目的探讨五倍子瘢痕膏提取液通过micro RNA-21(mi R-21)对瘢痕疙瘩成纤维细胞哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mammalian target protein of rapamycin,m TOR)信号通路的调控作用及对其增殖、凋亡的影响。方法 mi R-21mimic、inhibitor转染至人...目的探讨五倍子瘢痕膏提取液通过micro RNA-21(mi R-21)对瘢痕疙瘩成纤维细胞哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mammalian target protein of rapamycin,m TOR)信号通路的调控作用及对其增殖、凋亡的影响。方法 mi R-21mimic、inhibitor转染至人瘢痕疙瘩成纤维细胞,予以五倍子瘢痕膏提取液干预后,分别采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)、Western Blot检测mi R-21、10号染色体张力缺失蛋白磷酸酶(phospatase and tensin homologdeleted on chromasom ten,PTEN)、磷脂酰肌醇3-激酶(phosphatidylinositol 3-kinase,PI3K)、磷酸化蛋白激酶B(p-Akt)、p-mTOR表达情况。双萤光素酶报告基因验证mi R-21对PTEN mRNA的靶向作用;CCK8法及流式细胞仪检测瘢痕疙瘩成纤维细胞增殖、凋亡情况。结果双萤光素酶报告基因验证mi R-21能够靶向调控瘢痕疙瘩成纤维细胞PTEN mRNA表达;在瘢痕疙瘩成纤维细胞中过表达mi R-21可下调PTEN mRNA和蛋白表达水平,以及上调p-Akt、p-mTOR蛋白表达水平,从而促进其增殖、抑制其凋亡。而五倍子瘢痕膏提取液能减弱这一作用且呈浓度依赖性,抑制mi R-21表达则呈现相反的作用。结论五倍子瘢痕膏提取液抑制瘢痕疙瘩成纤维细胞增殖的机制与其通过mi R-21上调m TOR信号通路中PTEN表达,进而下调p-Akt、p-mTOR表达有关。展开更多
