刺梨果酒通过胰岛素介导的PI3K途径改善1-型糖尿病大鼠机体糖代谢紊乱

为了探讨刺梨果酒对链脲佐菌素(STZ)诱导的1-型糖尿病大鼠糖代谢紊乱的影响及其作用机制。采用一次性腹腔注射STZ的方法建立1-型糖尿病大鼠模型,将造模成功后的大鼠分为刺梨果酒高、中、低剂量组和模型组,并设空白对照组。灌胃给药期间测定大鼠的饮食饮水量和体重,每2周测一次空腹血糖(FBG),实验期28 d。实验结束后测量血清胰岛素(Insulin,Ins)和果糖胺的含量;实时灾光定量PCR(real time polymerase chain reaction,RT-PCR)测定肝脏磷脂酞肌醇3-激酶(Phosphoinositide 3-kinase,PI3K)、蛋白激酶B(protein kinase B,Akt/PKB)和葡萄糖转运载体2(Glucose Transporter 2,GLUT2),以及骨骼肌葡萄糖转运载体4(Glucose Transporter 4,GLUT4)m RNA相对表达量。结果表明,与模型组相比,刺梨果酒高、中、低剂量组多饮多食的症状明显好转,体重下降受到抑制;刺梨果酒高、中、低剂量可显著(p<0.05)降低空腹血糖,分别下降了21.20%,36.14%和8.75%;果糖胺降低了11.32%,16.65%和8.33%;血清胰岛素水平分别上升了39.69%,45.87%和17.82%。与模型组相比,刺梨果酒高、中、低剂量组均可显著升高肝脏PI3K、PKB和GLUT2及骨骼肌GLUT4 mRNA相对表达量。本试验说明一定量的刺梨果酒具有改善STZ诱导的1-型糖尿病大鼠糖代谢紊乱,其中中剂量效果更明显。

共固定化复合酶澄清刺梨汁工艺的优化

为高品质刺梨汁的生产提供参考,以壳聚糖为载体,采用包埋法制备固定化果胶酶和纤维素酶,并将固定化复合酶应用于刺梨汁澄清。结果表明:共固定化复合酶澄清刺梨汁的最佳工艺为果胶酶与纤维素酶的质量比为3∶1,酶添加量20g/L,酶解时间70min,酶解温度55℃,在该条件下,刺梨汁透光率达86.45%;壳聚糖固定化复合酶澄清刺梨汁可显著降低导致刺梨汁混浊的总酚和水溶性蛋白质,而对VC、SOD、可溶性固型物、总黄酮的影响不显著。

花椒精油对链脲佐菌素诱导的糖尿病小鼠糖代谢的影响

目的:研究花椒精油对1型糖尿病机体糖代谢的影响及可能机制。方法:将50只健康雄性昆明小鼠(KM小鼠)分为空白对照,糖尿病模型组,花椒精油高(15 mg/(kg m_(b)·d))、中(9 mg/(kg m_(b)·d))、低(3 mg/(kg m_(b)·d))剂量组,每组10只。采用链脲佐菌素诱导建立1型糖尿病模型。空白组和糖尿病模型组灌胃等剂量的大豆油,给药28 d后,检测血清胰岛素、糖化血清蛋白(glycosylated serum protein,GSP)及糖化血红蛋白(glycosylated hemoglobin,GHb)、肌糖原和肝糖原水平;应用实时荧光定量聚合酶链式反应测定肝脏磷酸肌醇3激酶(phosphoinositide 3-kinase,PI3K)、蛋白激酶B(protein kinase B,PKB)、葡萄糖转运子2(glucose transporter 2,GLUT2)和骨骼肌葡萄糖转运子4(glucose transporter 4,GLUT4)mRNA相对表达量;Western blot检测肝脏PI3K(p110)、PKB和p-PKB(Ser473)的蛋白表达量。实验期间每周测定其空腹血糖浓度及体质量,给药28 d后进行葡萄糖耐量测定。结果:与模型组相比,花椒精油剂量组的摄食量、饮水量、空腹血糖浓度、GHb质量浓度、GSP质量浓度最高分别下降38.91%、35.93%、28.60%、30.76%、37.29%,胰岛素、肝糖原与肌糖原水平最高分别提高22.56%、23.61%、149.75%;PI3K、PKB、GLUT2、GLUT4 mRNA相对表达量最高分别上调87.5%、53.4%、77.05%、133.3%;花椒精油高、中、低剂量组PI3K(p110)蛋白表达量分别上调了3.20、2.51倍和1.67倍,p-PKB(Ser473)蛋白表达量分别上调了7.64、6.12倍和2.73倍。结论:花椒精油对1型糖尿病小鼠具有降糖效果,其可能机制是激活PI3K/PKB途径,使GLUT2/4移位,促进细胞对葡萄糖的吸收和利用。

花椒麻素改善2型糖尿病小鼠糖脂代谢紊乱的作用

为了研究花椒麻素对2型糖尿病(type 2 diabetes mellitus,T2DM)小鼠糖脂代谢紊乱的治疗效果,采用高脂高糖饲料和链脲佐菌素(Streptozotocin,STZ)联合建立T2DM小鼠模型,设置空白组、模型组、花椒麻素高剂量(0.8 mg/kg·bw)、花椒麻素低剂量(0.4 mg/kg·bw)及阳性对照组,每组10只。实验期间测定小鼠的采食量、饮水量、体重和空腹血糖值,给药28 d后,测定小鼠的糖耐量,以及小鼠血清及肝脏的总胆固醇(TotalCholesterol,TC)、甘油三酯(Triglyceride,TG)、高密度脂蛋白(High-density Lipoprotein,HDL-C)、低密度脂蛋白(Low-density Lipoprotein,LDL-C)、丙二醛(Malondialdehyde,MDA)的含量并通过HE染色观察各组小鼠肝组织形态学变化。结果显示,花椒麻素可显著(p<0.05)降低血清中TG、TC、LDL-C及MDA含量,且显著(p<0.05)提高了HDL-C含量;高剂量组的肝脏TG、TC、及MDA含量分别比模型组显著(p<0.05)降低了28.31%、43.56%、52.14%,与阳性对照组作用相当;且形态学检测结果显示,经过28 d的给药治疗,与模型组相比,其高、低剂量组的肝组织损伤程度明显减轻,结果表明花椒麻素具有改善T2DM小鼠的糖脂代谢和氧化应激的作用。

刺梨果酒对高脂诱导肥胖小鼠脂代谢的影响

目的:研究刺梨果酒对高脂诱导小鼠肥胖发生过程预防效果及其机理。方法:将50只小鼠随机分为空白组、模型组、刺梨果酒低剂量组(0.25 mL/80 g)、中剂量组(0.5 mL/80 g)和高剂量组(1 mL/80 g),每组10只,实验时间8周。实验结束后,测定小鼠脏器指数、血清及肝脏脂代谢相关生理生化指标;应用qRT-PCR测定肝脏过氧化物酶体增殖物激活受体α(Peroxisome proliferators-activated receptor-α,PPARα)、固醇调节元件结合蛋白(Sterol-regulatory element binding proteins,SREBP1)、硬脂酰辅酶A去饱和酶(Stearyl-coenzyme A dehydrogenase-1,SCD1)、乙酰辅酶A羧化酶(Acetyl-CoA carboxylases alpha,ACACA)、脂肪酸合成酶(Fatty acid synthase,FASN)、肝X受体(Liver X receptor,LXR)、腺苷酸活化蛋白激酶(AMP-activated protein kinase,AMPK)mRNA相对表达量。结果:与模型组相比,刺梨果酒可显著(P<0.05)减缓小鼠体重增加,降低脂肪指数及血清和肝脏中总胆固醇(Total cholesterol,TC)、甘油三酯(Triglyceride,TG)、低密度脂蛋白胆固醇(Low density lipoprotein cholesterol,LDL-C)的含量,升高高密度脂蛋白胆固醇(Hight density lipoprotein cholesterol,HDL-C)含量。此外,高剂量组可显著(P<0.05)下调小鼠肝脏中PPARα、AMPK、LXR、ACACA、SCD1、FASN基因表达水平。HE染色结果显示,剂量组能缓解肝细胞肿大,减少肝脏脂肪变性。结论:刺梨果酒对高脂诱导小鼠肥胖具有预防作用,可能与减少体内脂肪堆积,改善脂代谢紊乱有关。

花椒精油对1型糖尿病小鼠肠道健康的影响

为了探索花椒精油对1型糖尿病小鼠肠道健康的影响,将造模成功的40只雄性小鼠,按体质量和血糖随机分为模型组、花椒精油高剂量组15 mg/(kg·d)、中剂量组9 mg/(kg·d)和低剂量组3 mg/(kg·d),每组10只,饲养28 d。实验结束后,检测盲肠壁表面积、pH值、游离氨、盲肠微生物和短链脂肪酸等。实验结果表明,与模型组相对,花椒精油可显著(P<0.05)增加小鼠体质量和饲料效率,降低其采食量;可显著(P<0.05)增加盲肠内容物中短链脂肪酸的含量;可显著(P<0.05)增加盲肠内容物乳酸杆菌和双歧杆菌的量;高、中剂量可显著降低肠杆菌和肠球菌的量。结果表明,花椒精油可促进因STZ诱导的1型糖尿病小鼠盲肠内容物中有益菌的生长,抑制有害菌的生长,从而改善1型糖尿病小鼠的肠道健康。

磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶基因的敲除对北京棒杆菌PD-67的生理代谢的影响

【目的】为了优化L-色氨酸合成的前体供应,构建北京棒杆菌PD-67(Corynebacterium pekinense PD-67)磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶(EC:4.1.1.31,phosphoenolpyruvate carboxylase,PEPCx)基因ppc敲除的菌株,并研究ppc基因敲除对菌株生理特性的影响。【方法】运用PCR技术扩增ppc基因的上游和下游序列,构建带有目标基因内部缺失的基因整合载体。通过同源重组技术将C.pekinense PD-67的ppc基因敲除,构建ppc基因缺陷突变株C.pekinense PD-67-Δppc。通过摇瓶发酵研究突变株的生理特性,并测定突变株丙酮酸激酶和丙酮酸羧化酶的活性。【结果】PCR验证和PEPCx活性分析结果表明,筛选到ppc缺陷的突变株。摇瓶发酵结果表明,与出发菌株相比,突变株的生长速率下降,生物量降低20%,L-色氨酸积累降低62%,丙酮酸激酶活力提高,而丙酮酸羧化酶活力下降。【结论】C.pekinense PD-67的ppc基因敲除以后,对菌株的代谢影响较大。仅通过阻断PEPCx催化的回补途径,减少磷酸烯醇式丙酮酸的分支代谢,不能提高该菌株L-色氨酸的积累。