某品牌灵芝破壁孢子粉的安全性评价

目的研究某品牌灵芝破壁孢子粉的安全性。方法采用急性毒性试验、3项遗传毒性试验和30 d喂养试验评价灵芝破壁孢子粉的安全性。结果该品牌灵芝破壁孢子粉对小鼠急性经口MTD值>15000 mg/kg b.wt,属无毒级;3项遗传毒性试验均为阴性结果;30 d喂养期间,不同剂量的灵芝破壁孢子粉对大鼠的体重、食物利用率、主要脏体、血液学和血生化指标均产生显著影响(P值均<0.05);试验动物组织病理学均未见显著改变。结论试验条件下,该品牌灵芝破壁孢子粉的安全性良好。

酸性氧化电位水亚急性毒性研究

目的对酸性氧化电位水进行毒理学评价,探讨其安全性。方法6~8周龄健康SD大鼠48只,雌雄各半,随机分为4组,分别给予浓度为100、300、1000mg/kg b.wt.剂量酸性氧化电位水,设纯净水为对照组,采用灌胃方式每天经口染毒,连续给予28天,进行系统的亚急性毒性实验。结果实验期间各组动物生长发育良好,未观察到中毒表现;雌、雄各剂量组体重、脏体比均与对照组比较,差异均无统计学意义(P值均>0.05);雌、雄各剂量组大鼠血细胞检测值、生化指标检测值均在正常波动范围内。结论本次实验条件下未观察到酸性氧化电位水的明显亚急性毒性。

流式细胞术检测小鼠腹腔巨噬细胞吞噬能力的方法学探讨

目的：探讨利用流式细胞术检测小鼠腹腔巨噬细胞吞噬荧光微球能力试验方法的灵敏性、稳定性以及易操作性，以期获得一套最优化的方案。方法：取ICR小鼠腹腔巨噬细胞，以原液和1∶1稀释液使用，采用三个微球浓度（5×106/孔、1×107/孔和1.5×107/孔），经1 h、1.5 h和2 h孵育，通过酶消化或细胞刮刀法将贴壁细胞消化处理后，利用流式细胞仪检测含不同数量荧光微球的巨噬细胞数值，计算吞噬率及吞噬指数。为验证实验条件的可靠性，取ICR小鼠每日灌胃金葵素胶囊30 d后，取腹腔巨噬细胞分别用流式细胞术和传统鸡红细胞方法检测吞噬能力。结果：微球浓度越高，吞噬率和吞噬指数越大；细胞浓度为1×105～2×105 ml-1，孵育时间1.5 h，微球浓度为1.5×107/孔时吞噬率（PP）和吞噬指数（PI）最高（89.87％，1.54），孵育至2 h时出现下降（57.71％，1.51）；细胞浓度对吞噬率和吞噬指数的影响与荧光微球浓度呈负相关。贴壁巨噬细胞经胰酶加EDTA消化后PP为44.51％，PI为0.68，单独使用EDTA消化后PP为37.92％，PI为0.57，均低于使用细胞刮刀处理组。流式细胞术法与鸡红细胞法测定金葵素胶囊对小鼠腹腔巨噬细胞吞噬能力影响的结果一致，均为高剂量组吞噬率与对照组相比差异有统计学意义（P＜0.05）。结论：小鼠腹腔巨噬细胞浓度调整为1×105～2×105，孵育1 h，1×107/孔微球浓度可使实验快速而又精确地反映巨噬细胞的吞噬率和吞噬指数，且与传统方法结果有良好的一致性。

铁皮枫斗西洋参胶囊对小鼠免疫调节功能的影响

目的:探讨铁皮枫斗西洋参胶囊对小鼠免疫调节功能的影响。方法:选择低、中、高剂量的铁皮枫斗西洋参胶囊(58 mg/kg、117 mg/kg和350 mg/kg),采用免疫毒理学方法研究对小鼠免疫功能的调节作用。结果:每天补充中、高剂量的铁皮枫斗西洋参,30 d后小鼠的细胞免疫功能、体液免疫功能、单核—巨噬细胞吞噬功能和NK细胞活性明显增强(P<0.05,P<0.01)。结论:铁皮枫斗西洋参胶囊能增强小鼠的免疫调节功能。

三七多糖对小鼠免疫功能调节的研究

目的:研究三七多糖对小鼠免疫功能的调节作用。方法:实验分别以100、200、600mg/kg BW剂量的三七多糖给小鼠连续灌胃30 d,测定各项免疫指标。结果:三七多糖能促进小鼠的脾淋巴细胞增殖转化作用,促进小鼠的迟发性变态反应,提高小鼠的抗体生成细胞能力,增强小鼠的NK细胞活性作用。结论:三七多糖具有增强免疫功能的作用。

葛根提取物对小鼠酒精性肝损伤的辅助保护效果

目的探讨葛根提取物对酒精性肝损伤的辅助保护功能。方法将雄性SPF级ICR小鼠60只,随机分成3个剂量组(500、166.7、83.4mg/kg BW/d)和溶剂、模型对照组,共5组。剂量组经口灌胃给予葛根提取物,溶剂和模型对照组给予纯净水,灌胃量均为20ml/kg b.wt.。连续30d后。剂量组和模型对照组一次灌胃给予50%乙醇14ml/kg b.wt.,溶剂对照组给予纯净水进行造模。造模后禁食16h,进行丙二醛(MDA)、谷胱甘肽(GSH)、甘油三酯(TG)含量测定及组织病理学检查。结果各剂量组、模型对照组与溶剂对照组,灌胃前后小鼠初始体重、终末体重差异均无统计学意义(P值均>0.05)。与溶剂组相比:模型组小鼠肝匀浆中MDA、TG含量增高,GSH含量降低,肝细胞脂肪变性差异均有统计学意义(P值均<0.05),表明肝损伤模型建模成功。与模型组相比,样品各剂量组小鼠肝匀浆中MDA值差异均无统计学意义(F=1.320,P>0.05);高剂量组小鼠肝匀浆中GSH含量[(6.63±1.80)mg/g蛋白]升高(t=2.626,P<0.05);各剂量组肝损伤小鼠肝匀浆中TG含量[高、中、低剂量组分别为(12.1±3.1)、(12.3±4.4)、(12.6±2.6)μmol/g肝]均降低(P值均<0.05);低剂量组小鼠肝细胞脂肪变性程度与模型对照组差异有统计学意义(P<0.05)。结论试验条件下,葛根提取物对一次性大剂量摄入乙醇引起的小鼠肝损伤具有一定的辅助保护作用。

L-阿拉伯糖大鼠28 d重复剂量经口毒性研究

目的研究L-阿拉伯糖对大鼠的亚急性经口毒性。方法根据GB 15193.22—2014《食品安全国家标准28天经口毒性试验》,选取无特定病原体(specific pathogen free,SPF)级健康SD (Sprague-Dawley)大鼠,依体质量随机分成4组,将L-阿拉伯糖分别按照0.00、2.50、5.00、10.00 g/kg掺入基础饲料,连续饲喂28d,同时加设对照组和高剂量组2个卫星组,恢复期为14 d。主试验和恢复期结束时,称量空腹体质量和主要脏器湿重,采集血样,进行血液学、血清生化和组织病理学检测。结果与对照组相比,L-阿拉伯糖可有效降低雌、雄大鼠的摄食量和体质量,且正常饮食后可恢复正常;未见L-阿拉伯糖对大鼠一般状况、眼、食物利用率、尿常规、血液学、血生化、脏器湿重、脏器系数、大体解剖及组织病理学产生有毒理学意义的影响。结论在本研究条件下,L-阿拉伯糖对雌、雄大鼠28 d经口毒性无可见有害作用剂量(no observed adverse effect level,NOAEL)值分别为13.67和13.92 g/kg(分别相当于15 g/d推荐摄入量的55和56倍)。

低剂量辐射小鼠骨髓细胞凋亡率的变化

目的：探讨低剂量射线暴露小鼠骨髓细胞凋亡率的变化及意义.方法：以Co60射线照射ICR小鼠,制备不同时间段的骨髓单个核细胞的单细胞悬液,用PI/FITC-Annexin V双染法,通过流式细胞仪检测样品的凋亡率.结果：骨髓单个核细胞早期凋亡率于照射后6 h明显增高;晚期凋亡率随辐射剂量增大而增高.白细胞计数及骨髓细胞微核率于24～30 h与对照组比较差异有显著性（P＜0.05, P＜0.01）.结论：小鼠骨髓细胞凋亡率的变化可及时反映射线对小鼠骨髓细胞的影响.细胞凋亡率检测可能成为低剂量射线接触人群的早期监控指标.

驼奶对急性酒精肝损伤的辅助保护作用

目的探讨驼奶对小鼠急性酒精性肝损伤的辅助保护作用。方法60只雄性ICR小鼠随机分为5组,即500、1 000、3 000mg/kg b.wt.等3个剂量组、模型对照组和空白对照组。剂量组分别经口给予相应剂量的驼奶水溶液,模型对照组和空白对照组给予纯净水。连续灌胃30d后,空白对照组继续给予纯净水,其余各组于实验结束时1次给予50%的乙醇(14mL/kg b.wt.)灌胃,禁食16h,以建立小鼠急性肝损伤模型,分别检测各组肝匀浆中甘油三酯(TG)、还原型谷胱甘肽(GSH)、丙二醛(MDA)和血清中极低密度脂蛋白(VLDL)的含量,观察肝脏病变情况并比较。结果灌胃30d后,各剂量组与对照组小鼠体重差异均无统计学意义(P>0.05);模型对照组肝匀浆MDA和TG含量高于空白对照组,肝匀浆GSH和血清中的VLDL含量低于空白对照组(P值均<0.01),急性酒精肝损伤模型成功建立。各剂量组小鼠肝匀浆中MDA含量低于模型对照组,GSH含量高于模型对照组,其中500、1 000mg/kg b.wt.剂量组小鼠肝匀浆MDA、GSH含量,与模型对照组差异均有统计学意义(P值均<0.05);各剂量组小鼠肝匀浆中TG含量低于模型组,差异均有统计学意义(P值均<0.01);各剂量组血清VLDL含量高于模型对照组,3 000mg/kg b.wt.剂量组与模型对照组差异有统计学意义(P<0.05)。与模型对照组相比,各剂量组小鼠肝细胞脂肪变性不同程度减轻,其中1 000mg/kg b.wt.剂量组病变程度与模型对照组差异有统计学意义(P<0.05)。结论实验条件下,驼奶对小鼠急性酒精肝损伤有一定的辅助保护作用。

三七花苷毒理安全性研究

目的:通过毒理学测试三七花苷安全性,为三七花苷开发提供一定的实验依据。方法:小鼠经口急性毒性试验、鼠伤寒沙门氏菌/回复突变试验(Ames试验)、骨髓嗜多染红细胞微核试验、小鼠精子畸形试验、90d喂养试验。结果:经口急性毒性试验表明,LD50>15g/kg;Ames试验、小鼠骨髓嗜多染红细胞微核和小鼠精子畸形试验结果均为阴性;90d喂养试验中体重和食物利用率、血液学指标均无异常,生化指标在正常值范围内,未见大鼠器官组织病理学改变。结论:未见三七花苷具有毒性作用。

番茄红素片的安全性研究

目的为番茄红素片安全性评价提供毒理学依据。方法按卫生部《保健食品检验与评价技术规范》,进行急性毒性试验、骨髓细胞微核试验、睾丸染色体畸变试验、Ames试验、30d喂养试验。结果番茄红素片雌、雄小鼠经口最大耐受剂量(MTD)均>15 000mg/kg。Ames、小鼠骨髓微核和睾丸染色体试验未发现潜在致突变作用。30d喂养体重、增重、摄食量、食物利用率、肝、肾、脾、睾丸重量及各脏体比、血细胞、血生化和病理学指标与对照组比较均无统计学差异。结论本次实验条件下,番茄红素片属无毒级,未显示潜在遗传毒性,雌、雄大鼠30d喂养试验未观察到有害作用最大剂量(NOAEL)分别为1 960、1 832mg/(kg.d)。

葛根牛磺酸复合片对小鼠酒精性肝损伤的作用

目的了解葛根牛磺酸复合片对小鼠酒精性肝损伤的作用。方法将60只健康ICR小鼠,随机分为3个剂量组(250、500、1 500mg/kg)和溶剂组、模型组,3个剂量组按不同剂量给予葛根牛磺酸片,溶剂组和模型组给予纯净水,灌胃量均为20mL/kg b.wt.,连续30d后3个剂量组和模型组均一次灌胃给予50%乙醇14mL/kg b.wt.,禁食16h,进行组织病理学检查及丙二醛(MDA)、谷胱甘肽(GSH)、甘油三酯(TG)含量测定。结果与溶剂组相比,模型组小鼠含脂滴的肝细胞数量增加,肝匀浆中MDA含量升高,肝匀浆中TG含量增高,GSH活性降低(P<0.01),表明建模成功。与模型组比较,葛根牛磺酸复合片低、高剂量组小鼠肝细胞脂肪变性有不同程度减轻(P<0.05);高剂量组小鼠肝匀浆中MDA值降低(P<0.05);中、高剂量组小鼠肝匀浆中GSH含量均有增加(P<0.05);中、高剂量组小鼠肝匀浆中TG含量均有下降(P<0.01)。结论葛根牛磺酸复合片对酒精性肝损伤有一定的辅助保护功能。

血细胞分析仪的应用及相关问题探讨

在食品安全和化学品安全越来越受重视的今天,安全性评价也显得越来越重要。在相关评价指标中,血液学指标是一个不可或缺的重要内容。随着技术手段的不断发展,血细胞分析仪作为诊断和筛选的重要手段被越来越多的实验室所采用。

聚氨酯木器漆挥发物对小鼠的免疫毒性

小鼠暴露于聚氨酯木器漆挥发物,每天2 h,持续28 d后检测各项免疫功能指标。结果暴露组淋巴细胞转化率、迟发型变态反应、血清溶血素水平、抗体生成能力、腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞功能和NK细胞活性均明显低于对照组。提示在本实验浓度下聚氨酯木器漆挥发物暴露对机体免疫功能具有抑制作用;产生免疫毒性作用的最低浓度为61 mg/m3。

杨梅提取物缓解小鼠体力疲劳的作用

为研究杨梅提取物缓解体力疲劳作用,经口给予健康ICR小鼠0、85、170、510 mg/kg剂量的杨梅提取物32 d后,分别进行负重游泳试验、肝糖原测定、血乳酸测定和血清尿素氮测定。结果显示,高剂量组小鼠游泳时间比对照组极显著延长(P<0.01);高剂量组小鼠运动后血清尿素氮值极显著低于对照组(P<0.01);高剂量组小鼠肝糖原含量极显著高于对照组(P<0.01);中、高剂量组小鼠运动前后血乳酸变化值与对照组小鼠运动前后血乳酸变化值比较均具有显著性差异(P<0.01)。表明杨梅提取物在本试验条件下具有缓解体力疲劳作用。

荧光素漏出试验检测化妆品眼刺激性的初步验证

目的初步验证荧光素漏出试验(FLT)替代家兔眼刺激试验用于化妆品行政许可检验的可行性。方法用荧光素漏出试验对20份化妆品进行检测,以受试物处理后4h所引起荧光素漏出20%时受试物浓度(FL20H4)作为刺激分级标准,与《化妆品卫生规范》(2007年版)中家兔眼刺激试验分级标准进行相关性比较。结果 FLT能有效筛选出重度刺激物,FLT分级与规范要求做30s冲洗产品的家兔眼刺激试验分级有较好的一致性,两者间校正Spearman等级相关系数rs为0.694(P<0.05),Pearsonχ2值为16.343(P<0.01);对规范要求做4s冲洗的染发剂类产品,FLT法中仅20mg/mL FL20H4值与兔眼刺激试验结果有一定的相关性。结论荧光素漏出试验有望成为我国现行化妆品行政许可检验体外替代方法之一。

维康粉的安全性毒理学评价

目的对维康粉进行毒理学安全性评价。方法按《保健食品检验与评价技术规范》,以维康粉为受试物,进行急性毒性试验、小鼠骨髓细胞微核试验、小鼠睾丸染色体畸变试验、Ames试验、30d喂养试验。结果小鼠最大耐受剂量>15 000mg/kg,属无毒级。小鼠骨髓细胞微核试验、小鼠睾丸染色体畸变试验和Ames试验未见潜在致突变作用;以2 083、4167和8 333mg/kg喂养SD大鼠30d,各剂量组动物生长发育良好,体重、增重、进食量、食物利用率、血常规、血生化、脏器重量、脏/体比及组织病理学与对照组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论维康粉急性毒性属无毒级,未见明显潜在致突变作用,30d喂养未见明显毒性。

灵芝牛初乳复合胶囊增强小鼠免疫功能的研究

目的:探讨灵芝牛初乳复合胶囊对小鼠免疫功能的影响。方法:200只雌性ICR小鼠随机分为4组,即低、中、高剂量组和溶剂对照组,分别给予75mg/kg、150mg/kg、450mg/kg的灵芝牛初乳复合胶囊,溶剂对照组给予蒸馏水,连续灌胃30d后,分别检测以下指标,脏器/体重比值、24h足跖肿胀度、脾淋巴细胞增殖能力,溶血空斑数、半数溶血值,碳廓清能力、鸡红细胞吞噬率与吞噬指数及NK细胞活性。结果:灵芝牛初乳复合胶囊可增强DNFB引起的小鼠迟发性变态反应和小鼠淋巴细胞增殖能力,提高小鼠B细胞抗体生成和血清溶血素能力,还可增强小鼠NK细胞活性;各剂量组灵芝牛初乳复合胶囊对小鼠体重、免疫器官/体重比值、小鼠碳廓清能力和小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞能力均无明显影响(P>0.05)。结论:灵芝牛初乳复合胶囊对正常小鼠免疫功能具有明显增强作用。

氧化应激在PM_(2.5)诱导人支气管上皮细胞增殖中的作用

目的探讨不同质量浓度的大气颗粒物PM_(2.5)对人支气管上皮细胞(HBE)毒性和氧化应激的作用。方法用不同质量浓度(0、2.5、5、10、25、50、100、250、500mg/L)的PM_(2.5)处理HBE细胞,分别用八肽胆囊收缩素(CCK-8)检测细胞存活情况,用2’,7’-二氯荧光素二乙酸酯(DCFH-DA)探针检测细胞内活性氧(ROS)的水平;用活性氧抑制剂N-乙酰半胱氨酸(NAC)预处理HBE细胞后,观察PM_(2.5)所致HBE细胞相关指标的变化。结果以不同质量浓度的PM_(2.5)处理HBE细胞24h,25、50mg/L剂量组细胞存活率均高于对照组(P值均<0.05),500mg/L剂量组细胞存活率低于对照组(P<0.01)。与对照组相比,以不同质量浓度PM_(2.5)处理HBE细胞6h,细胞内ROS生成水平随着暴露浓度的增加而升高,呈明显的剂量效应关系(r2=0.792,P<0.01)。HBE细胞经3mmol/L NAC预处理和25mg/L PM_(2.5)处理后,细胞内ROS水平、细胞存活率均降低,差异均有统计学意义(P值均<0.05)。结论不同质量浓度的PM_(2.5)对HBE细胞增殖有双向刺激作用;PM_(2.5)可诱导HBE细胞内ROS增加,而适度的氧化应激可以促进HBE细胞增殖加快。

丹参酮ⅡA磺酸钠对环境细颗粒物诱导的大鼠肺部损伤的保护作用

目的:探讨丹参酮ⅡA磺酸钠(STS)对大气细颗粒物(PM_(2.5))诱导的大鼠肺部损伤的保护作用及可能机制。方法:24只清洁级雄性SD大鼠,随机分为4组,每组6只,分别为对照组(生理盐水)、PM_(2.5)染毒组(模型组)、丹参酮ⅡA磺酸钠组(STS组)、地塞米松组(阳性对照)。采用气管滴注PM_(2.5)悬液染毒,除对照组外,其余3组染毒剂量均为5.4 mg/kg,每3 d滴注1次,共10次,于染毒第1天起STS组和地塞米松组分别以浓度15 mg/kg和0.5 mg/kg腹腔注射,每天1次,持续28 d。末次染毒后24 h采用整体体积描记法(WBP)检测大鼠呼吸频率(f值)和被迫呼吸间隙(Penh);末次染毒后2 d,经腹主动脉采血2 mL,流式细胞术检测外周血淋巴细胞亚群;处死大鼠后灌洗左肺,收集肺泡灌洗液5 mL,ELISA法测定肺泡灌洗液中白细胞介素-1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和白细胞介素6(IL-6)含量;Western blot检测肺组织核因子κB(NF-κB)蛋白表达。结果:与对照组相比,模型组呼吸f值和Penh值均明显升高(P<0.01);CD4^(+)细胞百分率和CD4^(+)/CD8^(+)比值降低(P<0.05);肺泡灌洗液中IL-1β、TNF-α和IL-6浓度升高(P<0.01);肺细胞浆中P65含量降低而胞核中p-P65含量升高(P<0.01)。与模型组相比,STS组f值和Penh值均降低(P<0.05或P<0.01);CD4^(+)细胞百分率和CD4^(+)/CD8^(+)比值均升高(P<0.01或P<0.05);IL-1β、TNF-α、IL-6浓度降低(P<0.01或P<0.05);细胞浆中P65含量升高而胞核中p-P65含量降低(P<0.01)。结论:STS对PM_(2.5)诱导的大鼠肺部炎症有抑制作用,并具有调节肺功能和免疫功能的作用。