lncRNA717对胃癌细胞生物学行为的影响及调控机制研究

目的探讨长链非编码RNA(lncRNA)717对胃癌细胞增殖、转移等生物学行为的影响及其调控机制。方法收集2021年1至12月宁波大学附属第一医院手术切除或活检的31例胃癌组织及配对癌旁组织,以及胃癌细胞系AGS、HGC-27和人正常胃黏膜细胞系GES-1。采用qRT-PCR法检测lncRNA717在胃癌组织及癌旁组织、各细胞系中的表达水平。采用细胞增殖和毒性检测(CCK-8)法、Transwell法和划痕试验分别评估lncRNA717对细胞增殖、侵袭和迁移中的影响。采用荧光素酶报告基因测定、qRT-PCR法和Western blot法检测各组标本和细胞中lncRNA717、miR-762和干扰素调节因子(IRF)7表达水平。结果与癌旁组织相比,lncRNA717在胃癌组织中显著下调,与正常细胞相比,lncRNA717在胃癌细胞中显著下调。过表达lncRNA717抑制了胃癌细胞的增殖、迁移和侵袭。lncRNA717可以吸附miR-762,上调miR-762能抑制IRF7的表达,促进胃癌细胞的增殖、迁移和侵袭,而过表达lncRNA717后逆转了miR-762对细胞的增殖、迁移和侵袭的促进作用。结论lncRNA717可抑制胃癌细胞的增殖和转移,这可能与调控miR-762/IRF7有关。提示lncRNA717可作为胃癌的潜在生物标志物和治疗靶点。

丙氨酰-谷氨酰胺联合乌司他丁与生长抑素治疗急性重症胰腺炎临床疗效评价

目的观察并评估丙氨酰-谷氨酰胺联合乌司他丁与生长抑素治疗急性重症胰腺炎(SAP)的临床治疗效果。方法选取2014年1月~2016年6月期间宁波大学医学院附属医院收治的86例急性重症胰腺炎患者,依据随机数字表法分为研究组和对照组,每组各43例。对照组患者采用乌司他丁+生长抑素方案治疗,而研究组患者在此基础上加用丙氨酰-谷氨酰胺,静脉滴注0.4 g/kg,评估并比较两组患者的临床治疗效果。结果经治疗,研究组获得95.35%的临床总疗效,显著高于对照组的81.40%,差异具有统计学意义(P<0.05)。研究组患者腹痛缓解时间、肠功能恢复时间、血淀粉酶恢复正常时间及平均住院日均显著短于对照组;治疗后研究组患者血C反应蛋白(CRP)、白细胞介素-8(IL-8)及肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平均显著低于对照组。结论丙氨酰-谷氨酰胺联合乌司他丁与生长抑素是治疗急性重症胰腺炎的有效方法,可有效缓解临床症状,提高临床疗效,改善患者预后。

环状RNA hsa_circ_0067582对胃癌细胞增殖及侵袭能力的影响

目的探讨hsa_circ_0067582在胃癌细胞中的表达水平及其对细胞增殖和侵袭能力的影响,并研究hsa_circ_0067582在胃癌中的作用机制。方法hsa_circ_0067582过表达(Oe-circ_0067582)质粒分别转染人胃癌AGS和SGC-7901细胞,CCK-8检测细胞活力情况,细胞克隆形成实验及EdU实验检测细胞增殖;Transwell实验检测细胞侵袭能力;流式细胞术检测细胞凋亡;Western blot检测凋亡及上皮间质转换(EMT)相关蛋白的表达情况,并通过异种移植瘤实验观察Oe-circ_0067582对裸鼠体内SGC-7901细胞生长的影响。生物信息学方法预测hsa_circ_0067582结合的微小RNA(miRNA),并构建竞争性内源RNA(ceRNA)调控网络;对miRNA靶基因进行功能学分析。结果与pLO-ciR组相比,Oe-circ_0067582组的AGS和SGC-7901的细胞活力(t=7.883,P=0.001;t=5.679,P=0.005)、增殖(t=6.709,P=0.003;t=5.857,P=0.003)及侵袭能力(t=7.782,P=0.002;t=6.342,P=0.003)均明显降低,并诱导细胞凋亡(t=7.225,P=0.002;t=11.509,P=0.001)。Western blot结果显示,Oe-circ_0067582组的AGS和SGC-7901细胞半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶(Caspase)3(t=6.863,P=0.002;t=7.024,P=0.001)、Caspase 7(t=3.295,P=0.04;t=6.008,P=0.004)、Caspase 9(t=4.408,P=0.012;t=6.278,P=0.004)和E-钙黏蛋白(t=12.453,P=0.002;t=10.867,P=0.001)蛋白表达水平均明显升高,而波形蛋白(t=7.242,P=0.002;t=5.694,P=0.004)和N-钙黏蛋白(t=6.480,P=0.003;t=7.446,P=0.001)蛋白表达水平明显降低。Oe-circ_0067582抑制SGC-7901荷瘤裸鼠体内肿瘤的生长(t=3.526,P=0.017)。根据TargetScan及miRnada数据库获知hsa_circ_0067582可竞争性地结合hsa-miR-181b-3p、hsa-miR-337-3p、hsa-miR-421和hsa-miR-548d-3p。功能富集结果表明miRNA靶基因涉及癌症相关的多个生物学过程,包括细胞凋亡负调控、基因表达、癌症中的转录失调、转化生长因子-β、p53信号通路等。结论Oe-circ_0067582抑制胃癌AGS和SGC-7901细胞增殖,并可能通过减弱EMT进程降低胃癌细胞侵袭能力,为胃癌的预防及治疗提供了新的靶点。

胃液长链非编码RNA RMRP的检测及其临床价值分析

目的检测长链非编码RNA(lncRNA)线粒体RNA处理核糖核酸内切酶RNA组份(RMRP)在不同患者胃液中的水平及其变化规律,结合临床病理因素探讨胃液RMRP作为胃癌筛查标志物的临床价值。方法以胃液GAPDH为参照,采用qRT-PCR法检测并比较45例正常或轻度胃炎患者胃液、30例胃溃疡患者胃液、16例慢性萎缩性胃炎患者胃液和39例胃癌患者胃液中RMRP水平及其变化规律,结合临床病理因素探讨胃液RMRP水平与胃癌的相关性,构建ROC曲线确定胃液RMRP作为胃癌筛查标志物的灵敏度与特异度,通过联合检测胃液RMRP、血清癌胚抗原(CEA)和胃液CEA在早期胃癌和进展期胃癌中的阳性率探讨胃液RMRP的临床价值。结果相对于正常或轻度胃炎患者,胃溃疡患者胃液RMRP水平无明显变化(P>0.05),而慢性萎缩性胃炎患者胃液RMRP水平明显降低,胃癌患者胃液RMRP水平显著升高(均P<0.01)。胃癌患者胃液RMRP水平与患者年龄、幽门螺杆菌感染情况均有关(均P<0.05)。ROC曲线显示胃液RMRP的灵敏度和特异度分别为0.56和0.75。胃液RMRP联合血清或胃液CEA筛查胃癌的效果明显优于传统肿瘤标志物血清CEA水平(均P<0.05)。结论胃液lncRNA RMRP是潜在的胃癌筛查标志物,为临床诊治胃癌研究提供了新的思路。

重视幽门螺杆菌根除后胃癌的早期诊断

幽门螺杆菌(HP)是唯一被世界卫生组织列为Ⅰ类致癌物的细菌,HP感染可以引起胃黏膜炎症、萎缩、肠化生和异型增生并最终导致胃癌。大多数胃癌患者的HP检测呈阳性,未感染HP的早期胃癌(EGC)发病率较低,为0.66%。“幽门螺杆菌胃炎京都全球共识报告”会议指出,根除HP感染可以改善消化不良的症状,阻止黏膜损伤,降低胃癌的发病风险,降低非甾体抗炎药(NSAIDs)致胃肠道并发症的风险和预防相关消化性溃疡,积极为HP感染的患者提供根除治疗已达成共识。

长链非编码RNA RPLP0P2在胃癌组织中的表达及对胃癌细胞增殖的影响研究

目的探讨长链非编码RNA RPLP0P2在胃癌组织中的表达,及其对胃癌细胞增殖的影响。方法选取行手术切除治疗的胃癌患者56例,留取术中切除的胃癌组织与配对的癌旁正常组织,采用qRT-PCR法检测胃癌组织与癌旁正常组织RPLP0P2表达水平,并比较不同临床病理特征的胃癌患者胃癌组织RPLP0P2表达水平。采用转染小干扰RNA RPLP0P2(si-RPLP0P2)的方法敲除RPLP0P2,比较转染si-RPLP0P2与转染si-NC的胃癌BGC-823、SGC-7901细胞与正常胃上皮GES-1细胞增殖情况。结果除Borrmann分型、肿瘤大小以及是否有神经侵犯外,不同临床病理特征的胃癌患者胃癌组织RPLP0P2表达水平比较均无统计学差异(均P>0.05)。即胃癌患者胃癌组织RPLP0P2表达水平不受患者性别、年龄、肿瘤位置、肿瘤直径、肿瘤分化程度、TNM分期、Lauren分型、癌胚抗原、糖类抗原19-9等影响。与转染si-NC相比,转染si-RPLP0P2的胃癌BGC-823、SGC-7901细胞与正常胃上皮GES-1细胞增殖受抑制,即下调RPLP0P2会抑制细胞增殖。结论 RPLP0P2在胃癌组织中表达上调,下调RPLP0P2可抑制胃癌细胞增殖。RPLP0P2或可成为胃癌的生物标志物与潜在的治疗靶点。