连贯抗病毒颗粒的HPLC指纹图谱研究及含量测定

目的:采用指纹图谱结合多成分含量测定,提升院内制剂连贯抗病毒颗粒质量标准。方法:采用HPLC-UV法,色谱柱为YMC-Pack Pro C_(18)(250 mm×4.6 mm,5μm)色谱柱,流动相为乙腈-0.2%甲酸水溶液,梯度洗脱,流速为1.0 mL·min^(-1),检测波长为280 nm,柱温35℃,进样量为10μL;建立10批次连贯抗病毒颗粒指纹图谱;同时测定了连翘酯苷A、连翘苷和咖啡酸的含量。结果:指纹图谱中,共标定了13个共有峰,指认了其中4个色谱峰,并测定连翘酯苷A、连翘苷及咖啡酸的含量分别为13.22~18.05、2.432~3.540、0.2711~0.3428 mg·g^(-1)。结论:本文通过指纹图谱定性、含量定量方式,多维度提升院内制剂连贯抗病毒颗粒的质量控制水平。

四角蛤蜊、菲律宾蛤仔及文蛤水提醇沉上清液中相关核苷类物质的含量测定

目的建立四角蛤蜊、菲律宾蛤仔及文蛤软体水提醇沉上清液中主要核苷类成分尿苷、黄嘌呤、胸腺嘧啶、次黄嘌呤、肌苷、鸟苷、2-脱氧鸟苷、2-脱氧肌苷、胸苷、腺苷的测定方法。方法采用xBridge C18(4.6mm×250mm,5μm)色谱柱;以水和甲醇作为流动相梯度洗脱,以254nm为检测波长,体积流量0.5mL/min,柱温:25℃。结果四角蛤蜊、文蛤、菲律宾蛤仔的水提醇沉上清液中含有尿苷、黄嘌呤、胸腺嘧啶、次黄嘌呤、肌苷、鸟苷、2-脱氧鸟苷、2-脱氧肌苷、胸苷、腺苷。结论本检验方法简便、准确、重现性好,可作为相关蛤蜊软体水提醇沉上清液中主要核苷类成分含量的常规检测方法。

四角蛤蜊醇沉上清液对CCl_4致小鼠急性肝损伤保护作用

目的:研究四角蛤蜊醇沉上清液对四氯化碳致小鼠急性肝损伤的保护作用。方法:四氯化碳造成急性肝损伤模型,测定小鼠血清谷丙转氨酶(ALT)和谷草转氨酶(AST),还原性谷胱甘肽(GSH)活性;测定肝匀浆中丙二醛(MDA)含量和超氧化物歧化酶(SOD)活力,对肝组织进行病理学检查。结果:醇沉上清液(MS)高、中、低剂量组具有明显的剂量依赖性降低CCl4致小鼠肝损伤血清ALT,AST,GSH(p<0.01),高、中剂量组降低肝匀浆中MDA的含量(p<0.05),增强SOD的活性(p<0.01)。通过病理学切片观察,MS各剂量组能显著改善肝组织的病理变化。结论:MS对CCl4造成的小鼠急性肝损伤具有显著的保护作用。

酸性染料比色法测定妇科洗剂中总生物碱含量

目的:建立妇科洗剂中总生物碱含量的测定方法。方法:采用酸性染料比色法测定妇科洗剂总生物碱含量,并用正交实验筛选最优反应条件。结果:酸性染料比色法测定总生物碱含量的最佳条件为0.05%溴酚蓝染料用量1.5 mL,pH4.0的柠檬酸-柠檬酸钠缓冲溶液用量7.5 mL,氯仿萃取2次,每次5 mL,检测波长为405 nm。在浓度范围为0.022 4~0.112 0 g·L^-1内盐酸小檗碱对照品的吸光度与浓度线性关系良好。结论:此法灵敏度较好,准确度高,操作简便,能为妇科洗剂质量控制提供依据。

阳离子交换树脂与大孔吸附树脂联用富集桑叶中总生物碱与总酚的工艺研究

目的富集桑叶中总生物碱和总酚。方法联合应用阳离子交换树脂和大孔吸附树脂对桑叶中总生物碱和总酚成分进行富集纯化,并对工艺进行优化和验证。结果该工艺可较好的富集纯化桑叶中总生物碱和总酚成分,指标性成分1-脱氧野尻霉素(DNJ)、绿原酸、芦丁的含量可达到0.17%、3.05%、0.92%。结论阳离子交换树脂与大孔吸附树脂联用富集桑叶中总生物碱与总酚的方法可行,适合于大生产。

具有ACE抑制活性的霞水母酶解肽制备条件优化

目的:采用胰蛋白酶制备霞水母ACE抑制肽,并以响应面法优化酶解肽制备工艺,通过超滤分离获得具有ACE抑制作用的酶解肽活性部位。方法:单因素实验以ACE抑制率为指标,考察温度、酶解时间、pH、加酶量,进一步通过响应面法优化酶解工艺,以不同截留分子量的纤维膜进行分离。结果:胰蛋白酶水解霞水母制备ACE抑制肽的最佳工艺条件为:酶解温度:49.6℃,加酶量为0.69%,pH为7.8,酶解时间2.0h,酶解产物的平均ACE抑制率为56.79%,与预测值57.20%的相对误差为0.41%,经过超滤分离获得分子量<1k Da的酶解产物,ACE抑制活性最高,其IC50为66.58μg/ml。结论:确定霞水母酶解肽的制备工艺,其中分子量<1kDa的部分为主要效应物质基础。

正交试验优选银桑降糖颗粒中桑叶的提取工艺

目的：优选银桑降糖颗粒中桑叶的提取工艺,为该制剂的研发提供参考。方法：以芦丁提取量为指标,采用L9（34）正交试验考察乙醇体积分数及用量、提取时间对桑叶醇提取工艺的影响;以1-脱氧野尻霉素（DNJ）相对提取率为指标,通过L9（33）正交试验考察加水量及煎煮时间对桑叶水煎煮工艺的影响。采用HPLC测定芦丁含量,检测波长358 nm,流动相甲醇（A）-0.5%磷酸溶液（B）梯度洗脱（0~5 min,30%A;5~10 min,30%~35%A;10~15 min,35%~40%A;15~18 min,40%~50%A）;利用芴甲氧羰酰氯柱前衍生HPLC-UV测定DNJ含量。结果：最佳醇提工艺为加20倍量60%乙醇提取1次,提取时间1.5 h;芦丁提取量1.22 mg·g^-1。最佳水煎煮工艺为分别加30,25倍量水煎煮2次,煎煮时间依次为1.0,0.5 h;DNJ相对提取率88.06%。结论：优选的提取工艺稳定可行,可兼顾桑叶中黄酮类、生物碱类成分的提取。