抗菌肽在糖尿病创面愈合中作用的研究进展

抗菌肽(AMPs)是存在于生物体内有抗菌活性的两亲性多肽。AMPs可通过参与调控创面的炎症反应,促进细胞增殖、迁移,促进新生血管生成及调控创面组织重塑等多种方式促进糖尿病创面愈合,现已逐渐成为创面愈合领域有广阔前景的一类药物。本文对AMPs的抗菌机制、促糖尿病创面愈合机制、基于创面愈合的AMPs优化设计进行综述,讨论开发有效的新型AMPs的未来前景。

小鼠Prune蛋白DHH结构域的原核表达及多克隆抗体的制备

[目的]表达、纯化小鼠Prune蛋白DHH结构域(m-Prune D),并制备多克隆抗体。[方法]生物信息学方法分析m-Prune D氨基酸序列;PCR扩增目的基因m-Prune D,克隆入原核表达载体p ET28a(+);IPTG诱导目的基因表达,SDS-PAGE和Western Blot鉴定蛋白表达,亲和层析法纯化蛋白;用纯化的重组m-Prune D免疫小鼠制备多克隆抗体;Western Blot检测多克隆抗体特异性。[结果]PCR成功扩增m-Prune D基因,双酶切及测序结果表明成功构建m-Prune D原核表达载体,SDS-PAGE和Western Blot鉴定表明成功表达约25 k Da的重组蛋白。纯化蛋白免疫小鼠后抗体滴度最高可达1∶25 600,所制备的多克隆抗体可特异性识别原核和真核细胞中DHH结构域蛋白。[结论]在E.coli中成功表达小鼠Prune蛋白DHH结构域,制备了多克隆抗体血清,可用于Prune蛋白生物学功能的进一步研究。