血清ProGRP水平对小细胞肺癌的诊断价值

目的探讨胃泌素释放肽前体(ProGRP)对小细胞肺癌(SCLC)的诊断意义。方法收集189例原发性肺癌、31例其他恶性肿瘤肺转移、68例其他原发性恶性肿瘤、54例肺良性疾病和75例体检健康者血清。用化学发光微粒子免疫检测法(CMIA)测定ProGRP,用电化学发光免疫分析法(ECLIA)测定神经元特异性烯醇化酶(NSE)。结果 SCLC组ProGRP水平高于非小细胞肺癌组(NSCLC)、肺良性疾病组、健康对照组、其他恶性肿瘤肺转移组和其他恶性肿瘤组,差异有统计学意义(F=40.336,P<0.01)。不同组织学类型中,SCLC组ProGRP水平高于鳞状细胞癌、腺癌、大细胞癌、腺鳞癌和其他组织类型,差异有统计学意义(F=16.359,P<0.01)。ProGRP鉴别NSCLC和SCLC时最佳cut off值为37.00 pg/mL,约登指数为0.696,ROC曲线下面积(AUCROC)为0.877,敏感性为85.7%,特异性为83.9%。结论 ProGRP是SCLC辅助诊断的良好指标。

肿瘤标志物室间质评结果的评价

随着肿瘤的发生率和患者的死亡率逐年增高,肿瘤标志物用于肿瘤的辅助诊断、疗效观察、监测复发转移和判断预后等越来越受到临床医师的重视[1]。而肿瘤标志物检测的质量控制是对其结果稳定、可靠的有力保证。

慢性肾脏病对血清胃泌素释放肽前体测定的影响

目的探讨慢性肾脏病(CKD)对血清胃泌素释放肽前体(ProGRP)测定的影响。方法采用化学发光微粒子免疫检测法(CMIA)测定ProGRP,采用碱性苦味酸法测定肌酐(Cr),根据简化MDRD公式计算估算肾小球滤过率(eGFR),根据eGFR确定CKD分期。分别检测了112例慢性肾脏病、34例原发性小细胞肺癌(SCLC)和75例健康体检者血清。结果ProGRP与Cr水平呈正相关(r=0.560,P<0.01),ProGRP与eGFR呈显著负相关(r=-0.798,P<0.01)。健康对照组、慢性肾脏病组、小细胞肺癌组,三组间ProGRP水平差异有统计学意义(F=75.876,P<0.01)。随着慢性肾脏病的进展,ProGRP水平逐渐增高(F=57.272,P<0.01)。小细胞肺癌组与CKD5期ProGRP水平比较差异无统计学意义(P>0.05),与其余CKD各分期比较差异均有统计学意义(P<0.01)。当确定ProGRP最佳截断值为290.91 pg/mL时,其对SCLC与CKD5的鉴别,特异性达98.4%。结论慢性肾脏病患者血清ProGRP水平可大幅度升高,ProGRP用于小细胞肺癌的辅助诊断时需排除慢性肾脏病引起的肾小球损伤导致的血清ProGRP升高。

玉米矮秆主效QTL qph1-4的精细定位

利用1份在玉米自交系87-1的遗传背景上综3的染色体单片段代换系(Single segment substitution line,SSSL)SSSL-Y7为试验材料,3年3点的株高表现型鉴定表明,SSSL-Y7的株高均显著矮于受体亲本87-1,且加性效应百分率均在-10%以下,推测在该SSSL内的位于第1染色体长臂上SSR分子标记umc1122附近的目标代换片段上存在可以使玉米株高致矮的主效QTL.在该SSSL与87-1杂交构建的F2分离群体中,高秆与矮秆的株数符合3∶1的分离比例,推测其矮秆表现型由1对隐性基因控制,将该基因命名为qph1-4.qph1-4基因来源于供体自交系综3,位于Bin 1.07区域,在SSR标记MPH147和umc2396之间,距两标记的遗传距离分别为1.5和0.3 cM.与qph1-4基因连锁的SSR标记还有MPH164,umc1122,MPH162,MPH9,qph1-4与之间的遗传距离分别是2.2,2.0,2.0和2.5 cM,这些SSR标记与qph1-4基因在染色体上的排列顺序为MPH164-umc1122-MPH162-MPH147-qph1-4-umc2396-MPH9.

两种方法检测CA125和HE4对卵巢癌诊断价值的比较

目的研究全自动电化学发光免疫分析法(ECLIA)和化学发光微粒子免疫法(CMIA)检测血清糖类抗原125(CA125)和人附睾蛋白4(HE4)对卵巢癌的诊断价值。方法采集我院卵巢癌39例、卵巢良性疾病63例和健康人50例的血清标本。通过ECLIA和CMIA同时检测CA125和HE4,用ROMA公式预测卵巢癌发病风险,评估两种方法诊断卵巢癌的效能。结果卵巢癌组分别与卵巢良性疾病组和健康人组比较,同种检测方法CA125和HE4水平差异均具有统计学意义(P<0.01);卵巢良性疾病组和健康人组比较,同种检测方法CA125水平差异具有统计学意义(P<0.01)。ECLIA和CMIA测定的CA125和HE4值均高度正相关(r=0.995,P<0.01;r=0.997,P<0.01)。以卵巢良性疾病组为对照,采用两种方法分别测定CA125和HE4用于诊断卵巢癌,ROC曲线下面积分别为0.760、0.813(ECLIA)和0.746、0.782(CMIA)。两种方法测定CA125和HE4后分别计算ROMA值,卵巢良性疾病和卵巢癌两种方法ROMA值差异均无统计学意义(P>0.05)。鉴别卵巢良恶性疾病时,CA125敏感性最高,HE4特异性最高,准确性ROMA和HE4比CA125高。结论两种方法的血清CA125和HE4水平高度正相关,都可作为卵巢癌诊断的检测方法。

肝癌患者脂质和脂蛋白的变化

肝脏在脂质和脂蛋白的代谢中起着重要的作用。在大多数肝细胞癌情况下,血浆三酰甘油、胆固醇、游离脂肪酸、高密度脂蛋白(HDL)、低密度脂蛋白(LDL)、脂蛋白a、载脂蛋白AⅠ和载脂蛋白B有轻度至显著的减少,分析肝细胞癌患者血浆脂质、脂蛋白和载脂蛋白可以反映肝细胞损伤的程度。同时,HDL和LDL可作为不溶于水的抗肿瘤药物的载体。

新冠疫情下带教医学检验专业学生临床实习的思考

近年来随着新型冠状病毒肺炎的爆发流行,新冠肺炎的防控工作让医学检验专业进入了大众视野,医学检验专业人才为新冠肺炎的筛查和辅助诊断发挥了重要作用。如何不负重托,培养合格的医学检验专业人才更好地为疫情防控提供服务,对医学检验专业的带教工作提出了新的挑战。临床实习是学生从学校理论知识的学习到适应临床实验室工作的关键阶段,通过总结在新冠疫情下带教医学检验专业学生临床实习中的一些经验,助力培养合格的医学检验人才。

CIK细胞体外培养的免疫表型

目的探讨体外培养过程中细胞因子激活的杀伤细胞(CIK)免疫表型的动态变化。方法通过向外周血单个粒细胞(PBMC)中加入白细胞介素2(IL-2)、γIL-1α、γ干扰素(γ-IFN)与抗CD3McAb,诱导出CIK细胞。经流式细胞分析法对CIK细胞进行动态表型分析。结果动态表型分析显示,在第14~21天时CD3+CD16+56+细胞为(31·6±5·5)%^(35·8±9·7)%,呈高表达的平台期。结论CIK细胞在体外培养14~21d,CIK细胞CD3+CD16+56+双阳性细胞呈高表达,此时临床应用可取得较好疗效。

细胞因子诱导的杀伤细胞与肿瘤浸润淋巴细胞体外细胞毒活性比较

目的比较用多种细胞因子诱导的杀伤细胞(CIK)与癌性胸水中肿瘤浸润淋巴细胞(TIL)的细胞毒活性,为临床应用提供依据。方法用不同的细胞因子分别诱导培养CIK和癌性胸水TIL,按常规法计数细胞增殖量,采用四甲基偶氮唑盐(MTT)比色法检测其细胞毒活性。结果诱导培养14d后,CIK细胞毒活性为(76.65±16.78)%,增殖倍数为520±102;TIL细胞毒活性为(55.31±11.02)%,增殖倍数为182±78。结论CIK细胞对K562细胞的细胞毒活性在14d时达峰值,而TIL细胞在21d时才达峰值,且CIK细胞毒活性明显高于TIL细胞,增殖细胞数量也比TIL细胞高。CIK可替代TIL细胞进行胸腔注射治疗癌性胸水。

基于单片段代换系的玉米百粒重QTL分析

籽粒大小是影响玉米产量的关键因素,百粒重是衡量籽粒大小的一个指标。本研究基于59份玉米染色体单片段代换系(SSSL)纯合体,对玉米百粒重性状进行2年6个试验环境的表型鉴定,利用t测验和重叠群作图的方法对SSSL内代换片段上的百粒重效应进行了QTL分析。共检测出20个百粒重QTL,分布在玉米的8条染色体上,其中14个(70.0%)在2个以上试验环境中被重复检出,4个(20.0%)在4个以上试验环境中被重复检出,在全部6个试验环境中重复检出且基因加性效应值较大的玉米百粒重QTL是位于玉米第5染色体Bin5.05区SSR分子标记bnlg278和umc1680附近的q100kw-5-3。研究结果为玉米籽粒大小性状相关基因的进一步精细定位和克隆奠定了基础。

CIK细胞治疗老年人中晚期胃癌的副反应分析

目的:探讨使用细胞因子诱导的杀伤细胞(cytokine-induced killer cells,CIK细胞)免疫治疗老年中晚期胃癌的副反应及其处理方法。方法:采用生物技术诱导培养CIK细胞,经培养后的CIK细胞回输给老年中晚期胃癌患者,同时观察输注后的临床反应。结果:在回输后29例老年中晚期胃癌患者中PR 8例,MR 9例,sD 7例,PD 5例,总缓解率为58．6％。患者的全身反应及局部反应包括寒战13例,发热9例,恶心呕吐1例,全身不适3例,经对症处理后无一例患者出现休克、毛细血管渗漏综合征、皮疹与血尿常规、肝肾功能异常。结论:用自体CIK细胞治疗老年中晚期胃癌,可使老年中晚期胃癌患者的临床症状和体征得到改善,治疗中的副反应经对症处理可以缓解。

细胞因子诱导的杀伤细胞治疗中晚期胃癌的疗效

目的评价应用细胞因子诱导的杀伤细胞（CIK）过继免疫治疗晚期胃癌的有效性。方法用淋巴细胞分离液分离出单个核细胞,将诱导后的CIK细胞回输给晚期胃癌患者。采用流式细胞术分析CIK培养过程中与55例晚期胃癌患者治疗前后外周血中的T细胞亚群（CD3^＋,CD4^＋,CD8^＋）、CIK细胞（CD3^＋CD56^＋）及NK细胞（CD3^-CD56^＋）的变化,并应用生化比色法与免疫分析技术检测患者治疗前后血清恶性肿瘤相关物质（TSGF）、胃癌相关抗原（MG7-Ag）、糖类抗原19-9（CA19-9）和癌胚抗原（CEA）含量。结果CIK细胞对K562细胞的细胞毒活性在14-21d时达峰值。CD3^＋CD56^＋细胞由起初的（0.7±0.4）%上升到14d的（31.6±5.5）%与21d的（35.8±9.7）%。经CIK细胞治疗后患者的肿瘤标志物水平下降,而NK与T细胞亚群水平明显升高,且CIK升高尤为显著,同时提高了患者的生活质量。总缓解率61.8%。结论用CIK细胞回输治疗晚期胃癌患者可提高患者的细胞免疫功能,并改善其临床体征,无明显毒副作用。

自体CIK细胞联合化疗治疗晚期非小细胞肺癌

目的评价自体细胞因子诱导的杀伤细胞(CIK细胞)联合化疗治疗晚期非小细胞肺癌(NSCLC)的临床疗效。方法59例患者分成A组(自体CIK细胞联合TP方案化疗29例)与B组(单用TP方案化疗30例)。对两组的生活质量、免疫学反应、缓解率(RR)、疾病进展时间(TTP)与生存期进行观察比较。CIK细胞由自体外周血单个核细胞诱导产生。结果CIK细胞的数量与杀伤活性均在培养第14￣21天达到高峰。与B组相比,A组患者的免疫力与生活质量、疾病控制率(DCR)显著提高,中位生存时间(MST)明显延长,TTP与总生存期(OS)均明显延长,差异均有统计学意义(均P<0.05)。两组间RR差异无统计学意义(P>0.05)。结论自体CIK细胞回输安全、副作用小。CIK细胞联合化疗治疗晚期NSCLC能有效改善患者生活质量,并能延长生存期。

自体CIK过继免疫治疗恶性肿瘤的最佳输注时间

目的研究恶性肿瘤患者自体细胞因子诱导的杀伤细胞(CIK)的免疫表型与细胞毒活性的变化规律,探讨肿瘤患者CIK过继免疫治疗输注的最佳时间。方法采集40例恶性肿瘤患者外周血单个核细胞(PBMC),由IFN-γ、rhIL-1α、rhIL-2等细胞因子和CD3单克隆抗体体外诱导培养成CIK。用流式细胞术动态监测免疫表型,MTT法分析细胞毒活性。结果随着诱导时间的延长,PBMC中CD3+、CD3+CD8+、CD3+CD56+表型细胞所占比例呈上升趋势。CD3+CD4+细胞在7 d达到峰值,随后缓慢下降。CD25+细胞在培养的早期(3～7 d)即达峰值,7～14 d缓慢下降,14～21 d快速下降。HLA-DR+细胞在0～14d处于上升期,14 d达峰值后快速下降。成熟CIK细胞毒活性[(52.49±7.70)%]较未活化的PBMC[(7.02±2.00)%]显著增高(P<0.01)。结论 14 d左右能诱导出典型的CIK,CD3+CD56+细胞处于对数生长期。确立自体CIK过继免疫治疗恶性肿瘤的最佳输注时间为第14天。

卵巢癌患者血液NLR,CA125,HE4水平联合检测的实验诊断和预后价值研究

目的探讨中性粒细胞/淋巴细胞比值(neutrophil-to-lymphocyte ratio,NLR)、血清糖类抗原125(carbohydrate antigen 125,CA125)、血清人附睾蛋白4(human epididymis protein 4,HE4)在卵巢癌(Ovarian Cancer,OC)中的表达水平以及卵巢恶性肿瘤风险判定(risk of ovarian malignancy algorithm,ROMA)比值在OC中的诊断价值及疗效评估的临床意义。方法收集苏州大学附属第三医院2017年5月~2020年2月确诊的OC患者、卵巢良性疾病患者和健康体检者血清,检测各组受试者血液NLR,CA125,HE4以及ROMA比值的水平,比较各组表达水平的差异,评价检测指标在OC及相关疾病诊断中的敏感度和特异度。结果OC组NLR[3.62(1.22,13.11)vs 2.11(1.03,4.81)vs 1.60(0.85 vs 2.98)],CA125[420.80(10.75,4.22)vs 15.47(3.69,173.40)vs 13.81(6.02,56.47)],HE4[203.85(40.11,1500)vs 42.37(31.72,63.81)vs 42.22(23.61,102.40)]水平与良性疾病组和健康对照组相比,差异均具有统计学意义(χ^(2)=60.22,81.31,93.23,均P<0.0001);NLR,CA125对OC诊断的敏感度高于HE4(82.8%,81.0%vs 70.7%),但特异度低于HE4(68.9%,88.7%vs 100.0%),HE4和ROMA比值对OC的诊断特异度最高;相关性分析显示NLR与OC患者的肿瘤数量、患者年龄、TNM分期显著相关(Z=2.338,P=0.019;Z=2.971,P=0.003;Z=2.819,P=0.005);CA125和HE4的表达与OC患者的肿瘤数量、TNM分期、盆腔有无黏液显著相关(Z=2.759,4.228,3.418;2.419,3.767,2.122,均P<0.05);CA125,HE4和NLR术后水平与术前水平相比显著降低,差异有统计学意义(Z=5.365,P<0.001;Z=2.222,P=0.026;Z=4.487,P<0.001)。CA125与HE4的联合检测,结合ROMA比值,具有更好的诊断效率,与NLR比值在OC诊疗中具有互补性。结论NLR联合血清CA125和HE4检测以及ROMA比值可提高OC诊断价值、在OC患者的病情评估及治疗效果中有积极意义。

自体CIK细胞治疗晚期非小细胞肺癌

目的研究自体细胞因子诱导的杀伤细胞(CIK)细胞联合化疗治疗晚期非小细胞的疗效。方法59例患者分成A组(单用TP方案化疗)与B组(自体CIK联合TP方案治疗)。对两组的生活质量、免疫学反应、缓解率(RR)、无疾病进展时间与生存期进行观察比较。CIK细胞由自体外周血单个核细胞扩增培养产生。结果CIK细胞的数量与杀伤活性均在培养第14～21天形成到高峰。与A组相比,B组病人的免疫力与生活质量显著提高。结论自体CIK联合化疗治疗晚期非小细胞肺癌能有效改善患者的免疫功能。

CIK治疗前后肿瘤患者外周血CD4^+ CD25^+调节型T细胞变化研究

目的探讨细胞因子诱导的杀伤(Cytokine-induced killer cells,CIK)细胞治疗后肿瘤患者的免疫功能改变。方法采用流式细胞术检测28例肿瘤患者经CIK细胞治疗前后外周血CD4+CD25+T细胞比例。结果肿瘤患者CD4+CD25+T细胞比例明显高于对照组(P<0.05)。经CIK细胞治疗后,CD4+CD25+T细胞比例降低,与治疗前比较有统计学意义(P<0.05),但治疗后CD4+CD25+T细胞比例仍高于对照组,且差异有统计学意义(P<0.05)。结论肿瘤患者免疫功能处于抑制状态,CIK细胞治疗能在一定程度上提高患者机体的免疫功能。利用流式细胞术监测患者外周血CD4+CD25+T细胞的变化,对于评价疗效与判断预后具有一定的价值。

血清PIVKA-Ⅱ、AFP和GGT对原发性肝癌的诊断价值

目的通过检测血清肿瘤标志物PIVKA-Ⅱ、AFP和GGT的水平,探讨这3个检测项目在原发性肝癌中的诊断价值,进而为原发性肝癌的早期诊断提供有力的依据。方法研究对象为已证实患原发性肝癌(PHC)的住院患者,对照为健康体检人员与患肝良性疾病患者。分别测定血清PIVKA-Ⅱ、AFP和GGT水平,绘制受试者工作特征曲线(receiver operating characteristic curve,ROC),明确最佳临界值(cut-off value),评价3项指标对原发性肝癌的诊断价值。结果血清PIVKA-Ⅱ、AFP和GGT水平在原发性肝癌与肝胆良性疾病和健康体检者比较时,3项指标的差异均具有统计学意义(P<0.01)。3项指标用于诊断原发性肝癌绘制的ROC曲线,AUC_(PIVKA-Ⅱ)=0.882,AUC_(AFP)=0.833,AUC_(GGT)=0.703,可见,在诊断PHC方面,单项指标中PIVKA-Ⅱ具备最高的诊断价值,其次为AFP,诊断价值最低的为GGT。分析PIVKA-Ⅱ、AFP与GGT血清水平对PHC的诊断效率,灵敏度PIVKA-Ⅱ最高为73.0%(AFP:55.7%,GGT:47.8%),特异性AFP最高为97.9%(PIVKA-Ⅱ:96.5%,GGT:73.4%),阳性预测值AFP最高为95.5%(PIVKA-Ⅱ:94.4%,GGT:59.1%),阴性预测值PIVKA-Ⅱ最高为81.7%(AFP:73.3%,GGT:63.6%),准确性PIVKA-Ⅱ最高为86.0%(AFP:79.1%,GGT:62.0%)。当3项指标联合检测时,特异性和阳性预测值略有下降,而灵敏度上升到80.9%(单项检测最高的PIVKA-Ⅱ为73.0%),阴性预测值上升到86.0%(单项检测最高的PIVKA-Ⅱ为81.7%),准确性上升到88.4%(单项检测最高的PIVKA-Ⅱ为86.0%)。结论单项指标中PIVKA-Ⅱ有较好的灵敏度和准确性,AFP具有较好的特异性,而AFP和GGT水平对于PIVKA-Ⅱ阴性的原发性肝癌的诊断具有较好的补充作用。因此,3项指标联合测定,能够使PHC的诊断准确性与灵敏度提升。

CIK增强顺铂对肺腺癌细胞系A549的杀伤作用

目的研究细胞因子诱导的杀伤细胞(CIK)联合顺铂对人肺腺癌细胞系A549的杀伤作用。方法在体外将健康者外周血单个核细胞(PBMC)用细胞因子诱导形成具有杀伤活性的CIK细胞。CIK、顺铂及CIK联合顺铂分别作用A549细胞24、48 h,MTT法检测细胞吸光度(A)值并计算各组细胞杀伤率。完全培养液培养CIK 48 h后,取上清液,按1∶1稀释后与A549细胞共培养24 h,用流式细胞仪检测A549细胞凋亡率。结果 CIK、顺铂对A549的杀伤活性呈时间、剂量依赖性(P<0.05)。5μg/mL顺铂联合效靶比为10∶1、20∶1的CIK共同作用A549细胞24 h,A549的杀伤率(%)分别为53.80±6.81,61.17±3.82,与单用顺铂及CIK相比,其对A549的杀伤率显著升高(P<0.05)。CIK上清液可诱导A549细胞凋亡。结论 CIK可增强顺铂对A549细胞系的杀伤作用。

肿瘤生物样本资源库建立与管理的新策略

肿瘤生物样本资源库作为基础研究向临床应用转化的平台,在医学研究、临床诊断、转化医学和流行病学研究中发挥着重要作用。建立符合国际标准、统一化、规模化与共享化的肿瘤生物样本资源库有利于开展恶性肿瘤的系列研究。本文就肿瘤生物样本资源库建立的必要性、规范化建设与管理以及未来发展趋势进行综述,为构建肿瘤生物样本资源库提供新策略。