UHPLC-MS/MS法测定面膜化妆品中甘草、人参和黄芩类功效成分

建立了超高效液相色谱-三重四极杆质谱法(UHPLC-MS/MS)测定面膜化妆品中甘草功效成分(甘草苷、甘草酸)、人参功效成分(人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1、人参皂苷Re)和黄芩功效成分(黄芩苷)的方法,并用该方法对市售20批面膜样品进行风险监测。样品采用0.1%甲酸甲醇超声提取法,以0.1%甲酸水溶液-乙腈溶液为流动相,梯度洗脱,ACQUITY UPLC HSS T3(2.1 mm×100 mm,1.8μm)色谱柱分离,以UHPLC-MS/MS负离子模式检测。同时对样品前处理条件及色谱-质谱条件进行优化,并对方法学进行验证。结果表明:甘草苷、黄芩苷在0.25~100 ng/mL及人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1、人参皂苷Re和甘草酸在0.50~200 ng/mL质量浓度范围内呈良好线性关系,相关系数大于0.998;检出限为0.41~6.4μg/kg(S/N=3);基质中加标回收率为95.9%~109.1%,相对标准偏差小于4.9%(n=6)。该方法适用于面膜化妆品中甘草、人参和黄芩功效成分的测定。

女贞果实不同成熟期多指标化学成分动态积累的分析与评价

目的对女贞果实不同成熟期化学成分动态积累进行分析评价。方法采用高效液相色谱法、可见分光光度法对女贞果实不同成熟期三萜类、裂环环烯醚萜苷类、苯乙醇类及糖类等成分进行测定,利用主成分分析的综合评分法对测定结果进行评价。结果不同成熟期各类型化学成分含量变化较大,主成分分析结果表明齐墩果酸、熊果酸、女贞苷可能同为影响女贞子药材质量的重要因子。结论综合评价提示10月下旬可作为江苏南京产女贞子药材的适宜采收期。

新生代农民工的就业影响因素研究——以江苏省南京市为例

新生代农民工主要指的八零后、九零后农民工,而在用工大省江苏,民工荒缺口大大超过了往年,以江苏省农民工流入地南京市的新生代农民工为调查对象,研究江苏省的新生代农民工就业的影响因素具有典型意义,并对目前"民工荒"现象和新生代农民工就业中存在的结构性错位加以解释。

整体护理在妊娠糖尿病患者中的应用探讨

目的探讨妊娠糖尿病患者应用整体护理的效果及护理体会。方法选取2013年1月—2014年3月该院收治的31例妊娠糖尿病患者作为研究对象,随机分为两组,其中观察组16例,在常规护理的基础上应用整体护理,对照组15例,只单纯采用常规护理,观察、记录并分析两组患者的血糖控制情况和并发症的发生率。结果采用整体护理治疗前两组患者之间血糖水平比较,差异无统计学意义(P>0.05);采用整体护理治疗后,观察组患者血糖水平低于对照组患者血糖水平,差异有统计学意义(P<0.05),且观察组患者的并发症发病率明显低于对照组患者(P<0.05),所有差异有统计学意义。结论对妊娠糖尿病患者应用整体护理可有效控制血糖水平并减少并发症的发生,改善预后,具有积极的临床价值。

FDI对江苏农产品加工业的技术溢出效应研究

基于2002-2012年江苏省农产品加工业12个子行业的面板数据,建立面板数据模型,实证检验FDI对江苏农产品加工业的技术溢出效应。实证结果表明,资本和劳动都是促进农产品加工业产出增长的重要因素,FDI对农产品加工业内资企业产生了显著的正向技术溢出效应。

理想与现实的距离——新生代农民工就业简析

在城市"民工荒"和农村大量剩余劳动力这两个互相矛盾的社会背景下,我们对在南京市打工的新生代农民工进行了调查。文章采用对比分析法和描述分析法,将新生代农民工的现实的生活环境、工作状况与其心中的期望相对比,分析其差距。发现新生代农民工普遍有融入城市获得发展的需要,但是现实的就业平台很难给予其进一步发展的机会。新生代农民工普遍缺乏职业培训,同时低收入使得其工作生活方面都存在诸多困难,这给新生代农民工造成了心理上的失落和困惑。笔者认为政府要实行提高新生代农民工素质和社会就业环境"两手抓",方可解决当下"技工荒"和劳动力剩余这一矛盾,并促进劳动市场长期稳定发展,为我国经济进一步发展打下坚实基础。

加速康复外科理念围手术期营养评估量表应用于老年股骨粗隆间骨折患者的研究

目的:探讨基于加速康复外科理念下自制围手术期营养评估量表应用于老年股骨粗隆间骨折患者的应用。方法:选取2019年9月-2021年3月在粤北人民医院创伤骨科行加速康复外科理念下老年粗隆间骨折围手术期患者150例。分别采用自制量表和营养风险筛查评分简表(NRS 2002)、围手术期营养筛查工具(PONS)对老年股骨粗隆间骨折患者进行围手术期营养评估。根据患者术后预后分组,对比不同营养评估方法对患者术后疗效的评估效能。结果:截至术后第6个月,共有18例患者发生不同程度并发症,其中以低白蛋白血症的比例最高,占8.67%(13/150)。此外,还有坠积性肺炎3例,尿路感染2例。无死亡病例。以量表测评分值作为自变量,患者预后结局作为因变量,绘制ROC曲线,结果发现,自制量表的约登指数为0.569,高于NRS 2002量表的0.420和PONS量表的0.357。结论:基于加速康复外科理念下自制围手术期营养评估量表应用于老年股骨粗隆间骨折患者,由于纳入特征性的骨质疏松诊断标准,更适合临床上对老年股骨粗隆间骨折患者的营养状况筛查,实现了快速识别和评定潜在的营养风险,对这类患者的预后的评价效能高于传统NRS 2002、PONS等量表。

超高效液相色谱-串联质谱法测定化妆品中38种抗感染药

建立了同时测定2种不同基质类型化妆品中非法添加38种抗感染禁用药的超高效液相色谱-串联质谱方法。样品经溶剂提取后,采用Waters Acquity BEH C;(50 mm×2.1 mm,1.7μm)色谱柱,流动相A为0.1%乙酸铵缓冲液(pH=4.0),流动相B为0.1%甲酸甲醇,梯度洗脱;使用三重四极杆质谱多反应监测模式(MRM)检测,以保留时间和相对离子丰度定性,外标法定量。结果表明,氯霉素在质量浓度100~1 000μg/L范围内,其余37种抗感染药在质量浓度15~150μg/L范围内均呈现良好的线性关系,相关系数均大于0.99;方法检出限和定量限分别为0.3~240.4μg/kg和1.1~801.2μg/kg。3个不同浓度加标水平下,38种抗感染化合物的加标回收率为79.0%~119.8%,相对标准偏差为0.3%~9.7%(n=6)。该方法准确、灵敏、快速,适用于水剂和膏霜化妆品中38种抗感染药的同时测定。

基于UPLC指纹图谱结合化学计量学的小儿咳喘灵颗粒质量评价

目的建立UPLC指纹图谱结合化学计量学的小儿咳喘灵颗粒质量评价方法。方法采用UPLC法,以乙腈-0.1%磷酸水溶液为流动相,梯度洗脱,建立36批小儿咳喘灵颗粒的指纹图谱,并利用对照品对其特征峰进行指认;同时采用Chempattern化学计量学软件结合主成分分析(PCA)、聚类分析(CA)对数据进行处理,对不同厂家生产的小儿咳喘灵颗粒进行质量评价。结果建立的小儿咳喘灵颗粒的UPLC指纹图谱有18个共有峰,并指认了8个成分((R,S)-告依春、绿原酸、隐绿原酸、木樨草苷、甘草苷、异绿原酸A、异绿原酸C、甘草酸);36批样品与对照指纹图谱的相似度均高于0.88;不同厂家及批次的小儿咳喘灵颗粒存在较大的差异。结论所建立的指纹图谱能为小儿咳喘灵颗粒的质量控制提供更全面的参考。

一测多评法测定小儿消积止咳口服液中3种黄酮类成分

目的建立以柚皮苷为内标的一测多评方法,用以验证该方法在小儿消积止咳口服液质量评价中的准确性及可行性。方法以柚皮苷为内标,分别建立柚皮苷与橙皮苷、新橙皮苷的相对较正因子,计算小儿消积止咳口服液中橙皮苷、新橙皮苷的量,实现一测多评。同时采用外标法测定小儿消积止咳口服液中3种黄酮类成分的量,并比较计算值与实测值的差异,以验证一测多评法在测定中的科学性及可行性。结果各相对校正因子重复性良好,一测多评法测定结果与外标法测定结果无显著性差异。结论以柚皮苷为内标同时测定橙皮苷、新橙皮苷的一测多评法可用于小儿消积止咳口服液的定量分析。

HPLC法测定养血调经合剂中芍药苷的含量

目的建立养血调经合剂中芍药苷的高效液相色谱含量测定方法。方法采用Inertsil C18色谱柱(4.6mm×250mm,5.0μm),以乙腈-0.1%磷酸溶液(15∶85)为流动相,流速为1.0m L·min-1,检测波长为230nm。结果芍药苷浓度在0.629~62.949μg·m L-1范围内呈良好的线性关系(r=1.0000);加样回收率平均98.16%,RSD为0.56%(n=9)。结论该方法操作易行,快速准确,可用于养血调经合剂中芍药苷的含量测定。

UPLC法同时测定小儿咳喘灵颗粒中5种成分

目的建立UPLC法同时测定小儿咳喘灵颗粒(金银花、麻黄、板蓝根等)中5种成分的含有量。方法该药物50%甲醇提取液的分析采用Waters Acquity UPLC HSS T3色谱柱(2.1 mm×100 mm,1.8μm);流动相乙腈-0.1%磷酸,梯度洗脱;体积流量0.3 mL/min;检测波长207、237 nm;柱温35℃。结果(R,S)-告依春、绿原酸、甘草苷、甘草酸、苦杏仁苷分别在2.1660~108.3000、1.9999~99.9951、2.0259~101.2928、1.8475~92.3756、2.1405~107.0260μg/mL范围内线性关系良好(r=1.0000),平均加样回收率分别为97.94%、98.29%、102.03%、100.69%、99.78%,RSD分别为0.97%、1.09%、1.64%、1.09%、1.83%。结论该方法简便准确,重复性好,可用于小儿咳喘灵颗粒的质量控制。

UPLC-MS/MS法检测中成药及保健品中非法添加降糖及降脂类化学药物

目的:建立超高效液相色谱-串联质谱法(UPLC-MS/MS)同时检测中成药及保健品中非法添加的降糖及降脂类化学成分。方法:样品经甲醇超声处理后,采用Waters Acquity BEH-C18(2.1 mm×100 mm,1.7μm)色谱柱分离,以0.1%甲酸水溶液和乙腈作为流动相进行梯度洗脱,流速为0.3 ml·min-1;采用三重四极杆串联质谱(QQQ)作为检测器,电喷雾离子源(ESI),正负离子模式、多反应监测(MRM)模式检测14种降糖降脂类药物,以保留时间、碎片离子比对和峰面积进行定性定量分析。结果:14种降糖、降脂类药物在0.1~500 ng·ml-1范围内呈良好的线性关系,相关系数均大于0.996,检出限为0.000 2~3.940 6ng·ml-1,3个浓度水平回收率均在80%~120%之间。结论:本实验方法准确、灵敏、高效、便捷,可用于降糖、降脂类中成药及保健品中非法添加药物的定性及定量检测。

基于多成分测定的小儿咳喘灵口服液的质量评价

目的建立UPLC测定方法对市售小儿咳喘灵口服液的整体质量进行评估,以期完善小儿咳喘灵口服液质量标准。方法采用Waters Acquity UPLC色谱仪,选用Waters HSS T3(2.1 mm×100 mm,1.8μm)色谱柱,以乙腈-0.1%磷酸水溶液为流动相进行梯度洗脱,流速0.3 mL·min-1,检测波长237 nm[(R,S)-告依春、绿原酸、甘草苷和甘草酸]、207 nm(苦杏仁苷),柱温35℃。对来源于不同厂家的59批小儿咳喘灵口服液进行含量测定,并对质量特征进行统计学分析。结果5个主要成分在59批小儿咳喘灵口服液中均可检出,但含量差异较大。单因素方差分析结果显示,厂家3、4与其他厂家之间5种成分差异均具有统计学意义(P<0.05);差异主要集中在苦杏仁苷和甘草苷2个成分上。结论增加小儿咳喘灵口服液控制指标对于规范药品生产、提高药品品质具有重大意义。

黄蛭益肾胶囊质量标准的提升

目的:提升黄蛭益肾胶囊的质量标准。方法:采用薄层色谱(TLC)法对黄蛭益肾胶囊中的枸杞子、牛膝和车前子进行定性鉴别;采用HPLC-DAD法同时测定毛蕊异黄酮葡糖苷、刺芒柄花苷、毛蕊异黄酮、芒柄花黄素的含量,采用HPLC-ELSD法测定黄芪甲苷的含量。结果:枸杞子、牛膝和车前子的薄层斑点清晰,分离良好,阴性无干扰。毛蕊异黄酮葡萄糖苷、刺芒柄花苷、毛蕊异黄酮、芒柄花素、黄芪甲苷分别在1.03~20.52μg·ml^(-1),0.89~17.72μg·ml^(-1),1.51~30.24μg·ml^(-1),1.03~20.62μg·ml^(-1),67.62~563.52μg·ml^(-1)(r=0.9996~1.0000)浓度范围内线性关系良好;平均加样回收率分别为93.4%,93.0%,100.7%,91.4%,99.5%,RSD分别1.53%,1.73%,1.46%,1.23%,1.85%(n=6)。结论:建立的TLC法专属性强、灵敏度高,HPLC法简便可行,结果准确、可靠,重复性、稳定性好,可用于黄蛭益肾胶囊的质量控制。

一测多评法测定黄蜀葵花中7个黄酮类成分

目的：建立以金丝桃苷为内标的一测多评法，用以评价黄蜀葵花药材质量的方法。方法：采用ACQUITY UPLC BEH C18色谱柱（2.1 mm×100 mm，1.7 μm），0.05%甲酸水溶液（A）-乙腈（B）为流动相，流速为0.40 mL·min-1，梯度洗脱（0~2 min，88%A→85%A；2~5 min，85%A→84%A；5~6 min，84%A→83%A；6~9 min，83%A→70%A；9~11 min，70%A→20%A；11~12 min，20%A→5%A；12~13 min，5%A→88%A），检测波长360 nm，柱温35 ℃，建立金丝桃苷与其他6个指标成分（芦丁、异槲皮苷、 棉皮素-8-O-葡萄糖醛酸苷、杨梅素、槲皮素-3’-O-葡萄糖苷、槲皮素）间的相对校正因子（RCF），并利用校正因子计算黄蜀葵花中7个主要黄酮成分含量，实现一测多评。结果：在一定的线性范围内，金丝桃苷与芦丁、异槲皮苷、棉皮素-8-O-葡萄糖醛酸苷、杨梅素、槲皮素-3’-O-葡萄糖苷、槲皮素间的RCF值分别为0.827、1.312、0.494、0.989、1.608、1.516，且在不同实验条件下重现性良好（RSD〈5.0%），并与常规外标一点法比较，13批黄蜀葵花药材中7个黄酮成分一测多评法计算值与实测值间均无显著性差异（RSD〈5%）。结论：以金丝桃苷建立的6个黄酮成分校正因子可用于黄蜀葵花药材的定量分析及质量评价。

大鼠灌胃四逆散提取物后血浆、尿液、粪便、胆汁中主要代谢产物的鉴定

采用UPLC-Q-TOF/MS研究四逆散提取物在大鼠体内的代谢产物,利用碰撞能量梯度(MSE)和质量亏损过滤(MDF)技术进行分析,鉴定大鼠灌胃四逆散提取物后血浆、尿液、粪便、胆汁中的代谢产物。四逆散提取物中柚皮苷、柚皮素、橙皮苷、新橙皮苷、甘草苷、甘草素、甘草酸、甘草次酸、柴胡皂苷a、柴胡皂苷d在大鼠不同代谢途径中推测出原形、羟基化、葡糖醛酸化、硫酸化、葡糖醛酸化与硫酸化结合、羟化葡糖醛酸化等共41个代谢产物。

氰戊菊酯通过干扰雌激素作用引起小鼠海马神经细胞损伤

目的 探讨氰戊菊酯（fenvalerate,FEN）能否通过干扰雌激素（E2）的作用引起小鼠海马神经细胞损伤.方法 取孕18d的ICR小鼠胚胎海马细胞原代培养,建立小鼠海马神经元和星形胶质细胞的混合培养模型.以氰戊菊酯（FEN,0、1、10、50 μg/ml）,FEN（0、10、50 μg/ml）联合雌激素受体抑制剂（ICI 182,780,1μmol/L）,FEN（0、10、50 μg/ml）联合E2（10 nmol/L）对体外培养7d后的细胞染毒48 h.采用免疫荧光细胞化学方法检测神经元和星形胶质细胞的相对数量,测量神经元的突起长度.结果 1 μg/ml FEN组混合培养的小鼠海马神经元数量、神经突起和原浆型星形胶质细胞均无明显改变,10和50μg/ml FEN组海马神经元数目减少,突起长度缩短,原浆型星形胶质细胞比例增加,与对照组比较,差异有统计学意义（P＜0.05）.ICI 182,780单独作用组神经元数量、突起长度和原浆型星形胶质细胞均无明显改变.ICI＋ 10 μg/ml FEN组海马神经元数目增加,突起长度延长,原浆型星形胶质细胞比例减少,与10 μg/ml FEN单独作用组比较,差异有统计学意义（P＜0.05）; ICI＋50 μg/ml FEN组海马神经元数目增加,原浆型星形胶质细胞比例减少,与50 μg/ml FEN单独作用组比较,差异有统计学意义（P＜0.05）.E2单独组神经元数目增加,神经突起长度延长,与对照组比较,差异有统计学意义（P＜0.05）;E2＋10 μg/ml FEN组和E2＋ 50μg/ml FEN组神经元数目减少,突起长度缩短,原浆型星形胶质细胞比例增加,与E2单独作用组比较,差异有统计学意义（P＜0.05）.结论 FEN可通过干扰E2的经典核受体信号通路引起混合培养的海马神经元丢失,可通过干扰E2的经典核受体信号和膜受体通路抑制神经突起生长,FEN对E2的干扰效应在其神经发育毒性中起重要作用.

二甲基甲酰胺对心肌细胞的毒性作用

目的探讨二甲基甲酰胺(dimethylformamide,DMF)对正常心肌细胞(H9C2)的细胞毒性作用。方法采用CCK-8法检测不同浓度梯度(0 mmol/L,50 mmol/L,100 mmol/L,150 mmol/L,200 mmol/L,250 mmol/L,300 mmol/L)DMF作用心肌细胞24 h、48 h、72 h后的细胞毒性,并用Annexin V-FITC/PI流式细胞术检测不同时间(24 h、48 h、72 h)和浓度(24 h的染毒剂量为0 mmol/L,100 mmol/L,140 mmol/L,180 mmol/L,220 mmol/L,250 mmol/L;48 h的染毒剂量为0 mmol/L,100 mmol/L,140 mmol/L,180 mmol/L,200 mmol/L,220 mmol/L;72 h的染毒剂量为0 mmol/L,100 mmol/L,125 mmol/L,140 mmol/L,180 mmol/L,200 mmol/L)的细胞凋亡率。结果不同浓度DMF作用于心肌细胞24 h,48 h和72 h后产生了明显的细胞毒性。同一染毒时间组内,不同剂量组的细胞存活率差异有统计学意义(均有P<0.05);同一染毒剂量组内,各不同染毒时间组的细胞存活率差异均有统计学意义(均有P<0.05)。用CCK-8法检测DMF作用于心肌细胞的24 h IC50是250 mmol/L,48 h IC50是220 mmol/L,72 h IC50是200 mmol/L。细胞凋亡趋势与其对细胞的毒性作用结果一致。结论与阴性组比较,DMF对心肌细胞产生了细胞损伤,具有细胞毒性。

氰戊菊酯通过干扰雌激素作用致神经发育毒性

目的 探讨雌激素干扰特性在氰戊菊酯神经发育毒性中的作用.方法 4周龄健康雌性ICR小鼠30只,随机分为6组：假手术组、假手术给予氰戊菊酯（5μg/g）处理组、卵巢切除后对照组、卵巢切除后给予雌激素（E2,10μg/g）处理组、卵巢切除后给予氰戊菊酯处理组、卵巢切除后给予雌激素和氰戊菊酯处理组,每组5只,腹腔注射给药,每天1次,连续7d,末次染毒24 h后分离海马.用免疫荧光组织化学技术检测海马CA1、CA3和DG区神经元标志物（NeuN）和星形胶质细胞标志物（GFAP）.结果 与假手术组[CA1（54.00±1.73）、CA3（59.00±1.73）、DG（100.00±4.58）]比较,假手术给予氰戊菊酯处理组[CA1（37.67±2.08）、CA3（41.33±1.15）、DG（80.67±0.58）]和卵巢切除后对照组[CA1（44.00±3.00）、CA3（51.00±3.00）、DG（83.00±1.72）]海马各区神经元（NeuN阳性）细胞数均明显减少,差异有统计学意义（P＜0.05）.与卵巢切除后对照组比较,卵巢切除后给予氰戊菊酯处理组海马各分区NeuN阳性细胞数无明显改变.与卵巢切除后给予氰戊菊酯处理组[CA1 （47.67±3.21）、DG（87.33±4.04）]比较,假手术后给予氰戊菊酯处理和卵巢切除后给予雌激素和氰戊菊酯处理[CA1 （40.00±1.00）、DG（78.67±2.31）]NeuN阳性细胞数均明显减少,差异有统计学意义（P＜0.05）.与假手术组[CA3（11.00±1.12）、DG（10.67±1.15）]比较,假手术后给予氰戊菊酯处理组[CA3（18.67±2.07）、DG（16.33±1.53）]星形胶质细胞（GFAP阳性）细胞明显增加,差异有统计学意义（P＜0.05）.与假手术后给予氰戊菊酯处理组比较,卵巢切除后给予氰戊菊酯处理组[CA3（12.00±1.00）、DG（11.68±1.16）]GFAP阳性细胞明显减少,差异有统计学意义（P＜0.05）.与卵巢切除后给予氰戊菊酯处理组比较,假手术后给予氰戊菊酯处理组和卵巢切除后给予雌激素和氰戊菊酯处理组[CA3（16.67±2.13）、DG（15.38±1.42）] GFAP阳性细胞数明显增加,差异有统计学意义（P＜0.05）.结论 氰戊菊酯干扰循环雌激素作用是其发挥神经发育毒性的重要作用机制.