细胞计数试剂盒（CCK）8实验，观察YMl55对其生长抑制效应，计算其细胞半数抑制药物浓度（IC50）。加入YMl55至培养瓶中使其药物浓度为1．g／ml，培养24、48、72h进行流式细胞术检测，膜联蛋白（Annexin）V一异硫氰酸荧光素（FITC）／碘化丙啶（PI）双染法观察细胞凋亡情况。选取不加药的对照组和加YMl55后24、48h的实验组细胞抽提总RNA，然后进行反转录PCR（RT．PCR）检测48h时抗凋亡基因bcl-2、bcl．xl、survivin和促凋亡基因bid、bax的mRNA的相对表达量，检测24h时survivinmRNA的相对表达量。同时抽提各个时间点的总蛋白用Western印迹技术检测survivin、半胱氨酸蛋白酶（caspase）9、活化的caspase-9、caspase-3和活化的caspase一3蛋白的表达量。结果YMl55对SUDHL-4具有明显的生长抑制效应且呈剂量和时间依赖性，24、48、72h的Ic，。分别为6．1、2．7、1．2ng／ml。用流式细胞仪分析发现细胞凋亡比例随时间的推移逐步增加（17．3％4-2．1％、35．7％-4-3．3％、54．6％±4．3％比2．1％-t-O．3％，均P〈0．05）；PCR结果显示YMl55作用后24和48h下调survivin基因mRNA的表达（0．72±0．02、0．56±0．01比1．00，均P〈0．05），但bcl．2家族基因表达变化不显著（P〉0．05）。Western印迹检测发现随着时间的推移，survivin、caspase．3蛋白的表达逐渐减低，caspase-9和活化的caspase-9蛋白表达没有明显变化，而活化的easpase-3表达逐渐增加。结论YMl55能够有效促进淋巴瘤SUDHL-4细胞株凋亡，其机制可能是由于survivin蛋白下调绕过caspase-9直接激活下游easpase-3，从而切割DNA引发凋亡；bcl-2家族基因可能并未参与此过程。

SOCS超甲基化与经典型慢性骨髓增殖性肿瘤的研究

目的探讨细胞因子信号转导抑制蛋白（suppressor of cytokine signaling，SOCS）基因超甲基化在经典型骨髓增殖性肿瘤（MPD）中的临床作用及其机制。方法采用甲基化特异性PCR方法检测SOCS1、2、3基因CpG岛甲基化发生情况，直接测序法检测100例MPD患者JAK2V617F突变情况，用实时定量PCR方法检测SOCS1、2、3的mRNA表达情况。结果100例MPD患者中有27例（27％）存在SOCS1基因超甲基化，9例（9％）存在SOCS2基因超甲基化，34例（34％）存在SOCS3基因超甲基化。在100例MPN患者中，64例（64％）JAK2V617F突变阳性。MPD患者中SOCS1和SOCS3基因超甲基化组与未甲基化组相比，其SOCS1和SOCS3基因mRNA表达量明显减少（P〈0．05）；SOCS1和SOCS3基因JAK2V617F突变组与野生型组相比，其SOCS1和SOCS3基因mRNA表达量明显减少（P〈0．05）。结论MPD患者中存在JAK2V617F突变及SOCS基因超甲基化，且JAK2V617F突变和SOCS基因甲基化导致SOCSmRNA表达水平降低，SOCS超甲基化和JAK2V617F突变可改变JAK—STAT信号通路等的转录活性而最终影响疾病的发展，这些改变可能代表了一种潜在的治疗方向。

ShRNA靶向沉默VEGFR1基因对U937细胞增殖、迁移和凋亡的影响

目的 探讨慢病毒载体介导shRNA（short harpin RNA,siRNA前体）靶向沉默血管内皮生长因子受体1（VEGFR-1）基因对U937细胞增殖、迁移和凋亡的影响.方法 构建针对VEGFR-1基因干扰序列和无关序列的shRNA慢病毒载体,与慢病毒包装质粒通过脂质体转染293T细胞,包装产生的病毒液感染U937细胞（U937-shVEGFR-1 KD组）.采用实时荧光定量PCR、Western blot法检测RNA干扰对U937细胞VEGFR-1 mRNA和蛋白表达的影响;ELISA法检测细胞培养上清液VEGF表达水平的变化;CCK-8法检测常规培养条件下和不同浓度阿糖胞苷（Ara-C）作用下细胞增殖率和抑制率变化;流式细胞术检测经Ara-C作用后细胞凋亡率变化;Transwell小室检测不同条件下细胞迁移数量的变化.结果 成功构建VEGFR-1基因shRNA慢病毒载体,转染U937细胞后,U937-shVEGFR-1 KD组细胞VEGFR-1 mRNA和蛋白表达均显著下降;细胞培养上清液VEGF表达水平明显下降,细胞增殖速度减慢;Ara-C作用下,U937-shVEGFR-1 KD组细胞增殖抑制率及凋亡率较U937无关序列shRNA阴性对照（NC）组和U937空白对照（CON）组细胞明显增高.无药物及VEGF作用下,U937-shVEGFR-1 KD组细胞迁移数量均低于U937 NC组和U937 CON组细胞;Bevacizumab作用下,U937 NC组和U937 CON组细胞迁移数量降低,而U937-shVEGFR-1 KD组细胞迁移数量无明显变化.结论 慢病毒载体介导的shRNA干扰VEGFR-1基因可有效抑制U937细胞增殖、迁移,并能够增强U937细胞对Ara-C的敏感性.

感染性休克的诊治进展

感染性休克目前仍然是威胁人类健康的大问题,尽管医疗及护理技术在不断地进步,但其总体死亡率仍在不断增长.2008年国际专家们应用循证医学系统方法对近年来相关证据的质量以及建议等级进行再评价,对2004年指南的内容进行了更新和补充,以进一步改善感染性休克的预后.本文针对目前感染性休克的诊断和治疗进展进行综述.

RSK抑制剂BI-D1870对急性白血病细胞增殖的影响

目的 :探讨p90核糖体S6激酶(p90 ribosomal S6 kinase,RSK)抑制剂BI-D1870对急性白血病(acute leukemia,AL)细胞增殖、细胞凋亡和细胞周期分布的影响。方法:应用实时荧光定量PCR法检测6种AL细胞(Molt-4、Jurkat、Nalm-6、THP1、U937和NB-4)中RSK1和RSK2 m RNA的表达水平,CCK-8法检测RSK抑制剂BI-D1870对AL细胞增殖的影响以及BI-D1870、依托泊苷单药和BI-D1870联合依托泊苷对Molt-4细胞的增殖抑制作用。应用FCM法检测BI-D1870对Molt-4细胞凋亡及细胞周期分布的影响以及BI-D1870、依托泊苷单药和BI-D1870联合依托泊苷对Molt-4细胞凋亡的影响。结果:Molt-4和THP1细胞中RSK1 m RNA的表达水平以及Molt-4、Jurkat、THP1、U937和NB-4细胞中RSK2 m RNA的表达水平均高于健康志愿者外周血单核细胞(P值均<0.05)。RSK抑制剂BI-D1870可抑制Molt-4、Jurkat、Nalm-6、THP1、U937和NB-4细胞的增殖,其抑制作用随着作用时间的延长而递增(P<0.05)。BI-D1870联合依托泊苷处理组Molt-4细胞的增殖抑制率明显高于BI-D1870和依托泊苷单药处理组(P值均<0.01)。BI-D1870处理组Molt-4细胞的凋亡率及G2/M期细胞所占百分比明显高于对照组(未进行药物干预)(P<0.01,P<0.05);BI-D1870联合依托泊苷处理组Molt-4细胞的凋亡率明显高于BI-D1870和依托泊苷单药处理组(P值均<0.01)。结论:多种AL细胞中RSK1和RSK2 m RNA的表达水平上调;RSK抑制剂BI-D1870联合依托泊苷可协同抑制AL细胞的增殖,诱导细胞凋亡及阻滞细胞周期。

IL-21诱导SUDHL-4细胞凋亡的作用及其机制

目的探讨IL-21对弥漫大B淋巴瘤（DLBCL）细胞系SUDHL4细胞凋亡的影响及其相关机制。方法用不同浓度IL-21（终浓度1、10、100、1000ng／m1）处理SUDHL4细胞不同时间（24、48、72h），用CCK-8试剂盒检测细胞增殖抑制率，绘制细胞增殖抑制曲线，计算IC50值；用流式细胞术检测细胞凋亡；用Westernblot法检测IL-21处理后SUDHL-d细胞caspase-9、caspase-3、cleavedcaspase-3、Bcl-2、Bcl-XL、Bid、Bax和c-myc蛋白表达。用RT-PCR法检测Bcl-2、Bcl-XL、Bid、Bax、c-myc和Sur-vivin基因mRNA表达。结果IL-21可明显抑制SUDHL4细胞增殖，且呈时间-剂量依赖性，其48h半数抑制浓度（IC50）为140．9ng／ml。流式细胞术分析发现100ng／mlIL-21处理的SUDHL-4细胞48h凋亡率（AnnexinV-FITC^＋细胞率）明显增加[（19．7±2．3）％]，同时caspase-9、caspase-3、Bcl-2和Bcl-XL蛋白表达减低，均呈时间依赖性。cleavedcaspase-3从48h开始出现明显的剪切带；Bax和c-myc蛋白表达明显增高，而Bid蛋白表达变化不明显。RT-PCR检测显示IL-21上调c-myc和Bax基因mRNA的表达，下调Bcl-2和Bcl-XL基因mRNA的表达，Bid和Survivin基因mRNA表达变化不明显。结论IL-21可抑制SUDHL-4细胞增殖，诱导细胞凋亡，其作用可能是通过c-myc和Bcl-2基因调节的线粒体途径实现。

FA方案在急性髓细胞性白血病巩固治疗中的应用及其机制

氟达拉滨可显著提升Ara～C的细胞内浓度增强抗白血病作用，联合中剂量阿糖胞苷组成FA方案多疗程巩固治疗低中危AML，可明显减少AML复发，疗效与大剂量阿糖胞苷方案类似且毒副作用较大剂量阿糖胞苷方案小，可成为今后急性白血病巩固强化治疗的有力方案。