基于数据挖掘龚丽娟教授治疗慢性肾衰竭的用药规律

目的:基于数据挖掘分析龚丽娟教授治疗慢性肾衰竭(chronic renal failure,CRF)的用药规律。方法:收集龚丽娟教授治疗CRF的临床病例,采用频数统计、复杂网络等方法,统计治疗CRF的常用药物、药物性味、归经、分类、功效,以及药物与药物之间的复杂网络,分析龚丽娟教授治疗CRF的用药经验。结果:对纳入病例进行分析,发现龚丽娟教授临床治疗CRF的常用中药为山药、白马骨、茯苓、黄芪、白术、大黄、山萸肉、红花、枸杞子、太子参、陈皮、薏苡仁、半夏、党参,性味以甘温、甘平、苦寒为主,归经以脾为根本,其次是肝、肺、肾,药物功效以补气、补阴为主,以山药、黄芪、白术等最常使用,其次是清热、利湿药。常选用白马骨、白花蛇舌草、茯苓、薏苡仁等,此外活血化瘀药也在CRF中的治疗中占据重要作用,如红花、丹参等。结论:益肾清利乃龚丽娟治疗CRF的基础,随证轻重缓急变化辅以泄浊、活血等方药。

孙伟教授基于“肾虚湿瘀”理论运用益肾清利活血法分期诊治慢性肾脏病的经验

目的:总结孙伟教授运用“益肾清利活血法”分期治疗慢性肾脏病的经验。方法:通过查阅孙伟教授及其弟子近20年有关肾脏病的著作、论文、科学研究成果,分析其诊治慢性肾脏病的理论特点和治疗方法;临证跟随孙教授抄方,学习了解孙伟教授益肾清利活血法的临床运用情况;运用慢性肾脏病管理系统,动态观察孙教授诊治的慢性肾脏病患者的治疗效果。通过了解孙教授临床、科研等,分析他的学术思想及临床运用,归纳总结孙伟教授治疗慢性肾脏病的病机特点和治则治法。结果:孙伟教授认为,慢性肾脏病病机总属“肾虚湿瘀”并贯穿整个肾脏病变过程中,治疗慢性肾脏病的大法应为“益肾清利活血”,即补肾健脾、清利化湿、活血和络,并形成了基本处方,根据慢性肾脏病的分期随症加减。这一治法可以有效提高临床疗效,改善慢性肾脏病的临床症状,提高患者的生活质量。结论:“肾虚湿瘀”是所有的慢性肾脏病共同的病机特点,“益肾清利活血”治法适用于所有的慢性肾脏病患者,但在慢性肾脏病的不同类型、病程发展的不同阶段、不同病证特点、病情轻重不一的情况下运用益肾、清利、活血的侧重点不尽相同。

正交设计优选丹参-人参组分抗肝癌配伍研究

目的:优选丹参-人参活性组分抗肝癌优化配伍并对其作用机制作初步研究。方法:以人肝癌细胞SMMC-7721为研究对象,人正常肝细胞L-O2为对照,采用CCK-8法以对肝癌细胞增殖抑制和正常肝细胞保护作用为筛选指标,正交设计优选丹参-人参活性组分抗肝癌有效组合,确定优化配伍;应用实时细胞分析技术(RTCA DP)检测丹参-人参组分优化配伍对肝癌细胞SMMC-7721和正常肝细胞L-O2增殖的影响,并进行时效关系考察;采用Annexin V/PI双染法经高内涵细胞成像系统(HCS)检测丹参-人参组分优化配伍对肝癌细胞SMMC-7721凋亡的影响。结果:丹参-人参组分配伍抗肝癌SMMC-7721细胞的优化组合为丹参总酚酸、人参总皂苷和人参多糖,其配伍剂量分别为10,10,5 mg·L-1;优选的丹参-人参组分配伍能显著抑制肝癌细胞的增殖,呈现时间依赖性,而对正常肝细胞的增殖抑制作用不明显;丹参-人参组分优化配伍能诱导肝癌细胞凋亡,对正常肝细胞的凋亡无显著影响。结论:丹参-人参组分优化配伍具有潜在的特异选择性抗肝癌作用,其机制与抑制肝癌细胞增殖和诱导细胞凋亡相关。

虫草菌丝抑制自噬相关AMPK/ULK1信号活性改善肾小管上皮细胞衰老的分子机制

为了探讨虫草菌丝(mycelium of Cordyceps sinensis,MCs)改善D-半乳糖(D-galactose,D-gal)诱导的肾小管上皮细胞衰老的作用和分子机制,将体外培养的大鼠近端肾小管上皮细胞(NRK-52E)分为正常组(normal group,N),模型组(D-gal model group,D),低剂量MCs组(low dose of MCs,L-MCs),中剂量MCs组(medium dose of MCs,M-MCs),高剂量MCs组(high dose of MCs,H-MCs),分别进行不同的干预。具体而言,N组加入1%胎牛血清(fetal bovine ser-um,FBS)1 m L;D组加入100 mmol·L^(-1)D-gal;L-MCs组加入100 mmol·L^(-1)D-gal+20 mg·L^(-1)MCs;M-MCs组加入100 mmol·L^(-1)D-gal+40 mg·L^(-1)MCs;H-MCs组加入100mmol·L^(-1)D-gal+80 mg·L^(-1)MCs。在干预后的24或48 h,首先,观察D-gal对NRK-52E细胞klotho,P27,P16蛋白表达水平,β-半乳糖苷酶(senescence-associatedβ-galactosidase,SA-β-gal)染色以及腺苷酸活化蛋白激酶(adenosine monophosphate activated protein kinase,AMPK)/不协调的51类激酶1(uncoordinated 51-like kinase 1,ULK1)信号活性的影响;其次,观察MCs对NRK-52E细胞增殖活性的影响;最后,观察MCs对D-gal诱导的NRK-52E细胞klotho,P27,P16蛋白表达水平,SA-β-gal染色以及哺乳动物同族物微管相关蛋白1轻链3(microtubule-associated protein 1 light chain 3,LC3)和AMPK/ULK1信号活性的影响。结果表明,对于NRK-52E细胞,D-gal能引起衰老,并诱导磷酸化AMPK(phosphorylated-AMPK,p-AMPK)和磷酸化ULK1(phosphorylated-ULK1,p-ULK1)蛋白高表达,激活AMPK/ULK1信号通路;中、高剂量MCs与D-gal联合干预能明显改善klotho,P27,P16蛋白表达水平和SA-β-gal染色程度,具有抗细胞衰老的作用;此外,中、高剂量MCs与D-gal联合干预能明显改善LC3,p-AMPK,p-ULK1蛋白表达水平,抑制AMPK/ULK1信号活性,提高自噬水平。总之,对于D-gal诱导的肾小管上皮细胞衰老模型,MCs在体外有抗衰老的作用,并且,通过抑制自噬相关AMPK/ULK1信号活性而干预其衰老进程。这可能是MCs抗肾小管上皮细胞衰老的新的分子机制。