自噬参与氧化性低密度脂蛋白诱导的血管平滑肌细胞钙化

【目的】观察细胞自噬是否参与了氧化型低密度脂蛋白(Ox-LDL)诱导的血管平滑肌细胞钙化。【方法】采用体外血管平滑肌细胞钙化模型,实验分为3组:control组:用nativeLDL处理细胞;Ox-LDL组:用Ox-LDL处理细胞;3MA组:用Ox-LDL和3MA处理细胞;细胞培养液为DMEM+10mMBGP。分别以茜素红检测血管钙化,Q-PCR和Westernblotting测定cbfa1和Beclin1的mRNA和蛋白表达。【结果】Ox-LDL加速血管平滑肌细胞钙化,上调cbfa1和Beclin1的表达;细胞自噬特异性抑制剂3MA减弱细胞钙化,下调cbfa1和Beclin1的表达。【结论】Ox-LDL诱导的血管平滑肌细胞钙化与细胞自噬有关。

Biglycan对地塞米松诱导血管平滑肌细胞钙化的作用

【目的】初步探讨地塞米松导致VSMCs钙化的分子机制。【方法】用地塞米松(Dex)诱导血管平滑肌细胞(VSMCs),检测其双链蛋白聚糖(BGN)的表达。并通过10-8mol/LDex诱导BGN重组腺病毒Ad/BGN感染的VSMCs,分别检测VSMCs钙化程度,BGN、osteocalcin、cbfa1、骨形态生成蛋白4(BMP4)的表达。实验分4组(n=3):Ad/Bgl-BGP组:用空载体Ad/Bgl感染细胞;Ad/BGN-BGP组:用Ad/BGN感染细胞;Ad/Bgl-Dex组:用Dex诱导Ad/Bgl感染的VSMC;Ad/BGN-Dex组:用Dex诱导Ad/BGN感染的VSMCs。【结果】Ad/BGN转染后,VSMCs钙化增强,osteocalcin、cbfa1和BMP4蛋白水平较之相应对照组表达明显增多(P<0.05),而Dex诱导组在转染Ad/BGN后osteocalcin、cbfa1、BMP4蛋白表达更多。Dex诱导后,Ad/BGN转染的VSMCs,其BGN蛋白的表达量较未加Dex的相应对照组显著增加(P<0.05)。【结论】BGN能促进地塞米松诱导的血管平滑肌细胞钙化。

细胞死亡方式研究进展

传统的细胞死亡方式分类包括细胞坏死和细胞凋亡2种,后者又称为程序性细胞死亡,而新近的研究发现,除坏死和凋亡之外还存在其他细胞死亡方式,如自噬和胀亡,且凋亡只是程序性细胞死亡的形式之一。近年来国际上倾向于一种与传统分类方法不同的新的细胞死亡分类方式,即以程序性细胞死亡和非程序性细胞死亡代替传统的凋亡和坏死。

因材施教在病理生理学精品课程建设中的运用

病理生理学是联系基础和临床的一门重要桥梁学科。如何在有限的课时内高质量地完成教学任务是病生教师的工作重点。中山大学病理生理学教研室针对学科特点,因材施教,于2010年成功获得国家级精品课程的称号,文章旨在总结并与同行分享交流教研室在学科精品课程建设中的部分经验。

民族院校医学教育常见问题及对策探讨

相对于普通高等医学院校,民族医学院校有其自身的特殊性。如学生水平参差不齐,各民族文化背景差异很大和贫困学生较多等。针对当前民族院校医学教育中存在的这些常见问题,学校和教师宜采取积极主动的措施,因材施教,适当增加民族医学内容以增强与学生的互动,加强对学生学习方法的引导,关注少数民族学生尤其是贫困生的心理健康,从而达到良好的教学效果。

病理生理学教学中特殊群体学生的常见问题及对策探讨

随着多民族文化交流的深入与中国国际地位的提高,医学院中少数民族学生和外国留学生的比例逐年升高。因此教师需要在原本针对汉族学生群体特点设计的教学模式上改革教学方法,以兼顾不同来源的学生的特点,达到更好的群体教学效果。

四逆汤对大鼠局灶性脑缺血后bax、bcl-2表达的影响

目的:研究四逆汤对大鼠局部脑缺血后bax、bcl- 2表达的影响。方法:采用大鼠大脑中动脉局部阻塞(MCAO)模型,观察四逆汤对脑缺血大鼠的神经功能、丙二醛(MDA)和神经酰胺含量、超氧化物歧化酶(SOD)活性以及bax、bcl- 2表达的影响。结果:四逆汤组脑含水量、MDA含量、神经酰胺含量、bax基因在转录和翻译水平的表达明显低于缺血模型组(P <0 . 0 5和P <0 . 0 1) ,神经功能评分、SOD活性、Bcl - 2蛋白的表达高于缺血模型组(P <0 . 0 5和P <0 .0 1)。结论:四逆汤对局部脑缺血大鼠具有显著的保护作用,其作用机制可能与四逆汤能对抗脑缺血引起的氧化损伤,减少神经酰胺的生成量,抑制baxmRNA的转录及其蛋白的表达、增加Bcl- 2蛋白的表达有关。

高糖激活WNT信号通路促进血管平滑肌细胞钙化

目的探讨高糖导致血管钙化机制是否与WNT信号通路有关。方法采用体外血管钙化模型,高糖诱导血管平滑肌细胞钙化,检测WNT信号分子和骨相关蛋白Cbfa1,Osx,OCN,BMP2的表达以及细胞钙化程度。观察WNT信号抑制剂Dkk1对高糖诱导的血管平滑肌细胞钙化和Cbfa1,Osx,OCN,BMP2表达的影响。结果高糖能上调血管平滑肌细胞WNT信号通路分子包括Wnt3a,Wnt7a,Fzd4,Wisp1 m RNA的表达(1.86±0.15,1.68±0.13,2.10±0.17,2.30±0.20,P<0.05),促进WNT信号通路关键分子β-catenin的磷酸化(2.70±0.22,P<0.05),激活WNT信号通路。使用WNT信号抑制剂Dkk1能减轻血管平滑肌细胞钙化,下调骨相关蛋白Cbfa1,Osx,OCN,BMP2 m RNA的表达[(51±9)%,(58±11)%,(56±10)%,(62±10)%,P<0.01)]。结论 WNT信号通路参与了高糖诱导的血管平滑肌细胞钙化。

附子多糖预防高胆固醇血症的作用及其对肝脏CYP7α-1表达的影响

目的:探讨附子多糖(FPS)预防高胆固醇血症的作用及其对肝脏胆固醇7α-羟化酶(CYP7α-1)表达的影响。方法:SPF级雄性Wistar大鼠50只,体重100 g,随机分为正常组(control)、高胆固醇组(HC)和HC+附子多糖(HC+FPS)低、中、高3个剂量组,每组10只,分别给予正常、高胆固醇及高胆固醇加附子多糖(224、448和896mg.kg-1.d-1)饮食,持续2周,检测各组的血脂水平;观察control组、HC组和HC+FPS(224 mg.kg-1.d-1)组大鼠的体重、进食量和粪便量的变化,实验结束后取3组大鼠的肝脏行HE染色;并检测3组大鼠肝脏羟甲基戊二酰辅酶A(HMG-CoA)还原酶mRNA水平、CYP7α-1 mRNA和蛋白水平以及粪便总胆汁酸含量等方面的改变。结果:附子多糖能显著抑制高胆固醇血症大鼠血清中总胆固醇(TC)和低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)的水平(P<0.05);HC+FPS组大鼠肝细胞脂肪变性较HC组轻微;real-time PCR和Western blotting结果显示附子多糖能显著上调高胆固醇大鼠肝脏CYP7α-1 mRNA水平和蛋白表达并明显降低HMG-CoA还原酶的mRNA水平(P<0.01);HC组大鼠粪便中胆汁酸的含量增多而HC+FPS组进一步增加(P<0.05)。结论:附子多糖具有明显的降血胆固醇作用,其机制与上调CYP7α-1 mRNA及蛋白水平和下调大鼠肝脏HMG-CoA还原酶mRNA水平有关。

辛伐他汀对局部脑缺血大鼠线粒体的抗氧化效应

目的:观察辛伐他汀对局部脑缺血损伤大鼠的神经保护作用及其线粒体机制。方法:实验于2005-03/08在广州医学院生理实验室进行。取72只SD雄性大鼠,随机分为正常对照组、缺血模型组、辛伐他汀组3组,每组24只。辛伐他汀组大鼠灌胃辛伐他汀20mg/kg,1次/d,连续7d,最后一次灌胃1h后缺血模型组和辛伐他汀组大鼠线栓法复制左侧脑缺血2h再灌注模型,正常对照组仅分离动脉,不缺血。观察各组大鼠术后24h神经功能评分(3～18分,评分越高越好)、脑含水量、脑梗死体积以及脑组织线粒体超氧化物歧化酶、丙二醛、NO和Na+-K+ATPase的改变。结果:经补充后72只大鼠进入结果分析。①神经功能评分:辛伐他汀组明显高于缺血模型组(15.87±0.83,14.25±0.71,P<0.01)。②脑含水量:辛伐他汀组明显低于缺血模型组[(79.56±1.14)%,(81.13±1.36)%,P<0.05]。③脑梗死体积:辛伐他汀组明显低于缺血模型组[(173.7±15.92),(239.94±22.01)mm3,P<0.01]。④脑组织线粒体超氧化物歧化酶和Na+-K+ATPase活性:辛伐他汀组明显高于缺血模型组(P<0.05)。⑤脑组织线粒体丙二醛和NO含量:辛伐他汀组明显低于缺血模型组(P<0.01)。结论:辛伐他汀可能通过抑制大脑中动脉阻断后引起的脑内线粒体脂质过氧化反应,减少自由基的生成,稳定线粒体功能,增加ATP的生成,从而对缺血脑组织产生保护作用。

醛固酮合酶基因多态性与高血压患者血压及RAAS激素水平的相关性研究

目的探讨醛固酮合酶(CYP11B2)基因-344C/T多态性与高血压患者血压及肾素-血管紧张素-醛固酮系统(RAAS)激素水平的相关性。方法用放射免疫法检测171例原发性高血压患者(92例男性,79女性)RAAS激素水平,包括血浆肾素活性(PRA)、血浆血管紧张素II(AT-II)和醛固酮(ALD)水平。用聚合酶链反应(PCR)和限制性酶切方法检测所有患者的CYP11B2基因-344C/T多态性,按CC、CT和TT三种基因型分组。分析其与高血压患者血压及RAAS激素水平的相关性。结果 CYP11B2基因-344C/T多态性与高血压患者血压及血浆PRA和AT-II水平无关,但与血浆ALD水平相关,TT和CT基因型者的血浆ALD水平要高于CC基因型者,其差异有统计学意义(0.66±0.36or0.61±0.35versus0.42±0.23nmol/L,P=0.036)。结论本研究显示,高血压患者的CYP11B2基因-344C/T多态性与血浆ALD水平相关,提示该多态性可能参与了高血压患者血浆ALD水平的调节。

聚焦前沿,交叉融通——病理生理学硕士研究生课程改革实践

中山医学院病理生理学教研室充分利用病理生理学的桥梁学科特点,通过聚焦前沿,独辟蹊径的教学设计和共性导向,交叉融通的教学内容,将硕士研究生的病理生理学学位课程打造为开发启迪学生科研思维的方法课,旨在通过有限的课堂教学时间让学生接受到学术思维、科研能力和研究方法的教育,提高分析和解决问题的能力,并实现基础和临床研究的有机融合。

四逆汤对局部脑缺血大鼠的保护作用及其神经酰胺机制

目的 :研究四逆汤对大鼠局部脑缺血后脑组织神经酰胺含量的影响。方法 :采用大鼠大脑中动脉局部阻塞模型 (MCAO) ,观察四逆汤对脑缺血大鼠丙二醛 (MDA)和神经酰胺含量、以及超氧化物歧化酶 (SOD)活性的影响。结果 :与正常组比较 ,缺血模型组MDA含量和脑组织神经酰胺含量均显著升高 ;与缺血模型组比较 ,四逆汤组能提高SOD的活性 ,减少MDA的产生 (P <0 0 5 ) ,降低神经酰胺含量 (P <0 0 0 1)。结论 :四逆汤能对局部脑缺血大鼠产生保护作用 ,其可能机制是减轻氧化损伤 。

BMP2参与Decorin诱导的血管平滑肌细胞钙化

【目的】阐明BMP2是否参与了Decorin诱导的血管平滑肌细胞(VSMC)钙化。【方法】本研究采用人血管平滑肌细胞钙化体外模型,用腺病毒载体过表达Decorin,检测骨相关蛋白BMP2、Msx2、Osterix的表达和细胞钙化程度。观察抑制或增加BMP2信号对Decorin诱导的血管平滑肌细胞钙化和Msx2、Osterix表达的影响。【结果】Decorin能促进人血管平滑肌细胞钙化,同时上调BMP2、Msx2、Osterix的表达水平。抑制BMP2能减轻Decorin诱导的细胞钙化,而增加BMP2加速Decorin诱导的细胞钙化。【结论】Decorin通过调节BMP2促进人血管平滑肌细胞钙化。

反相高效液相色谱法测定兔血清中5-氟尿嘧啶的浓度

目的应用反相高效液相色谱法测定兔血清中5-氟尿嘧啶的浓度。方法兔血清样品经乙酸乙酯/异丙醇(84/16)萃取后,水浴氮气吹干,流动相定容后进样。色谱柱为kromasil-C18柱(250mm×4.6mm,5μm),流动相为20mM醋酸铵/乙腈(体积比98.2∶1.8,pH8.05),流速0.8mL/min,紫外检测波长为270nm。结果5-氟尿嘧啶在5～80μg/L浓度范围内呈良好的线性关系。10、20、40μg/L三个浓度的批内RSD分别为11.6%、5.6%、5.4%;批间RSD分别为12.8%、2.7%、6.2%;平均回收率分别为106.7±11.7%、98.0±5.3%、99.3±5.3%。结论本方法可靠、重复性好,具有特异性强、灵敏、精密度与准确度高等特点,满足5-氟尿嘧啶药代动力学研究的要求。

心血管系统学科整合教学模式初探

传统的以学科为中心的教学模式与现阶段各大医学院校广泛试行的PBL教学法相比,各有其优缺点。南方医科大学和中山大学中山医学院合作,在传统教学模式的基础上,吸收借鉴PBL教学法的部分特色,在心血管领域开展学科整合教学模式的尝试与探索。

阿托伐他汀通过下调PAPP-A、MMP3 mRNA表达抑制rhCRP诱导的人动脉平滑肌细胞炎症反应

目的:探讨阿托伐他汀(ATO)对人重组C反应蛋白(rhCRP)诱导的人动脉平滑肌细胞炎症反应的影响及其机制是否与下调妊娠相关性血浆蛋白-A(PAPP-A)、基质金属蛋白酶3(MMP3)mRNA表达相关。方法:应用不同浓度rhCRP(1、5、10、20 mg/L)处理人动脉平滑肌细胞不同时间(3、6、12、24 h),采用ELISA法检测炎症因子IL-6、IL-8水平,以确定炎症模型建立条件。不同时相点加入10^(-7)mol/L ATO后,ELISA法再次检测IL-6、IL-8水平;RT-PCR法测定PAPP-A、MMP3 mRNA表达水平。结果:不同浓度rhCRP处理人动脉平滑肌细胞不同时间后,人动脉平滑肌细胞培养基中的IL-6、IL-8呈浓度依赖性和时间依赖性增加(P<0.05)。采用10 mg/L rhCRP处理12 h作为人动脉平滑肌细胞炎症模型建立的条件。ATO 10-7 mol/L预处理、共处理均能有效抑制rhCRP所致的IL-6、IL-8升高(P<0.05),同时也能抑制rhCRP所致的PAPP-A、MMP3 mR NA表达升高(P<0.05);而ATO后处理组IL-6、IL-8水平及PAPP-A、MMP3 mRNA表达水平与rhCRP模型组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论:AT0具有抑制出CRP诱导的人动脉平滑肌细胞炎症反应的作用,此作用可能与其下调PAPP-A、MMP3 mRNA表达有关。

FWA116基因在心衰动物模型心脏血管内皮的表达

建立亚急性和慢性心衰SD大鼠模型,用RNA-RNA原位杂交方法观察新基因FWA116在心脏组织的表达。以重组质粒FWA116/PGEM-T线性cDNA为模板,在T7耵或SP6RNA聚合酶作用下,体外合成地高辛(DIG)半抗原标记的FWA116cRNA探针。结果表明:与对照组相比,该基因在两种心衰大鼠心脏的中、小动脉内皮组织的mRNA表达均明显增高;与Northern blot及免疫组化的结果相一致,这提示DIG标记cRNA原位杂交方法的敏感和可靠。同时FWA116基因在心衰缺血缺氧心脏动脉内皮中的转录和翻译水平的高表达,说明该基因可能在心衰的病理过程中起到重要的作用。

骨形成蛋白Ⅱ型受体基因R491W突变导致家族性原发性肺动脉高压

目的 :验证骨形成蛋白Ⅱ型受体 (BMPR2 )基因突变是否能导致中国汉族人家族性原发性肺动脉高压 (PPH)。 方法 :对一个独立的家族性PPH家系和 1 0例散发患者及 1 0 0例正常人进行BMPR2基因突变扫描 ,外周血白细胞中提取基因组脱氧核糖核酸 (DNA) ,聚合酶链反应扩增BMPR2基因 1～ 1 3号外显子 ,自动测序仪检测突变。 结果 :此家系先证者BMPR2基因第 4 91密码子位置发生C→T转换 ,使精氨酸 (R)变为色氨酸 (W)。家系中另两例患者也携带此突变 ,而其他家系成员和散发病例以及正常人均未发现BMPR2基因 1～ 1 3号外显子的异常改变。 结论 :BMPR2基因R4 91W错义突变能导致家族性PPH ,这与国外研究结果一致。

暑期科研在培养医学本科生科研素质中的应用

目前我国医学院校本科生科研水平普遍较低,结合广州医学院提高本科生科研素质方面的实践,探讨了开展暑期科研活动的必要性和实施方法以及它对提高学生科研素质的效果和意义.