阴道镜检查在子宫颈病变诊治中的价值——附1894例分析

目的评价电子阴道镜检查在子宫颈病变诊治中的价值,调查中国医科大学附属第二医院妇科门诊子宫颈病变诊室就诊患者的疾病构成。方法回顾分析该院子宫颈病变诊室阴道镜检查1894例,评价阴道镜检查的诊断效能,同时计算疾病构成比。结果阴道镜检查诊断子宫颈病变的敏感性85.2%,特异性52.4%,符合率72%,阳性预测值72.6%。该院子宫颈病变诊室的疾病构成比中,子宫颈上皮内瘤变(cerivicalintraepithe-lialneoplasia,CIN)占56.0%,子宫颈癌占3.2%。结论阴道镜检查是子宫颈病变早期诊断不可或缺的辅助手段。阴道镜联合薄层细胞检查(thinprepcytologictest,TCT)可以提高筛查的阳性率。大型综合性医院妇科门诊的就诊患者中,CIN的疾病构成比很高,要积极对就诊患者进行规范的子宫颈癌防癌筛查,以防CIN和子宫颈癌的漏诊。

宫颈横裂皱褶处上皮病理学改变分析

目的:研究宫颈外口横裂皱褶处上皮组织的病理学改变。方法:分析83例Re id阴道镜评分(RC I)为0分的宫颈横裂处上皮的组织病理学结果,并以这83例宫颈的RC I 0分非皱褶处上皮组织作为对照组,将两组结果进行比较。结果:83例RC I 0分的皱褶处上皮中,22例(26.5%)存在宫颈上皮内瘤变(C IN),其中C IN I 18例,C IN II 4例;83例RC I 0分的非皱褶处上皮中,6例(7.2%)存在C IN,其中C IN I 4例,C IN II 2例。两组比较,差异显著(P<0.005)。结论:宫颈外口横裂的皱褶处更易发生病变,该处的组织病理学结果常高于阴道镜拟诊,活检时应常规检取皱褶处上皮。

沙眼衣原体蛋白水解酶CT841在感染细胞中的定位及抗原性研究

目的分析沙眼衣原体蛋白水解酶CT841在感染细胞中的定位并探讨其抗原性。方法利用PCR技术获得衣原体CT841基因,将基因序列克隆到载体pGEX6p,转化大肠杆菌XL1-blue,IPTG诱导表达融合蛋白GST-CT841。融合蛋白经纯化后免疫小鼠制备特异性抗体,间接免疫荧光法分析CT841在感染细胞中的分布特征;ELISA法分析CT841的抗原性。结果CT841原核表达重组体成功构建;CT841在感染细胞的表达模式与主要外膜蛋白MOMP相似,而与衣原体蛋白酶样活性因子CPAF及包涵体膜蛋白IncA的分布模式不同;CT841与衣原体感染患者、猴、鼠血清均发生强烈的免疫反应。结论沙眼衣原体蛋白酶CT841是定位于衣原体菌体上的免疫优势抗原。

抗沙眼衣原体MIP蛋白单克隆抗体的制备及特性鉴定

目的:制备小鼠抗沙眼衣原体MIP蛋白单克隆抗体并鉴定其生物学特性。方法:重组MIP蛋白免疫BALB/c小鼠,取小鼠脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞进行常规融合,间接ELISA法筛选阳性克隆并进行有限稀释克隆化,建立分泌抗MIP蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞株,进一步采用ELISA法鉴定单克隆抗体的效价、类别及抗MIP蛋白特异性,IFA法鉴定单克隆抗体的衣原体种属特异性及中和能力。结果:建立了2株能稳定分泌抗MIP蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞株(1R6H6、2L9D2),ELISA法测得培养上清效价均为1:1 600,免疫球蛋白类型分别为IgG2a和IgG1;2株单克隆抗体不仅能特异性的识别MIP重组蛋白,而且能特异性识别沙眼衣原体血清型A、D、L2所编码的内源性MIP蛋白,但不识别其他衣原体优势蛋白及MoPn、AR39和6BC;体外中和试验表明,2株单克隆抗体均能有效中和衣原体的感染性。结论:获得了有活性的能特异性识别MIP蛋白的单克隆抗体,为深入研究MIP蛋白的结构和功能奠定了基础。

宫颈糜烂与宫颈癌及宫颈上皮内瘤变的关系初探

【目的】初步探讨宫颈糜烂与宫颈癌及宫颈上皮内瘤变(CIN)的关系。【方法】随机选取就诊于中国医科大学附属盛京医院宫颈病变诊疗室的患者为研究对象,设无糜烂组、轻度糜烂组、中度糜烂组和重度糜烂组四组,比较各组CIN和宫颈癌的疾病构成比,并作相关因素分析。【结果】各组无病变、CINⅠ、CINⅡ、CINⅢ及宫颈癌的疾病构成比分别为:无糜烂组25.0,36.5%,12.5%,23.1%,2.9%;轻度糜烂组30.4%,40.2%,16.7%,11.8%,1.0%;中度糜烂组37.8%,37.8%,13.3%,10.2%,1.0%;重度糜烂组47.0%,30.0%,11%,9%,3%。其中轻、中、重度糜烂组之间的疾病构成比比较,差异无统计学意义。无糜烂组CIN和宫颈癌的构成比明显高于糜烂组(P<0.01)。【结论】与光滑的宫颈相比,糜烂的宫颈发生CIN和宫颈癌的可能性并未增加。不应该把宫颈糜烂作为宫颈病变的高危因素。对无糜烂的宫颈更应警惕宫颈病变的发生。

蛋白质组学筛选沙眼衣原体感染依赖性免疫优势抗原

目的:采用蛋白质组学方法筛选沙眼衣原体(Chlamydia trachomatis,Ct)感染依赖性免疫优势抗原。方法:将纯化的Ct D型标准株EB经紫外线照射制备UV-EB,然后将未经处理的活EB和紫外线处理的UV-EB分别感染体外培养的He La细胞,间接免疫荧光法检测紫外线对EB的灭活效果;分别将低剂量活EB滴鼻感染小鼠或将较高剂量UV-EB经肌肉接种免疫小鼠,首先检测两种接种方式下Ct在体内的增殖情况,然后收集两组小鼠的血清,分别与Ct D型全基因组908个开放读码框编码的GST-Ct融合蛋白进行ELISA反应,蛋白质组学筛选仅与活EB感染组小鼠血清反应且反应频率高的Ct感染依赖性免疫优势抗原;最后用筛选到的抗原体外刺激Ct生殖道感染小鼠的脾细胞,ELISA法检测细胞因子IFN-γ的产生情况。结果:经紫外线灭活的UV-EB体外不能感染He La细胞,肌肉接种免疫小鼠后也不能在小鼠肌肉组织内增殖,而活EB滴鼻感染组小鼠的肺组织中可检出大量的Ct;活EB滴鼻感染组小鼠与UV-EB肌肉接种免疫组小鼠的血清抗Ct抗体滴度差异无显著统计学意义;将两组小鼠血清分别与Ct全基因组编码的蛋白反应,通过蛋白质组学方法共鉴定出60个抗原能被至少1份小鼠血清识别; 22个抗原能同时被两组或任一组血清以≥50%的频率识别,为Ct免疫优势抗原,其中5个抗原仅被活EB滴鼻免疫组血清优势识别,即为Ct感染依赖性免疫优势抗原;该类抗原体外刺激小鼠脾细胞,能诱导良好的Th1型细胞免疫回忆应答。结论:筛选获得了Ct D型感染依赖性免疫优势抗原,为Ct亚单位疫苗研究提供了新的研究靶标。

宫颈环形电切术诊治宫颈原位癌41例分析

目的探讨宫颈环形电切术(LEEP)在宫颈原位癌(CIS)诊治中的价值。方法以经LEEP锥切后确诊为CIS的患者41例为研究对象,对LEEP术后行全子宫切除或二次锥切的患者34例,分析LEEP后残余宫颈的组织学状况;对全部患者以液基薄层细胞学检查(TCT)和阴道镜检查随访追踪。结果LEEP标本切缘干净、存在宫颈上皮内瘤变(CIN)I、存在CINII和存在CIS者分别占75.6%、9.8%、9.8%和4.9%。切缘干净组的病变残留率为0,明显低于切缘有CIN的各组(χ2=19.714,P=0.000)。LEEP锥切术后保留子宫的患者随访8～34个月均无复发。结论切缘干净的LEEP锥切对CIS疗效满意;对CIN行切除性治疗有利于避免CIS的漏诊。

沙眼衣原体T细胞抗原CT143原核表达、纯化及免疫活性鉴定

目的克隆沙眼衣原体(Chlamydia trachomatis,Ct)T细胞抗原Ct143基因,表达并纯化该蛋白,检测其免疫活性。方法采用PCR技术从Ct基因组中扩增Ct143基因,并构建pGEX-6p-Ct143原核表达质粒,转化E.coli XL1-Blue,IPTG诱导重组GST-CT143融合蛋白表达,经酶切后得到无GST标签的纯蛋白免疫Balb/c鼠,ELISA及Western-blot分析CT143蛋白免疫原性及免疫反应性。结果成功构建了pGEX-6p-CT143原核表达质粒,序列测定证实重组质粒插入片段与GenBank登陆的Ct D型一致,长度为843 bp;GST-CT143融合蛋白在E.coli中获得稳定高效表达;纯蛋白与佐剂混匀后肌肉免疫小鼠,ELISA检测免疫小鼠的血清效价为1∶12 800,Westernblot结果表明该蛋白与Ct泌尿生殖道感染病人混合血清中IgG结合,具有免疫反应性。结论成功克隆表达了Ct T细胞抗原CT143,该抗原经纯化后具有良好的免疫原性及免疫反应性。

衣原体感染宿主细胞后对相关信号通路影响的研究进展

衣原体(Chlamydia)是一类专性细胞内寄生的革兰氏阴性细菌,可感染宿主细胞引起多种疾病。衣原体胞内感染可导致宿主细胞多条信号通路激活,以此调控宿主细胞的生物学行为,实现衣原体自身的生长发育周期和代谢,并引起相关疾病。本文主要综述衣原体感染过程中对PI3K/AKT、MAPKs和MDM2-p53信号通路的激活及作用,为衣原体致病机制及防治研究提供参考。

淋病奈瑟菌外膜蛋白PorB的克隆表达与鉴定

目的 构建表达淋病奈瑟菌外膜蛋白PorB重组质粒 ,并在大肠杆菌中表达获得基因重组蛋白。方法 用PCR方法从淋病奈瑟菌WHO标准株E株基因组扩增出PorB基因片段 ,插入 pUCm T载体中 ,序列测定正确后 ,将其亚克隆到表达载体 pQE3 0中 ,进一步测序正确后在大肠杆菌M 15中表达。 结果 获得淋病奈瑟菌PorB蛋白基因 ,经序列测定与GenBank公布的序列同源性高达 99% ;表达蛋白经SDS PAGE分析 ,相对分子质量与预期大小一致 ;重组蛋白经Western印迹法鉴定 ,在 3 4kD位置有特异条带 ,PorB蛋白在宿主菌中高表达。结论 基因重组表达的融合蛋白将有利于进一步研究淋病奈瑟菌外膜蛋白PorB的功能 。

基于建构主义的医学免疫学教学探究

为了进一步发挥建构主义教学理论的优势,文章首先阐述了建构主义的概念,并在此基础上对医学免疫教学进行探究。具体包括激发学生学习动机、理论联系实际、实施讨论式教学,以及利用现代化教学技术等方面。

PBL教学模式引入医学免疫学的挑战及对策

文章从PBL教学模式的优势出发,从PBL教学模式的运用、教学资源与师资力量、学生的自主学习能力、学校的硬件建设、教学大纲、评价方式六方面具体分析了PBL教学模式引入医学免疫学的挑战及对策。

淋病奈瑟菌外膜蛋白PorB编码基因的克隆及序列分析

目的 获取淋病奈瑟菌外膜蛋白PorB编码基因 (porB)并构建其重组表达质粒。 方法 根据porB已知序列 ,设计合成一对引物 ,用PCR方法从淋病奈瑟菌基因组DNA中扩增出 porB基因片段 ,克隆到原核表达质粒 pQE3 0中 ,转化大肠埃希菌M15感受态细胞 ,经酶切和PCR鉴定 ,然后进行测序。 结果 porB基因体外扩增产物大小约为 911bp。重组质粒经双酶切和PCR鉴定表明为正确重组子 ,测序结果与已知序列基本吻合。 结论 成功克隆了淋病奈瑟菌外膜蛋白PorB编码基因 ,为下一步PorB蛋白的功能研究和淋病奈瑟菌蛋白质疫苗的研制提供了基本的物质基础。

高校实验室安全管理问题与对策研究

实验室是高校资源体系中的重要组成部分,是践行教学育人、人才培养、科学研究等服务职能的重要场所。在安全标准化管理理念下,高校实验室安全管理问题逐渐凸显,不仅影响教学育人效果,同时也阻碍了高校实验室的长远发展。从管理体制、创新理念、队伍建设、安全管理力度等四方面分析问题,并针对性地提出优化改进建议。

肿瘤转移抑制基因KiSS-1在子宫内膜癌组织中的表达及意义

目的检测KiSS-1mRNA及KiSS-1蛋白metastin在子宫内膜癌组织中的表达,探讨其在子宫内膜癌浸润及转移中的作用。方法采用逆转录多聚酶链反应(RT-PCR)法及免疫组织化学(SP)法检测32例子宫内膜癌,10例子宫内膜上皮内瘤样病变(EIN)及12例正常子宫内膜组织中KiSS-1mRNA及KiSS-1蛋白metastin的表达情况及其与各种临床病理参数的关系。结果KiSS-1mRNA在子宫内膜癌组中的表达率(37.5%)明显低于EIN组(80.0%)及正常内膜组(83.3%),并且其在子宫内膜癌组中的表达率与临床分期、肌层浸润深度及淋巴结转移密切相关,均P<0.05。KiSS-1蛋白metastin在子宫内膜癌组中的表达率(43.8%)明显低于EIN组(90.0%)及正常内膜组(91.7%),并且其在子宫内膜癌组中的表达率与临床分期、肌层浸润深度及淋巴结转移密切相关,均P<0.05。KiSS-1mRNA和KiSS-1蛋白metastin在子宫内膜癌组织中的表达具有明显的正相关。结论肿瘤转移抑制基因KiSS-1在抑制子宫内膜癌的浸润和转移过程中可能起着重要的作用。

宫颈糜烂267例肉眼所见与病理诊断结果对比分析

目的调查普通妇科医生临床肉眼拟诊的宫颈糜烂经组织学检查确诊后的疾病构成。方法对普通妇科医生临床肉眼拟诊宫颈糜烂的患者267例行阴道镜下活检病理检查明确诊断,根据确诊结果统计其疾病构成。结果此267例肉眼拟诊的宫颈糜烂的疾病构成为:宫颈炎28.1%(75例),宫颈上皮内瘤样病变(CIN)I39.0%(104例),CINII13.5%(36例),CINIII14.6%(39例),宫颈癌3.4%(9例),其他1.5%(4例)。结论肉眼拟诊的宫颈糜烂中宫颈病变的比例很高,仅凭肉眼观察无法区分宫颈糜烂与宫颈上皮内瘤变及早期宫颈癌。

抗淋病LTB-PorB核酸疫苗与蛋白疫苗联合应用增强免疫应答的研究

目的:初步探讨抗淋病LTB-PorB核酸疫苗与蛋白疫苗联合免疫的免疫增强效应,为研制抗淋病疫苗提供实验依据。方法:大量制备核酸疫苗(pcDNA3.1(-)/ltB-porB)及重组蛋白疫苗(rLTB-PorB);通过鼻饲途径将核酸疫苗和蛋白疫苗采用核酸初免-蛋白加强(DNAprime-protein boost)联合免疫以及分别单独免疫雌性BALB/c小鼠,同时设PBS及空质粒(pcDNA3.1(-))对照组,检测各组体液免疫和细胞免疫应答水平。结果:免疫后第56天,联合免疫组小鼠生殖道sIgAA450(1·083±0·179)、血清IgG A450(1.023±0.116)、脾淋巴细胞诱生的IL-4[(357.58±34.44)/pg/ml]和IFN-γ[(261.85±29.92)/pg/ml]水平均明显高于各对照组(P<0.01),小鼠脾淋巴细胞增殖率(SI:2.12±0.29)较对照组显著增高(P<0.05);核酸疫苗组、蛋白疫苗组和联合免疫组血清IgG亚类IgG2a/IgG1比值分别为1.678、0.455和0.693。结论:LTB-PorB核酸疫苗和蛋白疫苗联合免疫组诱导的特异性体液免疫应答和细胞免疫应答水平明显优于单独的核酸疫苗组和蛋白疫苗组,且以诱导Th2倾向性免疫应答为主。

泌尿生殖道感染的葡萄球菌分布及对氟喹诺酮类药物的敏感性研究

目的 了解泌尿生殖道感染的葡萄球菌分布及对氟喹诺酮类药物的敏感性。 方法 选择 2 44例泌尿生殖道感染患者 ,对其葡萄球菌进行分离鉴定 ,用 6种氟喹诺酮类药物对分离到的葡萄球菌进行了敏感性试验。 结果 与泌尿生殖道感染有关的葡萄球菌分离率为 61.0 7% ,其中人葡萄球菌、金黄色葡萄球菌、溶血葡萄球菌较为常见。在 6种药物中加替沙星抗菌活性最强 ,随后依次为司帕沙星、左氧氟沙星、氧氟沙星、环丙沙星 ,诺氟沙星活性最差。 结论 人葡萄球菌、金黄色葡萄球菌、溶血葡萄球菌是泌尿生殖道感染的常见细菌 。

淋病奈瑟菌nspA与ltB融合基因的表达及其免疫活性

目的表达LTB-NspA重组融合蛋白,鼻饲免疫雌性Balb/c小鼠,分析重组融合蛋白的免疫活性,为研制抗淋球菌蛋白疫苗提供实验依据。方法转化并鉴定pET30a/ltB-nspA原核重组质粒后,在E.coliBL21中表达重组融合蛋白。鼻饲途径免疫雌性Balb/c小鼠,检测NspA特异性体液免疫和细胞免疫水平。结果 LTB-NspA融合蛋白组生殖道黏膜产生的NspA特异性sIgA水平和血清IgG水平随免疫时间呈上升趋势,第6周sIgAA450nm达0.689,明显高于NspA组和LTB、蛋白溶解液(solution buffer)对照组(P<0.01);第6周血清中产生的特异性IgGA450nm值达0.734,明显高于LTB和Solution Buffer对照组(P<0.01);LTB-NspA组脾淋巴细胞刺激指数(SI)为1.63,明显高于LTB和Solution Buffer对照组(P<0.01);LTB-NspA组小鼠脾淋巴细胞经特异性抗原NspA刺激后,培养上清中IFN-γ和IL-4含量明显升高,分别达142.23pg/ml和86.14pg/ml,明显高于LTB和Solution Buffer对照组(P<0.01)。但LTB-NspA与NspA两组间血清IgG水平、SI、IFN-γ和IL-4水平差异不显著(P>0.05)。结论 LTB-NspA重组蛋白诱导小鼠产生了较高水平的特异性体液免疫和细胞免疫;首次证实黏膜佐剂LTB可辅佐NspA诱导小鼠产生高水平的生殖道黏膜免疫。