水稻冷胁迫响应蛋白OsCML16的外源表达、纯化及质谱验证

【目的】在大肠杆菌中过表达、纯化水稻冷胁迫响应蛋白OsCML16,同时制备OsCML16蛋白抗体提供抗原,为采用该抗体研究水稻OsCML16蛋白的生物学功能提供参考依据。【方法】采用TMHMM 2.0在线分析软件对目的蛋白OsCML16进行跨膜区分析,利用高保真PCR扩增目的基因片段,以基因重组方法构建原核表达载体pET30a-OsCML16,并将重组质粒转入大肠杆菌表达菌株BL21(DE3)中;通过IPTG诱导OsCML16蛋白表达,然后采用亲和层析方法纯化获得目的蛋白,最后运用质谱验证法分析验证蛋白序列的真实性。【结果】通过对OsCML16蛋白跨膜区分析,发现该蛋白不包含跨膜结构,适合外源表达全长蛋白。将OsCML16基因链接至pET30a载体能成功构建原核表达载体pET30a-OsCML16,目的基因序列无突变位点,可用于表达目标蛋白。外源表达的OsCML16蛋白经过SDS-PAGE电泳分析,结果表明,OsCML16蛋白在28℃下可诱导表达,采用亲和层析方法纯化融合蛋白His6-OsCML16-His6,能成功获得分子量约30 kD的目的蛋白。对纯化的蛋白进行质谱验证分析,结果鉴定到3条多肽属于OsCML16蛋白,表明外源表达的蛋白即为OsCML16蛋白。【结论】采用原核表达方法将水稻冷胁迫响应基因OsCML16在大肠杆菌中表达,运用亲和层析技术根据融合蛋白携带组氨酸标签纯化获得融合表达蛋白His6-OsCML16-His6,并以蛋白质谱技术验证该蛋白的序列完全正确,后续可将水稻OsCML16蛋白用于抗体制备及蛋白功能研究。

南宁市强对流暴雨降水特征及成因初探

对1955～2000年发生在南宁市的强对流暴雨的降水特征作了较系统的分析,得出5～8月是强对流暴雨多发期,以单个雨团影响最为普遍,易发生在水汽和不稳定层结垂直分布极不均匀的环境场中。

表伊快霉素对耐甲氧西林金黄色葡萄球菌毒力和生物被膜的影响

目的研究表伊快霉素(5’-epiequisetin)对耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(methicillin-resistant Staphylococcus aureus,MRSA)毒力因子和生物被膜的抑制作用。方法微量肉汤稀释法测定表伊快霉素对MRSA的最小抑菌浓度(minimum inhibitory concentration,MIC),绘制时间-抑菌曲线评估其持续抑菌效果;研究亚抑制浓度(sub-minimum inhibitory concentration,sub-MIC)的表伊快霉素对MRSA毒力因子溶血素、菌黄素和脂肪酶的影响。结晶紫染色法与光学显微镜观察评价表伊快霉素对MRSA生物被膜的作用;研究亚抑制浓度的表伊快霉素对MRSA运动性、胞外多糖产生的影响,通过扫描电镜观察其对MRSA细菌形态的影响。结果表伊快霉素抑制MRSA的MIC为16μg/mL。在sub-MIC浓度下,表伊快霉素可抑制MRSA毒力因子溶血酶、菌黄素、脂肪酶的产生;表伊快霉素对MRSA生物被膜形成有抑制作用,并可抑制胞外多糖的产生和MRSA的滑行运动;扫描电镜观察显示表伊快霉素可使MRSA排列疏松,菌体皱缩。结论表伊快霉素能够显著抑制MRSA毒力因子和生物被膜形成,能够减少MRSA的致病性和耐药性,可作为抗MRSA药物研究的先导化合物。

南宁市强对流暴雨天气雷达回波类型分析

将南宁市强对流暴雨天气的雷达回波分成四种类型,对利用雷达回波特征制作强对流暴雨天气预报提供帮助。

数码笔在高中生命科学教学中的应用

本文从记录痕迹、圈画标注、自我反思三个方面,总结了在高中生命科学教学中数码笔的应用,以及使用收获与反思。

“糖类代谢”教学设计

1教材分析 本课内容是上海科技版《生命科学》高一（试用本）第4章“生命的物质变化和能量变化”第4节“生物体内营养物质的转变”第1课时。整个章节的内容着眼于普遍存在于生命世界的新陈代谢过程，诠释了生物体在物质变化和能量转换上的“动态”规律。这一章的学习将让学生对生命本质的认识在分子水平上得到深化，从而在微观层面上更深入地理解生命的本质，同时为以后进一步认识信息流本质和其他生命活动规律打下基础，因此本章在整个高中生命科学学习中具有重要基础意义。

28例消化性溃疡患者的护理体会

目的：探讨消化性溃疡患者的护理模式对治疗的影响.方法：选用28化性溃疡病人,予以心理护理、饮食指导、服药指导、消毒和健康教育等护理措施.结果：28例患者全部治愈出院,随访6～24个月无复发.结论：通过全新的规范护理能够提高疗效,减少复发.

北海竹林盐场极端嗜盐真菌的多样性及其抑菌活性研究

为探讨北海竹林盐场极端嗜盐真菌的物种多样性及其抑菌活性,采用高盐培养基分离盐场饱和盐度采样点的可培养真菌,并基于ITS基因序列进行菌株鉴定;使用耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(Methicillin-resistant Staphylococcus aureus,MRSA)、表皮葡萄球菌(Staphylococcus epidermidis,SE)、无乳链球菌(Streptococcus agalactiae,SA)和海豚链球菌(Strepstococcus iniae,SI)作为指示菌,利用96孔板法评价真菌发酵提取物的抑菌活性。本研究分离得到可培养极端嗜盐真菌16株,鉴定为6科6属12种,其中枝孢菌属(Cladosporium,3种)、黑孢霉属(Nigrospora,3种)和镰刀菌属(Fusarium,3种)是优势属。菌株F.incarnatum GXIMD00527和F.chlamydosporum GXIMD00541的发酵产物对4种指示菌有较强的抑菌活性[90%Minimal Inhibitory Concentration(MIC90)<6.25μg/mL],Alternaria alternata GXIMD00532、Cladosporium cladosporioides GXIMD00533和Curvularia hawaiiensis GXIMD00538的发酵产物对MRSA有抑菌活性(MIC90≤25μg/mL)。本研究丰富了广西嗜盐海洋真菌的物种多样性,为北部湾海洋微生物资源的开发利用奠定了基础。

广西涠洲岛柳珊瑚共附生真菌多样性及其抑菌活性

文章使用4种分离培养基,从10个广西涠洲岛柳珊瑚样本中分离可培养真菌,通过菌落形态观察和内转录间隔区序列系统发育分析,得到涠洲岛柳珊瑚共附生真菌多样性信息,并采用96孔板法测定了真菌发酵液乙酸乙酯提取物的抑菌活性和抗生物被膜形成活性。试验结果表明,从涠洲岛柳珊瑚样本中分离得到191株共附生真菌,鉴定为26个种。这些真菌均属于子囊菌门,分布于6个属:曲霉属(Aspergillus)、青霉属(Penicillium)、链格孢属(Alternaria)、枝孢菌属(Cladosporium)、黑孢霉属(Nigrospora)和Parengyodontium属。曲霉属(Aspergillus)为优势种属,占总菌株种类的69.23%;次优属为枝孢菌属(Cladosporium)。抑菌活性筛选发现有11种真菌至少对一种指示菌有抑制活性,占菌种总数的42.31%;有7种真菌对表皮葡萄球菌生物被膜形成具有抑制活性,半数有效浓度(EC_(50))范围为40.3~155μg·mL^(-1),菌株Penicillium cinnamopurpureum GXIMD00518、Aspergillus carneus GXIMD00519具有抗耐甲氧西林金黄色葡萄球菌生物被膜形成活性,EC_(50)分别为105.4μg·mL^(-1)和117.4μg·mL^(-1)。

大飞扬草总三萜提取工艺优化及含量测定

目的:在单因素试验的基础上,通过正交试验优化大飞扬草总三萜的超声提取工艺。方法:以熊果酸标准品为对照,5%香草醛-冰醋酸和高氯酸为显色剂,紫外分光光度法测定大飞扬草中总三萜酸的含量。并在单因素试验的基础上,考察提取溶剂溶度、提取温度、时间及料液比对大飞扬草枝总三萜得率的影响,优化出最佳提取工艺条件。结果:确定三萜的最佳提取工艺为:浓度为80%的乙醇,料液比1︰40,在55℃下,超声提取35 min。结论:优化得到的大飞扬草总三萜酸超声提取工艺稳定,可行。

国学经典诵读与初中语文教学的有效整合初探

在初中语文的教育中,国学经典诵读教学至关重要。老师应该了解过去经典诵读教学的重要性,利用国学经典引导学生自主地进行诵读和感知,强化学生对语文知识的印象。重视学生感知能力的培养,迎合当前新时代的发展背景,不断对传统的语文教育模式进行创新。老师应该将历史文化知识的传承作为基础,充分落实立德树人的教育理念,让学生能够真正有所进步和提升。

大飞扬草有效成分提取分离及生物活性初筛

目的:提取分离大飞扬草有效成分并筛查其生物活性。方法:75%乙醇粗提大飞扬草干燥粉末后柱层析分离。利用体外实验进行抗肿瘤细胞活性和抗菌活性测试。结果:得到乙醇、石油醚、氯仿和乙酸乙酯4种提取物。其中乙醇提取物对人胃癌细胞MGC-803细胞的抑制效果明显;石油醚提取物对人肝癌细胞SMMC-7721细胞的抑制效果明显。乙醇提取物和石油醚提取物对金黄色葡萄球菌具备较明显的抑制作用。石油醚提取物同时对铜绿假单胞菌具备较强的抑制作用。结论:大飞扬草乙醇提取物和石油醚提取物具备一定的抗肿瘤和抗菌活性,具备继续研究的潜力。

南宁雷达责任区强对流天气的气候统计特征分析

对1958～2002年共计44a内,前汛期(2～6月)南宁雷达责任区内的冰雹、短时大风等强对流天气进行了气候统计分析,以及分析了强对流天气对应的影响天气系统,得到了一些有价值的气候时空分布特征规律.

0313号台风过程的中尺度雷达回波演变及分析

0313号台风“杜鹃”于9月2日20～23时，在广东中部沿海经历了三次登陆之后，强度迅速减弱，西移进入广西。它造成的雨区分布和一般的台风不太相同，较成片的暴雨区出现在台风的左侧，而中心经过的附近雨反而相对较小。南宁单部雷达回波资料显示过程为一次中尺度的回波团影响系统。