诊断超声与超声治疗仪联合载阿霉素超声纳米泡作用于鼻咽癌细胞的体外实验研究

目的:制备载阿霉素超声纳米泡(Dox-NBs),评价其基本特性并对比Dox-NBs联合诊断超声(DUS)与超声治疗仪(TUS)作用于鼻咽癌细胞的体外实验研究。方法:通过薄膜水化法、机械振荡法制备Dox-NBs并检测其基本物理特性、载药量及包封率;体外药物释放实验分为Dox-NBs组、Dox-NBs+DUS组、Dox-NBs+TUS组3组,利用多功能酶标仪检测Dox累积释放量;培养鼻咽癌5-8F细胞,按照不同的处理方法分为4组:对照组、Dox-NBs组、Dox-NBs+DUS组、Dox-NBs+TUS组,各组处理3 h后完全培养基培养3 d,细胞计数试剂盒(CCK-8)法检测各组细胞活性。结果:Dox-NBs的平均粒径为(286.93±14.45)nm,Zeta电位(-13.3±2.17)mV,平均载药量(37.0±3.34)μg/mg,包封率(36.30±1.92)%;体外药物释放结果显示,Dox-NBs+DUS组与Dox-NBs+TUS组分别在2 h与24 h Dox的累积释放量比较,差异均有统计学意义(P<0.05);CCK-8检测细胞活性显示,Dox-NBs组的细胞存活率高于Dox-NBs+DUS组与Dox-NBs+TUS组(P<0.01),Dox-NBs+DUS组的细胞存活率最低,Dox-NBs+DUS组对鼻咽癌细胞活性抑制作用最大。结论:Dox-NBs联合辐照可以提高药物释放量及协同抑制鼻咽癌细胞活性,DUS联合Dox-NBs作用效果优于TUS联合Dox-NBs,DUS可作为更普及、简便工具介导载药纳米泡的药物释放。

载阿霉素超声纳米泡的制备及其特性研究

目的制备载阿霉素超声纳米泡(doxorubicin-loaded nanobubbles,Dox-NBs)并观察其理化特性。方法通过薄膜水化法及机械振荡法制备空白超声纳米泡(nanobubbles,NBs)和Dox-NBs。以空白NBs组为对照组,Dox-NBs为实验组,采用纳米粒度电位仪检测比较两组的粒径、Zeta电位,采用光学显微镜、血球计数板检测Dox-NBs形态及浓度,酶标仪检测阿霉素的载药量与包封率,观察Dox-NBs组与Dox-NBs联合超声治疗仪组的体外药物释放率,并在超声下观察其体外显影情况。结果Dox-NBs组与空白NBs组的平均粒径分别为(286.93±14.45)nm、(119.20±16.89)nm,两者差异有统计学意义(P<0.01),Zeta电位分别为(-13.30±2.17)mV、(-11.07±1.33)mV,两者差异无统计学意义(P=0.056>0.05)。Dox-NBs大小、形态均匀,无聚集,浓度(3.17±2.37)×10^(8)个/毫升。阿霉素平均载药量为(45.85±2.17)μg/mg,包封率为(42.40±4.62)%,Dox-NBs组与Dox-NBs联合超声治疗仪组所有时间点的阿霉素体外累计释放量差异均具有统计学意义(P<0.05)。前24 h阿霉素累计释放量:Dox-NBs组为(48.05±4.88)%,Dox-NBs联合超声治疗仪组为(72.20±0.85)%,Dox-NBs联合超声治疗仪组在时长为5 h时药物释放达50%以上,Dox-NBs组时长为5 h药物释放仅为25%左右,经24 h释放至50%左右,前3 h Dox-NBs组药物释放曲线较联合超声辐射组平缓。体外超声显影结果可见点状均匀强回声。结论本实验成功制备了性质稳定的载阿霉素超声纳米泡,体外超声显影效果良好,为今后载药超声纳米泡进行体内肿瘤显像与治疗研究提供了实验依据。