建构主义视角下创新实验提升中外合作班医学生课程适应能力剖析

建构主义(Constructivism)认为学习是学习者主动建构自己知识的过程。中外合作办学已成为重庆医科大学医学本科教育改革的重要组成部分。重庆医科大学设立了多层级的创新实验项目,为临床医学中外合作办学专业(以下简称“国际班”)学生提供课外科研探索实践的机会,助力学生综合素养的提升。本研究基于建构主义学习理论,阐述国际班学生参与创新课题,逐渐建立医学知识学习的各种场景,最终使学生对所学知识产生意义建构,以更好地适应国际班课程的设置及投入专业课程的学习。

Aβ_(25-35)诱导PC12细胞内Ca^(2+)浓度升高和自噬发生

目的研究Aβ25-35对PC12细胞内Ca2+浓度和自噬发生的影响。方法培养PC12细胞,分别用0、5、10μmol/L Aβ25-35处理24 h,用MTT法测定细胞存活率,流式细胞仪检测细胞内Ca2+浓度,单丹磺酰戊二胺(monodansylcadaverine,MDC)染色观察自噬泡,共聚焦显微镜检测LC3-Ⅱ表达,透射电镜观察细胞超微结构。结果 5、10μmol/L Aβ25-35处理24 h后,PC12细胞存活率分别为(64.6±2.3)%和(41.3±4.1)%,与对照组相比显著下降(P<0.05),细胞内游离Ca2+浓度升高(P<0.05)。与此同时,随着Aβ25-35浓度升高,显微镜下可见细胞皱缩、变圆,与对照组相比,细胞内MDC阳性颗粒增多,LC3-Ⅱ荧光强度增强(P<0.05),与Aβ25-35呈浓度依赖关系。电镜下可见单(双)层膜样自噬体。结论Aβ25-35诱导PC12细胞发生自噬呈浓度依赖关系,其发生可能与细胞内游离Ca2+浓度升高有关。

低氧条件下中脑神经干细胞向多巴胺能神经元的分化

传统的帕金森氏病（Parkinson’s disease，PD）以药物治疗为主，随着病程进展治疗效果逐渐下降并出现精神和行为等方面的副作用。由于PD的病理变化是中脑黑质多巴胺能神经元特异性的坏死，导致多巴胺（dopamine，DA）及其代谢物释放的减少。故补充足够量的DA能神经元就成为治疗的一个关键。神经干细胞（neural stemcells，NSCs）的发现及相应培养、分离技术的进展为治疗带来了希望。近年来低氧对中脑神经干细胞作用的研究引起了广泛关注。本实验分离小鼠胚胎中脑组织NSCs，在低氧状态下观察其生长和分化的特点，并检测TH及NSE阳性神经元的比例。

AQP9在APP/PS1双转基因小鼠海马中的表达变化

目的:研究水通道蛋白9(aquaporin-9,AQP9)在阿尔茨海默病(Alzheimer’s disease,AD)模型小鼠海马中的表达变化。方法:9月龄APPswe/PS1d E9双转基因雄性小鼠和C57野生型雄性小鼠各12只,分别为AD模型组和对照组,采用水迷宫实验检测2组小鼠学习记忆能力,采用免疫组化、免疫印迹和q RT-PCR方法检测AQP9蛋白及其m RNA在以上2种小鼠海马中的表达。结果:水迷宫实验显示,与对照组比较,模型组小鼠找到平台的潜伏期显著加长,穿越平台次数明显减少(t=7.064,P=0.000)。免疫组化、免疫印迹和q RT-PCR结果分别显示:与对照组比较,AQP9的吸光度(absorbance,A)值在海马不同区域均增加(CA1:t=7.373,P=0.000;CA2:t=3.1,P=0.011;CA3:t=4.428,P=0.001;齿状回:t=5.285,P=0.000);AQP9蛋白表达增高(t=5.305,P=0.003);AQP9 m RNA表达水平增高(t=3.646,P=0.045)。结论:在APPswe/PS1d E9双转基因AD模型小鼠海马中,AQP9表达上调。

IGF-1对Aβ_(25-35)诱导PC12细胞凋亡的保护作用及其机制

目的探讨胰岛素样生长因子-1(insulin-like growth factor-1,IGF-1)对β-淀粉样蛋白25-35(amyloid-beta protein,Aβ_(25-35))诱导PC12细胞凋亡的保护作用及可能的信号机制。方法以10μmol/L Aβ_(25-35)处理PC12细胞作为阿尔茨海默病(Alzheimer’s disease,AD)细胞模型。实验分为对照组、Aβ_(25-35)处理组、IGF-1+Aβ_(25-35)处理组。条件孵育24 h,采用噻唑蓝比色法(methyl thiazolyltetrazolium,MTT)检测细胞存活率,Western blot检测各组细胞磷酸化-Akt(phospho-Akt,p-Akt)蛋白表达水平。结果 MTT法检测显示,10μmol/L Aβ_(25-35)孵育24 h,PC12细胞存活率为(39.8±3.7)%,与对照组[(100.0±2.3)%]相比显著下降(P<0.05)。IGF-1+Aβ_(25-35)处理组,PC12细胞存活率为(56.4±4.2)%,与Aβ_(25-35)处理组[(39.8±3.7)%]相比显著增高(P<0.05)。Western blot显示,IGF-1+Aβ_(25-35)处理组p-Akt蛋白表达水平(0.794±0.037)高于Aβ_(25-35)处理组(0.493±0.050),差异具有统计学意义(P<0.05)。结论 IGF-1能抑制Aβ_(25-35)所导致的PC12细胞凋亡,其保护作用可能与上调Akt磷酸化的表达有关。

单羧酸转运蛋白4在癫痫患者脑组织中的表达

目的检测癫痫患者脑组织中单羧酸转运蛋白4(monocarboxylate transporters 4,MCT4)的表达,以探讨其在癫痫发生中的作用。方法收集16例颞叶癫痫患者和6例脑外伤患者清创术后颞叶脑组织作为研究对象,采用免疫组织化学和免疫印记检测脑组织MCT4蛋白表达,并进行图像分析和统计学处理。结果免疫组织化学显示,对照组及癫痫组患者脑内均可见MCT4阳性细胞表达,IPP软件分析显示癫痫组脑内MCT4阳性细胞平均光密度值(0.266±0.012)高于对照组(0.230±0.023),差异具有统计学意义(P<0.05)。蛋白印记检测显示MCT4蛋白在癫痫患者脑内的表达水平(0.426±0.019)较对照组相比明显增加(0.311±0.044),差异具有统计学意义(P<0.05)。结论癫痫患者脑组织中MCT4表达增高,提示MCT4与癫痫脑内异常的能量代谢密切相关。

提高留学生局部解剖学实验教学质量的教学体会

为了提高留学生局部解剖学的教学质量,本教研室针对实验教学环节的特点及出现的问题进行了一系列探索和改进。具体措施包括编写有针对性和实用性的教学指导、重视平时成绩、建立形成性评价机制、采用多种灵活的授课形式和方法等。实践证明,以上措施可为留学生提供有效的学习指导,调动学生参与课堂教学的积极性和能动性,增加师生间良性互动,全面有效地对学生学习效果进行评价,从而为有效提高局部解剖学实验教学的教学质量奠定坚实的基础。

留学生局部解剖学教学特点分析

针对留学生局部解剖学教学在学生教育背景、教学实施、教材使用等环节出现的特点及问题进行分析,并探讨其应对措施,以期为提高留学生局部解剖学教学质量提供有益的经验。

局部解剖学课程学生考核评价体系的建设初探

为了更全面的反映和培养学生的综合学习能力,尝试建立了一套局部解剖学课程学生评价体系。该体系旨在确保理论教学效果的基础上,强化和巩固平时的实验教学效果。该评价体系包括课堂学习、标本考核、实验报告、网络学习和综合能力等环节的考核。实践证明,该体系的建立可有效弥补传统单一理论考核模式带来的弊端,取得了满意的教学效果。

对局部解剖学教与学的探索

为促进局部解剖学课程教学的实践和改革,提高教师的教学效果和医学生的学习效率,培养医学生的综合素质,本文着重从教师和学生两个角度,探讨在教学过程中影响教学效果的因素,并结合实际提出解决问题的方法和措施。

GDNF与IL-1β体外诱导小鼠中脑神经干细胞分化作用的实验研究

目的研究神经干细胞在体外向多巴胺能神经元分化的条件,为帕金森病的细胞移植治疗提供基础实验资料。方法体外培养扩增中脑神经干细胞,在有血清条件下分别予以GDNF,IL-1β及GDNF+IL-1β诱导分化,TH免疫细胞化学鉴定分化结果,流式细胞术检测TH阳性神经元比例。结果有血清条件下GDNF,IL-1β及两者联合促进中脑神经干细胞分化为TH阳性神经元的比例分别为13.41%,9.23%,15.59%,明显高于对照组(约3.49%,P≤0.01),GD-NF及联合诱导组多巴胺能神经元形态更成熟。结论GDNF,IL-1β及两者联合可明显促进中脑神经干细胞分化为多巴胺能神经元。GDNF较IL-1β更能促进诱导的多巴胺能神经元的表型成熟。

留学生系统解剖学课程学生考核评价体系的建立

我校自2001年开始成建制招收医学留学本科生来校学习。系统解剖学是留学生入校后最先接触的医学专业必修课,该课程的学习效果将对学生后续医学课程的学习产生重要影响。对留学生学习过程和效果进行客观评价是系统解剖学课程教学的一个重要环节,它既是教师获取教学反馈信息、改进教学方法的重要依据,又是促进学生调整学习策略、改进学习方法、提高学习效率的有效手段[1]。以往对本课程的考核采用单一的期末理论考试模式,在一定程度上可反映学生对基础理论知识的掌握。

单羧酸转运体-2在大鼠脑组织的定位

目的：观察单羧酸转运体-2（MCT2）阳性细胞在大鼠脑内的分布和形态特征。方法：尼氏染色，免疫组织化学和免疫荧光等。结果：MCT2在嗅球、端脑、间脑、小脑及脑干均有表达，主要定位于神经元的胞体和突起上；在嗅球、端脑和间脑，其表达广泛、分布均匀。在脑干，除了一般内脏运动核、内脏感觉核以外的其他躯体运动核和感觉核以及蓝斑核、下橄榄核、中缝核、巨细胞网状核、中间网状核、外侧网状核等非脑神经核团中的神经元有MCT2的表达。另外，在小脑髓质的小脑外侧核、小脑间位核、小脑内侧核也可见MCT2阳性神经元。MCT2阳性神经元的形态，在不同区域间存在差异。结论：MCT2阳性神经元在大脑皮质、海马、下丘脑、网状结构及神经核团等特殊区域分布，提示在生理条件下，MCT2在维持某些基本的生命活动中具有特殊的重要的作用。

解剖学教学中的科学记忆方法

人体解剖学是一门古老的形态学科，同时也是高等医学院校学生必修的专业基础课程，作为其他医学基础课程和临床课程的基础，人体解剖学的学习效果对医学生的成长具有极其重要的意义。但解剖学名词术语复杂繁多、学习内容枯燥乏味，学生普遍反映理解不易，记忆更为困难，导致其学习效率低下，并影响学生自信心的建立。因此，在解剖学教学中采用新的措施和方法，改变目前“填鸭式”教学及死记硬背的学习状态，以提高其学习效率，是急需解决的问题。为此，重庆医科大学人体解剖学教研室的教师在本科生解剖学教学实践中，根据记忆的特点，使用科学的记忆方法来指导课堂，将解剖学教学内容的学习与记忆的不同环节结合起来，有效提高了学生对解剖学知识的记忆效果和学习效率。现就实践中采取的措施予以报道交流，以促进人体解剖学教学的更快发展。

幼年大鼠脑膜炎脑水肿模型中水通道蛋白4的表达变化及内化

目的观察在幼年大鼠脑膜炎脑水肿模型中水通道蛋白4(aquaporin-4,AQP4)的表达变化及内化现象,探讨AQP4及其内化在脑膜炎脑水肿发生中的作用。方法采用幼鼠延髓小脑池注入B族溶血性链球菌建立细菌性脑膜炎模型,采用干湿质量法、伊文思蓝含量测定法、免疫印迹法分别检测脑膜炎幼年大鼠脑含水量、血脑屏障通透性以及AQP4的表达水平,运用免疫荧光双标的方法检测AQP4分别与早期内涵体标记物EEA1和晚期内涵体标记物MPR的共表达。结果 1实验组脑含水量(81.4±2.3)%较对照组(77.3±1.6)%明显增加(P<0.05);2实验组AQP4表达水平(57.41±7.00)%较对照组(44.50±7.45)%明显增加(P<0.05);3实验组依文思蓝含量(4.35±0.21)μg/g较对照组(4.27±0.33)μg/g无统计学差异(P>0.05);4脑膜炎模型中,AQP4分别与EEA1和MPR共表达。结论在幼年大鼠脑膜炎脑水肿模型中,脑内AQP4表达上调,同时存在AQP4内化的现象。

生命视角下人体解剖学课程思政教学与实践体系的构建及拓展

习近平总书记在全国高校思想政治工作会议上指出,“要坚持把立德树人作为中心环节,把思想政治工作贯穿教育教学全过程,实现全程育人、全方位育人,努力开创我国高等教育事业发展新局面”[1]。在这一宏大的历史背景下,医学专业教师落实“课程思政”对大学生“价值引领”的举措很多,在教学内容、教学方法、教学评价等角度都有涉猎[2-4],形式多样而效果欠佳,原因在于未能找准育人角度。

留学生解剖学网络考试系统的构建和实施

考试是检验学生对所学知识的掌握程度和评估教师教学质量的手段,对促进学生学习和改进教师教学均起到重要作用[1,2]。解剖学课程特点是名词多、描述多、内容枯燥、难记忆,因此,在面对解剖学课程考试时,学生感受压力偏大。而留学生来自世界各地,由于文化的差异,他们在学习过程中重讨论和实践,轻记忆,在解剖学课程的考试中留学生相对中国学生会出现更多困难,引发学生考试纪律涣散、教师出题难度不易把握、阅卷工作任务繁重等问题出现。

半胱氨酸蛋白酶-12表达与细胞色素C释放在脊髓压迫性损伤后少突胶质细胞凋亡中的作用

目的:探讨半胱氨酸蛋白酶-12(Caspase-12)表达与细胞色素C(cytochrome-C,Cyto-C)释放在脊髓压迫性损伤(compressed spinal cord injury,CSCI)后少突胶质细胞凋亡中的作用。方法:采用自行设计的方法制作脊髓压迫模型,通过原位细胞凋亡染色于压迫后1、3、7 d检测CSCI后少突胶质细胞凋亡;运用Western blot技术从分子水平分别检测与细胞凋亡有关的Caspase-12和Cyto-C的表达。结果:不同组别凋亡的少突胶质细胞数目不全相同(F=30.946,P=0.000),LSD-t法两两比较,1、3、7 d模型组凋亡的少突胶质细胞数目均高于正常组(P=0.000)。与对照组、1 d组、3 d组相比,7 d组凋亡的少突胶质细胞数目最多,组间比较,差异有统计学意义(P=0.000)。不同组别Caspase-12和Cyto-C蛋白表达不全相同(F分别等于1 402.646和326.638,P=0.000),LSD-t法两两比较,1、3、7 d模型组的Caspase-12和Cyto-C蛋白表达均高于正常组(P=0.000),与对照组、1 d组、3 d组相比,7 d组的Caspase-12和Cyto-C蛋白表达水平均最高,组间比较,差异有统计学意义(P=0.000)。结论:CSCI后出现了少突胶质细胞凋亡,其凋亡机制可能与Caspase-12表达增强及Cyto-C释放共同作用有关。

低氧促进神经干细胞增殖分化过程中低氧诱导因子-1α表达的变化

目的:观察小鼠胎脑皮质神经干细胞(NSCs)在体外低氧条件下细胞增殖与分化以及低氧诱导因子-1α(HIF-1α)的表达情况,分析HIF-1α对NSCs增殖与分化的作用。方法:体外低氧条件下(3%O2)培养扩增胚鼠皮质来源的细胞,实验分低氧1、2、3、4d组,常氧组为对照。免疫细胞化学染色法鉴定神经干细胞及其子代细胞,RT-PCR检测实验组细胞HIF-1α mRNA的表达。结果:低氧4d组细胞呈HIF-1α阳性,其余HIF-1α为阴性。实验组神经元特异性烯醇酶(NSE)平均灰度值进行性增加。各实验组HIF-1α mRNA与对照组相比具有显著性差异。结论:在低氧能促进NSCs的增殖与分化过程中,HIF-1α表达变化可能在其中发挥了重要作用。