槲皮素-3-o-新橙皮糖苷改善L6细胞胰岛素抵抗及其作用机制

目的观察槲皮素-3-o-新橙皮糖苷对L6肌管细胞胰岛素抵抗模型葡萄糖消耗;脂肪酸消耗以及对PPARα、PPARγ、GLUT4表达量的调节作用及其作用机制。方法以250μmol/L的脂肪酸诱导形成L6肌管细胞胰岛素抵抗模型,以槲皮素-3-o-新橙皮糖苷干预24 h后,葡萄糖氧化酶法检测葡萄糖消耗量,气相色谱法(GC)检测脂肪酸消耗量,Western-blot方法检测细胞中葡萄糖转运蛋白4(GLUT4)以及PPARα、PPARγ的表达量。结果槲皮素-3-o-新橙皮糖苷处理可提高L6细胞对葡萄糖的消耗(P<0.01),降低细胞脂肪酸摄入(P<0.05),上调GLUT4和PPARγ蛋白表达量(分别为P<0.01和P<0.05),但对PPARα的表达量无明显影响。结论槲皮素-3-o-新橙皮糖苷可提高L6细胞胰岛素抵抗模型葡萄糖消耗量,降低脂肪酸摄入,调节PPARγ、GLUT4的表达,这些可能是受试物缓解胰岛素抵抗的机制之一。

蚕丝/聚乳酸-羟基乙酸共聚物支架降解液与骨髓间充质干细胞的增殖

背景:前期研究表明,蚕丝/聚乳酸-羟基乙酸共聚物支架浸提液具有良好的细胞相容性,基本无细胞毒性。目的:观察蚕丝/聚乳酸-羟基乙酸共聚物纤维细丝混合编织支架体外长期降解过程中降解液对兔骨髓间充质干细胞增殖活性的影响。方法:将蚕丝/聚乳酸-羟基乙酸共聚物细丝混合编织支架材料置于完全培养基中体外降解14周,每周换液1次,测定各周支架降解液的pH值。将兔骨髓间充质干细胞分组培养,实验组加入各周支架降解液和新鲜完全培养基各100μL,阴性对照组加入完全培养基200μL,培养4d。MTT法检测细胞增殖、生长情况。结果与结论:①支架降解液pH值的变化:前3周下降缓慢,从7.00降到6.89;第4周起下降较快,6-11周较低,在5.16-5.67之间;12-14周呈上升趋势,回升到6.95。②骨髓间充质干细胞形态:实验组及阴性对照组细胞增殖生长及形态状况基本相似。降解7-10周支架降解液对细胞的生长有抑制作用,细胞数量相对较少、较疏,而其余各周支架降解液对细胞生长无明显抑制作用。③骨髓间充质干细胞的增殖:1-6周及11-14周的支架降解液对细胞增殖无显著影响,细胞相对增殖率均在92.1%以上,毒性分级为0或1级;7-10周的支架降解液虽对细胞增殖有抑制作用,但细胞相对增殖率为82.5%-87.9%,毒性分级为1级,为合格。表明蚕丝丝素/聚乳酸-羟基乙酸共聚物混合编织支架降解液具有良好的细胞相容性。

蚕丝-聚乳酸-羟基乙酸共聚物复合编织支架的力学性能及细胞相容性

背景:与通常的合成纤维相比,蚕丝力学性能好,又具有一定的延展性,是制作组织工程韧带/肌腱的良好支架材料,但蚕丝丝素纤维降解速度缓慢,难以与组织再生速率相匹配。目的:分析蚕丝-聚乳酸-羟基乙酸共聚物编织绳状支架的力学性能及其与骨髓间充质干细胞体外共培养的细胞相容性。方法:通过捻拧编织蚕丝-聚乳酸-羟基乙酸共聚物细丝混合支架,并以纤维连接蛋白作表面修饰,检测支架的力学性能。将兔骨髓间充质干细胞种植在蚕丝-聚乳酸-羟基乙酸共聚物细丝混合支架上进行体外共培养,观察细胞与支架复合生长、基质形成,以及细胞与支架结合的情况。结果与结论:蚕丝-聚乳酸-羟基乙酸共聚物混合编织支架呈乳白色,质地均匀,韧性强,为螺旋上升的绳索状,直径为2.3mm。支架材料的最大负荷、拉伸强度、断点伸长率、弹性模量分别为(315.06±30.77)N、(75.83±7.46)MPa、(61.39±7.26)%、(213.58±23.45)MPa。扫描电镜观察显示,骨髓间充质干细胞贴附于支架表面生长,增殖良好,细胞大多呈梭形,伸出伪足匍匐于材料的表面,形态较佳,伸展良好,呈立体状生长,并分泌基质。表明蚕丝-聚乳酸-羟基乙酸共聚物编织绳状支架具有良好的机械性能及细胞相容性。

紫桑椹果中非营养成分的分析

研究浙江果桑“大十”品种白藜芦醇、原花青素和类胡萝卜素的成分及含量。用高效液相色谱法一铁盐催化比色法对三种非营养成分作了分析。实验结果为紫桑椹果中自藜芦醇含量在4．19—6．09μg／g、原花青素含量46．0～49．8mg／g；类胡萝卜素含量0．703—1．197μg/g；而桑叶不含白藜芦醇，原花青素测得值仅为0．522～0．536mg／g。桑椹含有丰富的天然活性物质，为合理利用桑椹资源及进一步开发研究提供了科学依据。

高尿酸血症的发病机制以及黄酮类膳食对其干预作用

高尿酸血症是由于尿酸生成增多和(或)排泄减少导致的,多种尿酸转运蛋白构成的分子复合物和黄嘌呤氧化酶(XO)均可影响尿酸生成水平。而高尿酸血症对痛风、糖尿病、心血管疾病的病理生理过程存在重要影响,故控制体内尿酸水平有重要卫生学意义。黄酮类化合物可通过多种途径调节机体尿酸生成与排泄,黄酮类膳食将有重要的应用前景。

芒果苷对L6细胞葡萄糖消耗的影响及其作用机制研究

目的观察芒果苷对L6细胞葡萄糖消耗的影响,并探讨其分子机制。方法以芒果苷干预L6肌管细胞,葡萄糖氧化酶法检测葡萄糖消耗量,western-blot方法检测葡萄糖转运蛋白4(GLUT4)的表达量及其急性转位作用,免疫共沉淀(IP)联合western-blot方法检测AKT激酶活性。结果芒果苷处理可激活L6细胞的AKT激酶(与对照组比,P=0.001),提高L6细胞的葡萄糖消耗(P=0.011或P=0.000)且呈剂量-反应关系(P=0.000),上调GLUT4的蛋白表达量(P=0.001或P=0.000)并促进GLUT4在细胞内发生急性转位(P=0.005,P=0.001或P=0.026),使该蛋白由胞浆经细胞骨架转位至细胞膜。结论芒果苷可促进L6细胞的葡萄糖消耗量,调节GLUT4的表达及其在细胞内的急性转位,激活AKT激酶活性,因此,芒果苷具有潜在的辅助降血糖作用。

微生物法与HPLC测定药品及食品中叶酸含量的比较及应用

目的建立微生物法测定药品与食品中叶酸含量的方法,解决液相色谱不能测定食品化合物形式叶酸含量的不足,为孕妇叶酸日摄入量的统计提供理论依据。方法利用酪乳酸杆菌对叶酸生长的依赖性,测定其菌液光密度值,得到叶酸含量。结果检测3个种类的样品,得到了批内、批间、回收率的数据,并与液相色谱的检测结果做了比较。结论微生物法稳定可靠,比液相色谱法应用更广。

瘦素基因启动区-2548G／A多态性和肥胖关系的Meta分析

目的探讨瘦素基因(LEP)5’端非翻译区-2548位点上G/A单核苷酸多态性(SNP)与肥胖的关系。方法用Meta分析法研究LEP-2548 G/A多态性与肥胖的关系;分别采用显性和隐性模型进行分析,计算纳入研究的合并优势比(OR)估计值及其95%CI,用统计量I2判断各研究间的异质性,用Egger检验分析发表偏倚。结果经过HWE检验后,最后选择了11项研究,包括了5210名受试者(2541名肥胖者和2669名对照)。在显性模型分析中,OR=1.14(95%CI:0.98-1.31,P=0.08);在隐性模型分析中,合并OR=1.03(95%CI:0.85-1.25,P=0.76),说明LEP-2548 G/A多态性和肥胖之间没有显著联系。但是,亚组分析时发现在美洲人群中,GG纯合基因型是肥胖的一个显著性危险因子[OR=1.53(95%CI:1.17-2.00),P=0.002]。在其他地区未发现显著性结果。结论在总人群中LEP-2548G/A多态性与肥胖之间无相关性,但在美洲人群中,GG基因携带是肥胖一个显著的危险因素。

蚕丝-PLGA编织支架生物安全性评价方法研究和应用

目的:通过动物实验评价蚕丝-PLGA细丝混合编织支架材料的生物安全性,为该材料临床应用提供理论依据。方法:通过捻拧编织蚕丝纤维-PLGA细丝混合支架,蚕丝:PLGA的质量比为2∶3。并制备该支架材料的浸提液。采用蚕丝纤维-PLGA细丝混合编织支架浸提液进行如下生物安全性的动物实验研究:急性全身毒性试验、皮内刺激试验、溶血试验、热原试验,并根据实验数据进行分析、评价。结果:蚕丝-PLGA混合编织支架材料为螺旋上升的绳索状,直径3.2 mm。支架材料无急性全身毒性作用,无皮内刺激反应。支架材料溶血率为1.17%,小于5%,不具溶血作用,符合生物材料溶血试验的要求。热原试验表明,3只实验兔体温升高数分别为0.4℃、0.2℃、0.3℃,均低于0.6℃,总值小于1.4℃,不具热原反应。结论:蚕丝-PLGA混合编织支架材料具有良好的生物相容性。符合相关生物安全性的评价标准。

蚕丝-PLGA混合编织支架材料的细胞毒性检测

目的:对蚕丝-PLGA细丝混合编织支架体外进行细胞毒性实验,探讨蚕丝-PLGA混合编织支架材料的细胞毒性作用情况,为该材料临床应用提供理论依据。方法:制备蚕丝-PLGA细丝混合编织支架,并制备该支架材料的浸提液。通过MTT法检测25%、50%、100%浓度的蚕丝-PLGA混合编织支架材料浸提液对兔骨髓间充质干细胞(MSCs)的细胞毒性作用,以第1,3,5,7天为检测时间点,观察细胞生长状况,计算细胞相对增殖率,并对材料的细胞毒性进行分级。以正常培养基为阴性对照组,0.64%苯酚溶液为阳性对照组。结果:MSCs在不同浓度实验组及阴性对照组中生长均好,细胞呈长梭形等形态,细胞形态饱满有光泽,MTT法结果表明各时间点各浓度实验组与阴性对照组之间的A值差异不显著(P>0.05),各时间点各浓度浸提液对MSCs细胞的相对增殖率均在93%以上,毒性分级为0级或1级,无细胞毒性。结论:蚕丝-PLGA混合编织支架材料细胞相容性良好,无细胞毒性,符合材料毒性的安全标准。

负载bFGF的壳聚糖微球制备及其体外缓释性能测定

目的:制备负载碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)的壳聚糖微球,并测其体外释药特性。方法:采用乳化交联法制备壳聚糖空白微球,再进行bFGF吸附,制成负载bFGF的壳聚糖微球,并对微球进行扫描电镜观察。ELISA法测定其载药量与包封率,以及bFGF的体外释放情况。并测定壳聚糖空白微球的吸水膨胀率。结果:负载bFGF的壳聚糖微球直径约4μm,载药量为1.06μg/mg,包封率为84.8%。体外释放实验初期释放bFGF速度较快,随后逐渐趋于平缓。壳聚糖空白微球的吸水膨胀率为650%。结论:采用乳化交联法制备包裹bFGF的壳聚糖缓释微球,简单易行,成球性好,得率高,具有良好的缓释效果。

LC-MS/MS法测定保健食品及原料中石斛碱

目的:建立液相色谱-串联质谱(LC-MS/MS)方法测定金钗石斛类保健食品及其原料中石斛碱含量。方法:样品通过70%甲醇热回流的方法进行处理后,采用Agilent EclipsePlus C18色谱柱,以0.1%甲酸水溶液(A)-乙腈(B)为流动相进行梯度洗脱,流速0.2 mL/min,进样量5μL。利用电喷雾离子源(ESI),采用正离子模式,多反应监测模式(MRM)进行检测,根据保留时间定性,外标法定量。结果:石斛碱的出峰时间在2.949 min,浓度在1.15~115 ng/mL范围内线性关系良好(r=0.9996),检出限为0.0373 ng/mL。金钗石斛原料和金钗石斛软胶囊的平均加标回收率分别为97.85%和102.64%;精密度相对标准偏差(RSD)分别为1.37%和0.97%。结论:该方法具有分析速度快、灵敏度高、重现性好、准确度高的特点,可为金钗石斛类保健食品及其原料的质量控制提供参考。