EPCAM、MUC16免疫磁珠制备及循环肿瘤细胞检测

目的检测EPCAM、MUC16两种抗原在上皮性卵巢癌循环肿瘤细胞中表达的相关性。方法分别用羧基磁珠制备EPCAM、MUC16两种免疫磁珠,分3组:EPCAM免疫磁珠检测组、MUC16免疫磁珠检测组、2种磁珠均等混合检测组。对来源于同一患者的等体积外周血样本进行循环肿瘤细胞检测,HE染色后鉴定检测值。结果 EPCAM免疫磁珠、MUC16免疫磁珠、EPCAM+MUC16免疫磁珠对同体积、同来源样本检测值分别为22±11、14±6、28±12个肿瘤细胞(P<0.05),说明检测效率有统计学差异。结论 MUC16与EPCAM在上皮性卵巢癌循环肿瘤细胞中独立表达且存在差异,因此增加MUC16这一器官标志物可有效提高上皮性卵巢癌CTCs检出数量。

人鼻咽癌干细胞微球体培养并鉴定其生物特性

目的目前分离和鉴定鼻咽癌干细胞的方法仍不成熟。探索鼻咽癌细胞系干细胞微球体培养方法,并对CNE-2细胞微球体是否具有肿瘤干细胞生物特性(干性)进行鉴定。方法人鼻咽癌细胞CNE2、C666-1细胞在含生长因子的无血清培养基(serum-free medium,SFM)中悬浮培养。流式细胞术、Transwell小室实验、裸鼠成瘤实验、分别检测CNE2贴壁细胞(CNE2 monolayer,CNE2-MN)及CNE2微球体细胞(CNE2 sphere cells,CNE2-SC)CD133+标记细胞比例,体外侵袭能力、体内成瘤能力;CNE2-SC在含血清培养基中贴壁培养观察其分化能力;实时荧光定量PCR分析CNE2-MN及CNE2-SC相关干性基因Bmi-1、Oct4、Twist1RNA的表达。结果 2种细胞系均能在特殊配制的SFM中形成可以稳定传代的微球体,SFM新鲜配制、用细胞分离剂Accutase替代胰酶传代以及保持细胞的悬浮状态均有利于微球体的形成和增殖;在含血清培养基中培养能贴壁分化成CNE2-MN而无明显差异;CNE2-SC中CD133+细胞比例(98.79%)显著高于CNE2-MN(0.98%),差异有统计学意义(P<0.01);与CNE2-MN相比,CNE2-SC高表达干细胞相关基因Bmi-1、Oct4、Twist1及EMT标志物N-cadherin、Vimentin。Transwell小室实验示CNE2-SC与CNE2-MN的穿膜细胞数分别为(122±6)个/视野及(36±7)个/视野(P<0.05);裸鼠成瘤实验示1×104个CNE2-SC 3周内即能成瘤,成瘤率33.3%,而CNE2-MN不能成瘤,1×105个CNE2-SC与CNE2-MN成瘤体积比为(1.750±0.613)cm3vs(0.457±0.291)cm3(P<0.05),而1×106个以上2种细胞成瘤体积比为(2.332±0.549)cm3vs(0.669±0.278)cm3(P<0.01)。结论利用特制SFM悬浮培养法可得到鼻咽癌CNE2-SC,这种微球体富集了肿瘤干细胞,将为后续鼻咽癌干细胞研究打下基础。

结直肠癌化疗合理用药原则专家共识

结直肠癌是我国常见的恶性肿瘤,化疗仍是其主要治疗方式之一。因肿瘤的分期和部位不同,化疗的目的、方式、疗效也各不相同,如新辅助化疗、辅助化疗、联合化疗、姑息化疗。重庆市医学会肿瘤学分会化疗学组组织专家组成员,在大量循证医学证据的基础上,参考国内外相关指南和文献,讨论并制定了《结直肠癌化疗合理用药原则专家共识》,旨在规范结直肠癌化疗的治疗模式,保障医疗质量,提高化疗疗效、延缓复发、改善预后。

煤质检测技术探讨

为了保证云南的煤炭资源情况的实时更新效率以及煤炭质量检测的准确度,我们需要利用各种技术对云南的煤炭进行细致的检测与研究。文章利用化学实验的方法对煤炭中的全硫、全水分、发热量、氢等进行了测定。经过一段时间的调查研究,我们发现采取不同的方式来检测煤炭质量得出的结论是不同的。

分析新形势下财务会计与管理会计的融合

对新形势下企业财务会计工作进行了研究,总结了财务会计与管理工作的融合措施,旨在通过对财务会计工作的管理优化以及工作创新,满足企业经济发展的核心需求,促进新形势下我国财务会计工作以及管理会计工作的稳定发展.

页岩气资源开采现状与发展前景

页岩气作为非常规的天燃气资源,成为替代传统高污染能源开发的新产品,被纳入我国现代能源体系中,作为清洁型、环保型能源,广泛的应用于工业生产、化工等领域。现阶段,随着油气能源市场化、商业化开发水平的提升,以川南地区为代表的页岩气能源产业链建设逐步完善,页岩气在非常规油气资源开发体系的重要价值得到了认可。为有效提升页岩气勘探与开发的整体质效,相关政府与企业应全面、深入分析我国当前页岩气分布、开采的特点,合理规划“甜点区”、“甜点段”,加强核心技术的研发投入,构建配套的专业人才培养机制,做好全局战略部署,为页岩气的高质、高量、稳定开发与应用推广奠定基础。

标准物质在煤炭检验中的应用探究

近年来,随着煤炭工业的不断发展,逐渐促使煤炭检验工作受到越来越多的关注。而在煤炭检验过程中,标准物质是其重要的组成部分,同时也是煤炭检验结果真实性的重要保障。因此,如何选用标准物质,提高煤炭检验结果的准确性,是当前广大煤炭企业亟需解决的一大问题。文章就标准物质在煤炭检验中的应用进行探究,并作出针对性分析,以期借鉴。

重复经颅磁刺激对癌痛患者的镇痛效果研究

目的:探讨重复经颅磁刺激(repetitive transcranial magnetic stimulation,rTMS)对癌痛患者的镇痛疗效。方法:本研究采用前瞻性随机对照试验,将50例癌痛患者随机分为rTMS组和对照组各25例。在常规药物治疗的基础上,rTMS组给予高频10Hz、左侧背外侧前额叶(DLPFC)刺激治疗,对照组采用假刺激治疗。采用数字评价量表疼痛评分、口服吗啡等效剂量(OME)、WHO生存质量测定量表简表(WHOQOL-BREF)评定患者的治疗效果。结果:经2周治疗后,rTMS组患者的NRS评分均较治疗前及对照组治疗后明显降低(P<0.05),对照组治疗前后比较差异无统计学意义。治疗后,2组患者的OME均较治疗前有所增加(P<0.05),但rTMS组的增加剂量要明显低于对照组(P<0.05)。治疗后,2组患者WHOQL-BREF总分均较治疗前明显提高(P<0.05),但rTMS组更高于对照组(P<0.05)。治疗后,rTMS组的治疗有效率及显效率均明显高于对照组(P<0.05)。结论:rTMS可明显缓解癌痛患者的疼痛程度,降低止痛药物使用剂量,改善癌痛患者的生活质量,是一种有效的癌痛康复治疗工具。

浅析页岩气储层主要特征及其对储层改造的影响

页岩气储层作为非常规天然气存储的主要岩层,具备极强的非均质性,并且还具有低孔隙度、超低渗透率2方面物性特征,在开采天然气的过程中,在页岩气井完后直接开采所获得的产能相对较低,需要利用压裂技术改造储层从而提高开采产量。非均质性有横向及纵向2类,其特性强弱是由于页岩组成及结构特性所决定的。沉积环境、构造背景均会影响页岩气储层的结构及构造,因此岩石力学性质存在差异,储层敏感性也有所不同,天然孔裂隙的发育程度不一致。在储层改造中,岩石组成、岩石结构、天然孔裂隙发育度、地应力作用均是关键的影响因素。文章在明确页岩气储层主要特征的基础上对这些因素对储层改造所产生的影响进行了逐一阐述,旨在能有效提升页岩气产能及效率。

汉黄芩素逆转卵巢癌SKOV3细胞对顺铂的耐药性

目的 :研究汉黄芩素是否可以逆转顺铂(cisplatin,DDP)耐药性卵巢癌SKOV3/DDP细胞对DDP的耐药性,并探讨其可能的分子机制。方法 :用终浓度为20μmol/L的汉黄芩素作用SKOV3/DDP细胞24 h,同时以SKOV3细胞和未经汉黄芩素作用的SKOV3/DDP细胞作为对照。然后,采用CCK-8法检测各组细胞的增殖能力,细胞划痕愈合实验和Transwell侵袭实验检测不同组细胞的侵袭和迁移能力,蛋白质印迹法检测不同组细胞中P-糖蛋白(P-glycoprotein,P-gp)、E-钙黏蛋白(E-cadherin)、N-钙黏蛋白(N-cadherin)和波形蛋白(vimentin)的表达水平。结果:汉黄芩素处理后,SKOV3/DDP细胞对DDP的敏感性明显提高(P<0.05),迁移能力和侵袭能力均明显降低(P值均<0.01),N-cadherin和vimentin表达水平均明显下调(P值均<0.01),而E-cadherin表达水平明显上调(P<0.01),P-gp水平则无明显变化(P>0.05)。结论:汉黄芩素能增加SKOV3/DDP细胞对DDP的敏感性,其作用机制可能与逆转细胞的上皮-间质转化有关。

HPLC测定皂角刺中的槲皮素

目的建立皂角刺中槲皮素含量的测定方法。方法采用HPLC法,色谱柱为Kromasil C18柱(250mm×4.6mm,5μm),流动相为乙腈-0.1%磷酸溶液(30:70),检测波长为360nm,柱温为30℃,流速为1.0mL·min-1,进样量为10μL。结果槲皮素0.067～0.536μg与峰面积的线性关系良好(r=0.9998),平均加样回收率为98.68%,RSD=2.17%。结论所用方法简便、准确、快速,可用于皂角刺药材的质量控制。

miR-433-3p通过靶向下调GALNT1调控肺癌细胞的生物学行为

为了探讨微小RNA-433-3p(miR-433-3p)对肺癌细胞增殖、迁移、侵袭和凋亡的影响及其分子机制,该研究在体外培养人正常肺上皮细胞BEAS-2B以及肺癌细胞系H1299、Calu-3和Calu-6。采用定量逆转录PCR(RT-qPCR)检测上述细胞的miR-433-3p和N-乙酰氨基半乳糖转移酶1(GALNT1) mRNA的表达情况,采用Western blot检测上述细胞的GALNT1蛋白水平,筛选miR-433-3p和/或GALNT1 mRNA和蛋白表达相对较高的肺癌细胞系,并将筛选的细胞采用转染技术分为miR-NC组(空白转染对照组)、miR-433-3p组(miR-433-3p过表达组)、si-NC组(空白沉默对照组)、si-GALNT1组(GALNT1沉默组)、miR-433-3p+pcDNA组(miR-433-3p与pcDNA共转染组)、miR-433-3p+pcDNA-GALNT1组(miR-433-3p与pcDNA、pcDNA-GALNT1共转染组)。采用MTT、Transwell、流式细胞术和Western blot检测细胞活性、迁移、侵袭、凋亡及相关蛋白表达情况;采用双荧光素酶报告实验检测miR-433-3p和GALNT1的靶向关系。研究发现,与BEAS-2B比较,肺癌细胞中miR-433-3p表达水平显著较低(P<0.05),GALNT1表达显著升高(P<0.05),肺癌细胞H1299的miR-433-3p最低,GALNT1 mRNA和蛋白表达相对较高,因而选择肺癌细胞H1299进行研究。过表达miR-433-3p或干扰GALNT1均显著降低肺癌H1299细胞的增殖、迁移、侵袭和凋亡过程,且CyclinD1、MMP-2、MMP-9和Bcl-2表达水平显著降低(P<0.05),p21和Bax表达水平显著升高(P<0.05)。miR-433-3p靶向调控GALNT1表达(P<0.05)。上调GALNT1逆转了过表达miR-433-3p对肺癌H1299细胞增殖、迁移、侵袭和凋亡的影响(P<0.05)。该研究得出,miR-433-3p通过负调控GALNT1影响肺癌H1299细胞的增殖、迁移、侵袭和凋亡行为。